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首页医源资料库在线期刊中华医学研究杂志2008年第8卷第1期

卫生细菌常规检验的思考

来源:《中华医学研究杂志》
摘要:【关键词】细菌在卫生细菌学检验工作中,通常以细菌菌落计数和大肠菌群的测定为基础实验。而在日常工作中我们经常可见菌落总数超标时,大肠菌群指标正常。反之,大肠菌群超标时,菌落总数结果则正常。此类检验结果常常引起一些争论,就这一问题,笔者对此谈一些个人看法,以供同行参考。...

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【关键词】  细菌


    在卫生细菌学检验工作中,通常以细菌菌落计数和大肠菌群的测定为基础实验。不论是何种相关产品样品,都离不开这两个项目。而在日常工作中我们经常可见菌落总数超标时,大肠菌群指标正常;反之,大肠菌群超标时,菌落总数结果则正常。此类检验结果常常引起一些争论,就这一问题,笔者对此谈一些个人看法,以供同行参考。

    首先我们通过这两个基本实验知道,细菌菌落计数不是某一组或某一特定种类的细菌,而是泛指在一定条件下能在普通营养琼脂中生长的能肉眼看到形成菌落的一群嗜中温、需氧的细菌总数,应用这一方法观察样品中细菌的性质以及细菌在样品中繁殖的动态,对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据。

    大肠菌群则是根据卫生学方面的要求和应用细菌学的观点所提出的一组与粪便污染有关的细菌。与医学细菌分类学所说的大肠菌(肠杆菌科)并不一致。大肠菌群的测定是指能在37℃下培养24h后发酵乳糖产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌。这类细菌虽然有共同的培养特性,但在其他生化反应及血清学方面也并非完全一致,由于试验的特定性决定了大肠菌群的测定并不是指单一细菌,而是作为卫生学指标来选择的一类细菌的总称,这类细菌包括大肠艾希菌;弗劳地枸橼酸杆菌、产气克雷伯菌、阴沟杆菌和产气肠杆菌。由于大肠艾希菌是人、畜肠道内的优势菌类,并较具备也接近了粪便污染指标菌的条件,作为粪便污染指标菌较为理想。因此在卫生细菌学试验中,选用以大肠艾希菌作为指标菌。大肠艾希菌的存在与人类关系密切,几乎无处不有,而大肠菌群数的高低、多少、又直接反映了样品污染程度和对人体健康的危害大小。食品中若检出大肠菌群,则表明食品已被人或动物的粪便污染,有可能存在肠道致病菌或寄生虫等病原体侵害的危险。大肠艾希菌作为指标菌受到重视的原因就在于此,所以大肠菌群用来评价食品及水的卫生质量,具有广泛的卫生学意义。

    每种细菌都有它独特的生理特性,培养时必须根据其特性,在指定的各种培养条件(温度、时间)下进行后才能区分开来。根据国定颁布的卫生标准一书中菌落总数的检验方法均是用普通营养琼脂37℃环境下需氧培养后所得的结果而确定的,因此在使用检验方法上就对一些厌氧菌、微嗜氧和嗜冷菌,以及一部分有特殊营养要求的细菌受到了限制,在37℃有氧条件下培养,也并非完全能测出每克或每毫升样品中的实际总活菌数[1],如果检验产品中含有油脂、酸等抑制细菌生长的成分,不稀释到一定浓度再进行检验,产品中的抑制成分仍在起作用,当稀释倍数至10-1~10-3或更高后,盐水可缓解产品中的某些抑制因子,并改变了细菌的生存环境,此时细菌开始生长繁殖,测定的结果可能更接近样品的原状。有报道说,在不同样品稀释时,高稀释度的检出结果比低稀释度高[2]。由于这些原因,所谓的菌落计数就有了局限性和试验中所造成的误差,另外由于各种样品培养时间都有规定[3~9],许多食品卫生指标都有各自的限量规定,地标、企标也不相同,尤其是细菌总数的测定值、限定规定可从500~5000cfu/ml(g)不等,有些企业标准会更高,同时培养时间对样品中细菌总数计数的结果有影响[10],也证实了不同培养时间对样品合格率的影响。这都是导致菌落总数结果不稳定和判断误差的原因。

    细菌总数在涉水产品检验和食品相关产品的检验中检出意义又大不相同,饮用水如受到污染后,细菌数量会明显增加,而且还能直接观察到数量的变化,而井水、泉水等地下水的细菌数变化就不明显,优质的地下水几乎不能检出大肠杆菌。由于细菌总数测定的范围,使细菌的检出机会远比大肠菌群多,并能直接计数,所以细菌数要比大肠菌更容易检出。

    在实际工作中大肠菌群的测定采用乳糖胆盐发酵管37℃下培养24h后进行的一系列分离,证实试验后,根据大肠菌群的阳性管数,查对MPN表可获知样品每100ml(g)所含大肠菌群的MPN值,这一结果基本可以将大肠菌群的量定位在一个相对准确的数值上,大肠菌群测定标准限定值也比细菌限定值小得多,鉴于两项实验各自不同的意义点,细菌计数和大肠菌群测定这两项实验也并未发现有明显的必然关系。笔者认为,不该将两者混为一谈,由于各自试验方法和卫生学意义不同,特指细菌的意义也不同,所以应区别分析,对于细菌菌落计数与大肠菌群之间的内在关系,有待具体实验后讨论。

【参考文献】
  1 何晓庆.卫生防疫细菌检验. 兼论医学细菌分类学基础.北京:新华出版社,1989,3.

2 李晓珍, 刘彩丽.  对细菌总数出现异常现象的原因分析.中国卫生检验杂志,2002,12(4):480.

3 一次性使用卫生用品卫生标准GB15929-1995.

4 生活标准检验法GB5750-85.

5 饮用天然矿泉水检验方法GB/T8535-1995.

6 公共场所微生物标准检验方法.  卫生部卫生标准委员会审定方法.

7 医院消毒卫生标准. GB15982-1995.

8 食品卫生国家标准汇编. 中国预防医学院标准处编.北京:中国标准出版社,1995,165.

9 姜黎. 改变培养时间对空气细菌总数计数结果的影响. 中国卫生检验杂志, 1997,7(2):91.

10 张文利.不同培养时间对样品细菌总数计数结果的影响. 中国卫生检验杂志, 2000,10(1):116.


作者单位:830011 新疆乌鲁木齐,新疆维吾尔自治区CDC

作者: 高涛, 远雪梅,于 烽, 阿衣夏木, 刘 艳 2008-7-4
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