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从霍乱样粪便标本中分离出1株拟态弧菌

来源:中华医学研究杂志
摘要:2005年9月,我们从1例急性腹泻病人标本粪便中,分离出1株拟态弧菌,现将结果报告如下。2增菌分离培养取部分含少量粘液的水样便加入碱性蛋白胨水中,经37℃增菌10h后,挑取表面培养物接种4号琼脂平板(江苏省疾控中心微生物试剂厂生产,效期内使用)上,置37℃培养18~24h,平板上可见较大的疑似霍乱弧菌的菌落。3血清......

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  2005年9月,我们从1例急性腹泻病人标本粪便中,分离出1株拟态弧菌,现将结果报告如下。

    1  材料与方法

    1.1  标本来源及临床症状  腹泻标本1份,取自一65岁女性患者,水样便,量多,5~10次/d,粘液,伴胃寒、恶心、呕吐,无腹痛、发热;患者急性期及恢复期血清。

    1.2  增菌分离培养  取部分含少量粘液的水样便加入碱性蛋白胨水中,经37℃增菌10h后,挑取表面培养物接种4号琼脂平板(江苏省疾控中心微生物试剂厂生产,效期内使用)上,置37℃培养18~24h,平板上可见较大的疑似霍乱弧菌的菌落。挑选可疑菌落接种3.5%氯化钠三糖铁斜面培养基,37℃培养18~24h。

    1.3  血清学试验  取4号琼脂平板上的可疑菌落用霍乱弧菌O1群多价及O139型诊断血清(兰州生物制品研究所生产,效期内使用)做玻片凝集试验。

    1.4  染色镜检  挑取3.5%氯化钠三糖铁培养基上低层变黄,葡萄糖产酸不产气,斜面不变,乳糖、蔗糖不分解,有动力,不产硫化氢的培养物进行涂片并作革兰染色后镜检。

    2  结果

    2.1  菌落特征  在4号琼脂平板上,菌落呈圆形,扁平,光滑湿润,边缘整齐,直径2~3mm,浑浊,中心呈灰黑色,无水溶性色素。

    2.2  其他特征  该菌为革兰阴性无芽胞杆菌,霍乱O1、O139血清玻片凝集试验阴性,氧化酶试验阳性,在无盐胨水和3%氯化钠胨水中生长良好,在7%和10%氯化钠胨水中不生长。赖氨酸脱羧酶试验、靛基质试验、枸橼酸盐利用、明胶液化试验阳性;精氨酸双水解酶试验、V-P试验、KCN生长试验阴性;分解甘露醇、甘露糖;不分解阿拉伯糖、肌醇、水杨苷、鼠李糖。

    分别采患者急性期和恢复期血清,与所分离到的细菌做试管凝集试验,结果恢复期血清凝集效价较恢复期有明显增高(大于4倍)。

    综合以上形态学、血清学、生化、双份血清抗体及嗜盐性试验,结果均与文献描述的拟态弧菌特征相符,由此确定该菌株为拟态弧菌。

    3  讨论

    致病性弧菌不但可引起人类的胃肠炎,同时还可导致肠道外感染,对其研究越来越受到国内外学者的广泛关注。在我国沿海地区,夏、秋季急性感染性腹泻病人粪便中,致病性弧菌的检出率已超过志贺菌属和沙门菌属,成为我国沿海地区散发性、流行性腹泻和食物中毒的重要致病菌。这类弧菌广泛分布于自然界水体中,属于正常海洋微生物群,当夏、秋季海水表面温度升高>15℃时,细菌迅速繁殖而达到感染量,海产品中带菌率相应增加,人们生吃了被污染的海产品或储存不当生熟交叉污染的食品就会引起发病。

    拟态弧菌原被归纳为不凝集弧菌或称为O1群霍乱弧菌。现已确认为感染性腹泻的一种新的病原菌,可引起散发性传播或在局部地区爆发霍乱样腹泻,亦有报道能引起伤口感染和败血症等肠道外感染。本次从疑似“霍乱”病人粪便中分离出的拟态弧菌,其临床症状、大便性状与霍乱弧菌极为相似。提示我们:在疑似霍乱病人粪便细菌学诊断过程中,对选择性平板上的可疑菌落,若用霍乱弧菌O1群多价及O139诊断血清作玻片凝集试验为阴性者,应进一步做其他致病性弧菌的鉴定,对夏、秋季急性腹泻病人的粪便培养不能仅做霍乱弧菌和大肠杆菌O157的分离,而忽视其他致病性弧菌的分离鉴定。

    作者单位: 214500 江苏靖江,靖江市疾病预防控制中心

    (编辑:悦  铭)

作者: 张满珍 2006-8-19
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