乙型肝炎病人及其配偶HBV血清标志物检测

【摘要】  目的 比较分析乙型肝炎病人及其配偶HBV血清标志物的检测结果。方法 采用ELISA法和荧光PCR法对316例乙型肝炎病人及其配偶进行乙型肝炎五项指标与HBV DNA定量检测。结果 HBV DNA的阳性率和含量在HBeAg(+)与HBeAg(-)组差异均有显著意义（χ2=31.97、68.79，P<0.01）；HBsAg的相对滴度与HBV DNA的含量关系不密切。乙型肝炎病人配偶HBV感染率为58.2%，有4例HBV DNA含量>1.0×106 copies/L。结论 HBeAg与HBV的复制和HBV DNA的高含量关系密切，而HBsAg的相对滴度则不能反映HBV的复制程度及传染性强弱。配偶间的密切接触可以引起HBV感染，但很少导致HBV DNA在体内的存在和复制。

【关键词】  肝炎 乙型 DNA 病毒 生物学标记

　　DETECTION OF SERUM HBV MARKERS IN PATIENTS WITH HEPATITIS B AND THEIR SPOUSES

　　YANG KUIZHEN, ZHAO HAIYAN,  LI XIAOFEI

　　(Department of Laboratory, Qingdao Hospital for Infectious Diseases, Qingdao 266033, China)

　　［ABSTRACT］ObjectiveTo compare and analyze the HBV markers detected from patients with hepatitis B and their spouses. MethodsUsing ELISA and fluorescence PCR, 316 patients and their spouses underwent detection of five items (markers) of hepatitis B and quantitative detection of HBV DNA.ResultsThe differences between HBeAgpositive and HBeAgnegative groups were significant in terms of positive rates and contents of HBV DNA (χ2=31.97,68.79;P<0.01). No close association was found between HBsAg titer and contents of HBV DNA. The HBV infection rate of patients’ spouses was 58.2%, HBV DNA contents of four of them being higher than 1.0×106 copies/L. ConclusionA close relationship exists between HBeAg,  HBV replication and highcontent HBV DNA, while the relative HBsAg titer can not reflect the extent of HBV replication and the infectivity. Close contact between spouses contributes HBV infection, but rarely lead to the existence of HBV DNA in the body and reproduction.
    
　　［KEY WORDS］Hepatitis B; DNA, viral; Biological markers
     
　　为了比较分析乙型肝炎病人HBV血清标志物之间的相关性及其配偶HBV的感染情况，本文采用ELISA法和荧光PCR法对316例乙型肝炎病人及其配偶进行了乙型肝炎五项指标与HBV DNA定量检测，现将结果报告如下。

　　1   材料与方法

　　1.1   材料
    
　　316例乙型肝炎病人均为2004年12月～2007年2月我院住院病人， 男205例，女111例，年龄为33～68岁，平均40.5岁。其中慢性肝炎196例，肝硬化88例，重度肝炎19例，肝癌13例。诊断均符合2000年全国传染病寄生虫病学术会议修订的诊断标准。其配偶均为一起生活5年以上且全部否认家族史、注射史和输血史。所有病人入院后收集本人及配偶的血清一并冷冻保存备测。

　　1.2   方法
    
　　乙型肝炎五项指标测定应用ELISA法，试剂由厦门新创实业有限公司提供，标本吸光度由Pasteur酶标分析仪自动测得。HBV DNA的检测采用荧光PCR法，Light Cycler全自动荧光定量PCR分析仪购自罗氏诊断公司，试剂由深圳匹基生物公司提供，严格按其说明书进行操作。定量检测线性范围为1.0×106～5.0×1011 copies/L。

　　2   结果

　　2.1   HBeAg(+)与HBeAg(-)组HBV DNA阳性率的比较
    
　　316例乙型肝炎病人中HBeAg(+)131例，HBeAg(-)185例。HBeAg(+)组有127例HBV DNA阳性(＞1.0×106copies/L)，该组的阳性率为96.9%，其中有82例超过试剂仪器的检测范围(＞5.0×1011copies/L)；HBeAg(-)组有112例HBV DNA阳性，阳性率为60.5%，其中有27例HBV DNA＞5.0×1011 copies/L。两组HBV DNA阳性率相比较，差异有显著意义（χ2=31.97，P<0.01）；HBeAg(+)组中HBV DNA＞5.0×1011 copies/L者多于HBeAg(-)组（χ2=68.79，P<0.01）。

　　2.2   HBsAg相对滴度与HBV DNA含量的关系
    
　　HBsAg相对滴度以S/CO值表示，S表示样品吸光度（A）值，CO表示Cutoff值。按HBV DNA含量高低将病人分为2组：1.0×106 copies/L0.05）。

