点击显示 收起
【摘要】 目的 探讨生育期妇女子宫内膜息肉组织中雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、孕激素受体（PR）及Bcl2的表达及意义。方法 用免疫组织化学PV 6000法，检测110例子宫内膜息肉组织ERα、ERβ、PR及Bcl2的表达，并采用Image Pro Plus 6.0图像分析软件进行分析。以45 例正常子宫内膜作对照。结果 在增殖期，内膜息肉组织中ERα及ERβ的表达水平与正常子宫内膜比较差异无统计学意义(P>0.05),而PR的表达水平低于正常内膜(t=2.589,P<0.05),Bcl2的表达水平高于正常内膜(t=2.716,P<0.01)。在分泌期，内膜息肉组织中 ERα及Bcl2表达水平高于正常子宫内膜，PR的表达水平低于正常子宫内膜，差异均有显著性(t=2.574、2.581、2.579,P<0.05),ERβ的表达水平与正常内膜比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ERα、Bcl2的高表达和PR相应的低表达可能是子宫内膜息肉形成的病因， ERα可能是在子宫内膜息肉形成过程中发挥主要作用的雌激素受体亚型。
【关键词】 息肉 子宫内膜 雌激素受体α 雌激素受体β 孕激素受体 基因 bcl2
THE EXPRESSIONS AND THEIR SIGNIFICANCE OF ERα,ERβ,PR AND Bcl2 IN ENDOMETRIAL POLYPS
CAI HUIHUI, WEI ZHIMIN, ZHAO JIE, et al
Department Gynecology and Obstetrics, The Affilated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China
［ABSTRACT］ Objective To investigate the expressions and their significance of estrogen receptor α (ERα), estrogen receptor β (ERβ), progesterone receptor (PR) and Bcl2 in endometrial polyps of women at reproductive age. Methods Endometrium was collected from 110 patients with endometrial polyps (EP) and 45 normal controls. Immunohistochemistry of PV 6000 was used to detect the expressions of ERα,ERβ,PR and Bcl2, Image Pro Plus 6.0 software was used to analyze the images. Results During proliferative phase,the ERα and ERβ in EP group was not statistically different compared with the control (P>0.05); whereas PR was significantly lower (t=2.589,P<0.05) and Bcl2 was higher (t=2.716,P<0.01) in the EP group compared with the control. During secretory phase, the ERα and Bcl2 were higher and PR was lower in the EP group than in the control (t=2.574,2.581,2.579;P<0.05). There was no significant difference in the expression of ERβ between the two groups (P>0.05). Conclusion The higher expression of ERα and Bcl2, as well as lower expression of PR may contribute to the development of endometrial polyps. ERα might be the major subtype of estrogen receptor playing a critical role in the formation of endometrial polyps.
