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微量加样器作为一种简便、快捷的移液量具,已被各级医院检验科广泛使用。其吸入量是否准确和使用方法是否得当,直接影响了检验结果的准确性。
1 微量加样器的定期校准
加样器的吸入容量准确与否与实验结果的准确性密切相关,尤其对定量分析的影响更为显著。加样器长期使用后弹簧变形,弹力减小以及器件磨损等,均可导致加样器吸入液体量出现误差。新购的加样器失准率为1.56%,使用后可达到21.7%~47.6%,所以必须定期校准加样器。校准的常用方法有高铁氰化钾法、水称重法、水银称重法等,前两种方法准确性较差,后一种虽优于前两种,但操作麻烦,且水银易蒸发,对人体有害。实际工作中,常采用光电比色法进行校准。具体方法,取3只试管分别加入蒸馏水5.0ml,用校正过的血红蛋白吸管吸取0.3%曙红液20μl,混匀,作为标准管,在721分光光度计上,波长508nm,蒸馏水调零,平行三管测定,取吸光度均值。测定管则用待校正的加样器代替血红蛋白吸管,其他操作相同。
计算公式:
实际容量(μl)=测定管吸光度/标准管吸光度×20
相对误差(%)=(实际容量-刻度容量)/刻度容量×100%
相对误差<1%可用吸取关键性溶液;相对误差为1%~3%可用于吸取一般性溶液;相对误差>3%则应送检定所重新检定后方可使用。
2 加样器必须规范操作
许多检验人员未按加样器的使用要求操作,不能做到一样一头加样,而是一头连续加样。笔者选用一经过校准的10ul加样器就加样方式进行比较,将20支盛有1ml蒸馏水的试管,分别按一样一头加样(A组)和一头多样加样(B组)两种方式,分两组平行加入0.3%曙红液。混匀,在721分光光度计上,波长508nm,蒸馏水调零,测定各组,读取各管吸光度值。结果见表1。表1 两组吸光度值比较(略) 注:A组与B组进行t检验,P值均<0.001,差异有非常显著性
加样器吸头吸样后留有残液,湿润后的吸头不仅影响样本的吸入容量,而且将引起样本之间的交叉污染,二者均可导致检验结果出现误差。坚持一样一头的加样方法,才能切实提高检验质量。
作者单位: 445600 湖北咸丰,咸丰县人民医院检验科