　　2.3   乙型肝炎病人配偶各项指标检测
    
　　316例乙型肝炎病人配偶乙型肝炎五项指标全阴性132例，抗HBs(+)128例，抗HBs(+)、抗HBe(+)或抗HBs(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+) 36例，抗HBc(+)13例，抗HBe(+)5例，HBsAg(+)、抗HBc(+)、抗HBe(+)2例，HBV感染率为58.2%。有4例HBV DNA含量＞1.0×106 copies/L，分别为3.21×107、2.10×106、1.33×106、1.26×106 copies/L, 这4例乙型肝炎五项指标结果分别为HBsAg(+)、 抗HBc(+)、抗HBe(+)2例和抗HBs(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)2例。其他312例HBV DNA含量均＜1.0×106 copies/L。304例肝功能正常，有12例ALT为42～76 U/L，B超显示9例为脂肪肝或乙醇肝。

　　3   讨论
    
　　本文结果表明，HBeAg是反映HBV DNA复制的良好指标，与HBV DNA含量有显著相关性，这与传统观点一致[1]。以往认为HBeAg的消失或抗HBe的出现预示病毒复制水平降低或病变恢复，许多学者对此有了新的不同认识[1,2]。本文结果显示，HBeAg(-)185例有112例HBV DNA含量＞1.0×106copies/L，同时有27例＞5.0×1011 copies/L，表明HBeAg(-)的病例中仍有一部分HBV处于复制状态，而且复制水平较高。
    
　　本文结果显示，HBsAg相对滴度与HBV DNA含量并无密切相关性，这表明HBsAg阳性为HBV感染的一个重要指标，但它不反映病毒有无复制、复制程度及传染性的强弱[3]。
    
　　本文316例乙型肝炎病人的配偶有184例不同程度出现了HBV血清标记物，其感染率达到了58.2%，其中有4例HBV DNA含量超过了1.0×106 copies/L，即HBV DNA阳性，这表明除了垂直及血液传播外，通过唾液、精液、分泌物和性交等密切接触同样可引起HBV感染，使一部分人产生了保护性抗体或出现其他HBV血清标记物。但这种感染往往是少量多次的，绝大多数接触者的体内没有HBV DNA的存在和复制，即使有也是低含量的。结合其他检查结果这些接触者目前还无1例是因为HBV引起乙型肝炎。有作者认为，当ALT正常HBV DNA低含量时不要滥用药物也无需进行抗病毒治疗[4]。所以，对HBV的感染途径应有清楚和新的认识，不应该歧视和拒绝那些乙型肝炎病人或HBsAg携带者甚至恢复者。
    
　　HBV的垂直传播历来为人们所重视，流行病学资料显示，垂直传播引起的婴儿HBV感染是慢性乙型肝炎、肝硬化、肝坏死和肝癌的重要病因之一[4]。本文316例乙型肝炎病人的感染史也表明了垂直传播的危险性。HBV宫内感染又是比较复杂的问题，如何有效阻断HBV母婴垂直传播，而针对有家族史的成员进行乙型肝炎知识的普及宣传、培训学习，加强提前预防免疫，是我们疾病预防工作者的工作重点[5]。而那些与乙型肝炎病人密切接触者同样需要早预防早接种，以获得有效主动的免疫力，尽可能地预防和减少乙型肝炎的发生。
    
　　本文有2例HBsAg(-)而抗HBs（+）的接触者HBV DNA呈阳性，这具有一定的隐蔽性，有可能给供血源筛选带来隐患[6]。虽然目前加强了血液及血液制品的管理，但血液管理部门特别是一些地方部门单纯针对HBsAg的筛选是不够的，还要进行乙型肝炎五项指标甚至HBV DNA的检测，以真正地杜绝HBV的血液传播。

【参考文献】
  　　[1]门可. E系统和HBV母婴传播的关系[J]. 国外医学:病毒分册， 1995,4（2）：110112.

　　[2]张福奎,贾继东,王宝恩. 慢性乙型肝炎的治疗[J]. 中华肝脏病杂志， 2000,8（3）：253255.

　　[3]张玲,徐山,尚文莉. 乙型肝炎病毒核酸检测与临床关系[J]. 中华肝胆病杂志， 2002，10（1）：51.

　　[4]李欣华,蒋群,武蓉珍. HBVDNA定量与乙肝血清标志物之间关系探讨[J]. 临床肝病杂志， 2003，19（2）：118119.

　　[5]许红梅. 母婴传播后母体内乙型肝炎病毒前S/S基因突变研究[J]. 中华肝脏病杂志， 2003,7（5）：398401.

　　[6]李琼,王仪. 抗HBs（-）患者血清HBV DNA定量检测[J]. 临床肝病杂志， 2003,6（2）：167168.

作者单位：青岛市传染病医院检验科，山东 青岛 266033