［KEY WORDS］ Polyps; Endometrium; Estrogen receptor alpha; Estrogen receptor beta; Receptor progesterone; Genes, bcl2
子宫内膜息肉（EP）是妇科常见病，在青春期后的任何年龄均可发生，临床可表现为不规则阴道流血、经量增多、不孕,3%的病人可发生癌变[1]。病理表现为子宫内膜基底层腺体和间质出现局限性增生，息肉中心有明显的胶原化纤维间质，间质中含有成熟的厚壁血管；腺体往往呈囊状扩张、扭曲，衬覆静止的或微弱增殖的腺上皮[2]。其发病机制尚不明确，目前普遍认为的机制之一为其发生与体内雌孕激素表达水平失衡及凋亡基因的表达异常有关。本研究采用免疫组化PV 6000法检测雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、孕激素受体（PR）及Bcl2在子宫内膜息肉组织中的表达，探讨其在子宫内膜息肉发生及发展过程中的作用。
1 材料与方法
1.1 一般资料
青岛大学医学院附属医院2005年1月～2007年3月存档子宫内膜息肉石蜡标本110例（为非绝经期，并经宫腔镜检查或诊刮及病理组织学证实），其中增生期息肉56例，病人年龄36～45岁，平均（40.0±3.5） 岁；分泌期息肉54例，病人年龄38～44岁，平均（41.0±2.5） 岁。正常月经周期子宫内膜组织标本45例，取自因宫颈癌行子宫切除者（经病理组织学检查证实为正常子宫内膜），其中增生期内膜28例，病人年龄30～45岁，平均（36.0 ±6.5）岁；分泌期内膜17例，病人年龄34～42岁，平均（37.5 ±2.6）岁。所有病人就诊前3个月内均无性激素用药史，根据末次月经时间及病理组织学确定标本所处的月经周期阶段，绝经后病例未被选入。
1.2 检测方法
采用PV 6000免疫组织化学法检测石蜡标本组织中ERα、ERβ、PR及Bcl2蛋白在腺上皮内的表达情况，所有切片采用同一批试剂完成。用已知乳癌切片作为阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。
1.3 定量分析方法
ERα、ERβ及PR阳性细胞的胞核着棕黄、棕褐色，Bcl2阳性细胞胞浆着棕黄、棕褐色，采用Image Pro Plus 6.0图像分析软件进行分析，每张切片在高倍镜下（400倍）随机选取5个视野，测出每个视野阳性细胞的平均吸光度（A）值，分别代表ERα、ERβ、PR和Bcl2的表达量。
2 结果
在正常子宫内膜组织中，ERα、PR及Bcl2在增殖期的表达均高于分泌期(t=2.600、2.587、2.439,P<0.05)，ERβ在增殖期及分泌期均呈弱阳性表达(t=1.694,P>0.05)。在子宫内膜息肉组织中，ERα、PR及Bcl2在增殖期的表达均低于分泌期(t=2.278、2.823、2.274,P<0.05)；ERβ在增殖期及分泌期均呈较低水平表达(t=1.650,P>0.05)。增殖期内膜息肉组织与同期正常子宫内膜组织比较， PR表达水平降低(t=2.589,P<0.05)，Bcl2表达水平升高(t=2.716,P<0.01)；ERα和ERβ表达强度差异无显著性(t=1.690、1.691、P>0.05)。分泌期内膜息肉组织与同期正常子宫内膜组织比较，ERα表达水平升高，PR表达水平降低，Bcl2表达水平升高，差异均有显著性(t=2.574、2.581、2.579，P<0.05)，ERβ表达强度差别无显著性(t=1.682,P>0.05)。见表1。表1 正常子宫内膜和内膜息肉组织中ERα、ERβ、PR及Bcl2蛋白的表达(略)
3 讨 论
在正常妇女的月经周期中，子宫内膜ER、PR含量呈周期性变化。雌激素不仅能刺激子宫内膜ER、PR合成，还能促进子宫内膜的生长，孕激素则具有抑制ER的作用，同时抑制子宫内膜的生长。雌激素的作用又是通过调节子宫内膜细胞中特异激素受体水平来实现的。随着对甾体类激素作用原理研究的不断深入，人们逐步认识到，虽然血液中性激素水平正常，但由于靶细胞缺乏受体或受体异常，该激素仍然不能发挥生理效应而导致一些妇科疾病的发生[3,4]。
Bcl2属于原癌基因Bcl2基因家族，在各种细胞类型中发挥作用[5],具有抑制细胞凋亡的作用[6]，其机制可能是通过抑制氧自由基、抑制细胞内细胞器的Ca2+内流、阻止p53诱导的凋亡和生长停止、拮抗原癌基因cmyc作用等发挥作用[7～9]。REBECCA等[10]的研究表明，Bcl2在月经周期各时相的子宫内膜中呈规律性表达，在增殖期Bcl2表达渐增强，排卵前达峰值，排卵后迅速降低，并于分泌后期及经期呈关闭状态， 这与正常子宫内膜的周期性脱落规律是一致的，说明Bcl2的规律表达可以维持子宫内膜的周期变化：增殖期Bcl2高表达，促进细胞增殖，抑制子宫内膜细胞凋亡；而分泌期Bcl2弱表达，促进细胞凋亡，抑制内膜细胞的过度增殖，防止疾病的发生。
