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关键词 大肠肿瘤 血管内皮生长因子 免疫组织化学
The expression of bcl-2and VEGF and their significance in human colorectal adenoma
Zhu Wenjie，Li Jianhua
Department of Digestion of Liaohua Hospital，Liaoyang，Liaoning111003
【Abstract】 Objective To investigate the expression of bcl-2and VEGF in colorectal adenoma with maligˉnant transformation.Methods Bcl-2and VEGF were detected immunohistochemically in92cases of colorectal adeˉnoma with mild，severe abnormal hyperplastic and canceration areas.Results The positive rate of bcl-2and VEGF in severe hyperplastic area and canceration area is significantly higher than that of mild hyperplastic area and normal area（P<0.05）.Conclusion Bcl-2and VEGF play an important role in occurrence of colorectal carcinoma.
Key words colorectal carcinoma VEGF immunohistochemitry
大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，从正常的大肠粘膜上皮细胞到癌变是多步骤、多基因激活的结果。bcl-2被公认为细胞凋亡的重要控制基因 ［1］ ，实体瘤的生长需要持续的血管生成 ［2］ ，两者可能在肿瘤形成过程中发挥重要作用。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集1997年10月～2003年10月辽化医院及中国医科大学第一临床学院大肠息肉癌变病例的切除标本92例，其中男53例，女39例;年龄31～83岁，平均年龄53.7岁，肿瘤大小≥2cm者44例，<2cm者48例。所有标本均伴有不同程度的异型增生，实验中分两类:重度（Ⅲ级）和轻度异型增生（Ⅱ级或Ⅰ级）。另取10例正常大肠粘膜作对照组。
1.2 实验方法 所有标本均经中性甲醛固定，石蜡包埋后4μm连续切片，分别进行HE染色和免疫组织化学染色标记bcl-2和VEGF表达情况。抗体及即用型免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。已知阳性片作阳性对照，PBS替代一抗作阴性对照。
1.3 结果判定 bcl-2和VEGF均以胞浆、胞膜棕黄色为阳性，且阳性细胞数超过10%。
1.4 统计学方法 采用χ 2 检验，以P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 bcl-2蛋白表达 10例正常大肠粘膜均未见阳性表达，腺瘤癌变区与腺瘤轻重度异型增生区表达情况见表1， 大肠腺瘤重度异型增生区及癌变区bcl-2蛋白表达较轻度异型增生区明显增高（P<0.05），差异有显著性，重度异型增生区及癌变区之间差异无显著性（P>0.05）。表1 92例大肠腺瘤癌变组织bcl-2蛋白表达
2.2 VEGF蛋白表达 10例正常大肠粘膜有1例阳性表达，腺瘤癌变区与腺瘤轻重度异型增生区表达情况见表2，大肠腺瘤轻、重度异型增生区及癌变区VEGF蛋白表达较正常大肠粘膜明显增高，差异有显著性（P<0.05），大肠腺瘤轻、重度异型增生区及癌变区之间VEGF蛋白表达差异无显著性（P>0.05）。 表2 VEGF在正常大肠粘膜和腺瘤及癌变组织的表达n 阳性 阴性 阳性率（略）
3 讨论
bcl-2是抗凋亡基因，不仅抑制细胞凋亡，而且还延长细胞周期 ［3］ 。本实验结果显示，bcl-2异常表达在大肠腺瘤重度异型增生区及癌变区明显增加，使已发生癌变的及有明显癌变倾向的细胞寿命延长、堆积，从而形成癌性肿块。同时，两者之间差异无显著性，这一现象说明，重度异型增生不仅在形态上与癌变组织非常相似，而且在细胞增殖过程中分子水平已呈现与癌细胞相似的特征。通过内镜技术切除大肠腺瘤，并检测bcl-2蛋白可能作为早期诊断大肠腺瘤癌变的重要参考指标之一。
实体瘤的生长与肿瘤血管生成关系密切 ［4］ ，研究资料表明，肿瘤血管形成受肿瘤细胞或肿瘤间质的免疫细胞分泌的血管形成因子调节。血管内皮生长因子（VEGF）是血管形成因子最重要的，它是一种糖基化内分泌性多肽因子，分子量约4.3kD，可直接作用于血管内皮细胞。促进新生血管生长 ［5］ 。本研究中，VEGF在轻、重度异型增生区及癌变区的表达均明显高于正常大肠粘膜，证明VEGF有诱导肿瘤血管形成的作用。但它的发生早于bcl-2基因蛋白， 两者共同参与了大肠腺瘤的发生及恶性转化的过程，检测 上述基因蛋白可作为临床对大肠腺癌早期诊断、早期治疗的重要指标。
参考文献
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作者单位:1111003辽宁省辽阳市辽化医院消化内科
2110001辽宁沈阳中国医科大学病理系
（收稿日期:2004-02-15）
（编辑李 木）