本文实验结果显示，在正常子宫内膜中，增殖期ERα呈高水平表达，分泌期ERα表达弱于增殖期，ERβ在两期中均呈低水平表达。而在子宫内膜息肉组织中，增殖期ERα与正常内膜无差异，分泌期ERα表达水平较同期正常内膜增高, ERβ在两期中的表达与正常内膜无差异，提示ERα可能是在子宫内膜息肉形成过程中发挥主要作用的雌激素受体亚型; 而ERβ在整个月经周期中稳定表达也为局部内膜在分泌期仍接受雌激素持续刺激提供了受体条件，促进了内膜息肉的形成。
在子宫内膜息肉组织中，无论增殖期还是分泌期PR表达水平均较正常内膜低，提示息肉组织中低PR的表达使得其对孕激素的敏感性及反应力下降，减弱了息肉组织中孕激素抑制ER生成的作用，导致这部分内膜组织中ER持续高水平表达,持续受雌激素刺激而不能在分泌期正常脱落,过度增生形成息肉。这一结果也进一步支持了内膜息肉形成的激素受体学说。
本实验研究结果还显示，在月经周期相同时相中,Bcl2在内膜息肉组织中的表达水平均高于同期正常内膜组织，特别是在增殖期子宫内膜息肉组织中,其表达水平远远高于正常内膜组织,这说明内膜息肉的形成还与Bcl2的高水平表达及其抑制凋亡作用有关，Bcl2的高水平表达使局部内膜息肉组织中细胞过多增殖而逃脱了周期性坏死脱落。在月经周期不同时相中,无论正常内膜组织还是内膜息肉组织，分泌期组织中Bcl2的表达水平均低于增殖期同组组织，说明在子宫内膜息肉组织中同样存在少量凋亡的发生。这也可以用来解释临床上子宫内膜息肉病人为什么存在不规律阴道流血。
综上所述，子宫内膜息肉形成的原因可能与ERα、Bcl2的高表达和PR的相应低表达有关，ERα可能是子宫内膜息肉组织雌激素受体中的主要表达亚型。
【参考文献】
[1]BENARIE A, GOLDCHMIT C, LAVIV Y, et al. The maliganat potential of endometrial polyps[J]. EUR J OBSTET GYNECOL REPROT BIOL, 2004,115(2):206210.
[2]徐婷,陆惠娟. 子宫内膜息肉的临床病理分析及与宫腔镜诊断的比较[J]. 中国妇幼保健, 2005,20:10681069.
[3]苏应宽,徐增祥,江森. 新编实用妇产科学[M]. 济南: 山东科学技术出版社, 1995:56.
[4]彭雪冰,夏恩兰. 子宫内膜息肉中雌激素受体和孕激素受体的表达特点及意义[J]. 首都医科大学学报, 2006,27(1):117119.
[5]PAVEL H, IVANA O, JANA B, et al. Apoptosis and expression of Bcl2 in human endometrium in natural and artificial cycles[J]. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub, 2005,149(2):303307.
[6]刘伟,于文成,秦筱梅. 非小细胞肺癌Bcl2及Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系[J]. 青岛大学医学院学报, 2006,41(2):149150.
[7]AMSTAD P A, LIU H, ICHIMIYA M, et al. Bcl2 is involved in preventing oxidantinduced cell death and in decreasing oxygen radical production[J]. Redox Rep, 2001,6(6):351362.
[8]HE H, LAM M, MCCORMICK T S, et al. Maintenance of calcium homeostasis in the endoplasmic reticulum by Bcl2[J]. J Cell Biol, 1997,138(6):12191228.
[9]EISCHEN C M, PACKHAM G, NIP J, et al. Bcl2 is an apoptotic target suppressed by both cmyc and E2F1[J]. Oncogene, 2001,20(48):69836993.
[10]REBECCA K, JONES, ROGER F, et al. Apoptosis and Bcl2 expression in normal human endometrium,endometriosis and adenomyosis[J]. Human Reproduction, 1998,13(12):34963502.
作者单位：青岛大学医学院附属医院，山东 青岛 266003