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首页合作平台在线期刊中华现代临床医学杂志2004年第2卷第5B期

金标免疫斑点法在临床中的应用

来源:中华现代临床医学杂志
摘要:实验医学的最终目的,是为临床医学提供准确、可靠的医学数据。随着医学技术的高速发展和实验手段项目的不断更新,具有灵敏度高、特异性强、时间短、操作方便易行的新方法,逐步替代和淘汰了繁锁的手工操作,从而使临床检验技术的质量和水平迈了一大步,同时也加速和促进了临床医学的发展。2试剂福建三明市蓝波生物技术......

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实验医学的最终目的,是为临床医学提供准确、可靠的医学数据。随着医学技术的高速发展和实验手段项目的不断更新,具有灵敏度高、特异性强、时间短、操作方便易行的新方法,逐步替代和淘汰了繁锁的手工操作,从而使临床检验技术的质量和水平迈了一大步,同时也加速和促进了临床医学的发展。

1 材料与方法

1.1 标本来源 采集50名可疑发热患者静脉血液3ml,分离血清样本待查。

1.2 试剂 福建三明市蓝波生物技术研究所生产的金标免疫斑点法试剂盒、抗伤寒杆菌抗体IgG、IgM检测(供体外使用)。

1.3 方法 金标免疫斑点法。

2 结果

2.1 抗伤寒杆菌抗体IgG、IgM检测 3例为阳性,47例为阴性。

2.2 经血培养实验验证 2例阳性结果均培养出伤寒沙门氏菌D群,1例血培养为阴性结果。其余47例均为发热病人筛查实验。此3例抗体阳性结果为临床症状高度怀疑伤寒沙门氏菌感染。

3 讨论

伤寒和副伤寒分别由沙门氏菌属中伤寒沙门菌,甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌引起。主要传染源是带菌者和病人,病菌随粪便和尿排出,经口感染。50%病人胸、腹部皮肤出现玫瑰疹,这是由于细菌堵塞皮肤毛细血管,引起毛细血管扩张所致。疹内可查到致病菌,这时血液培养阳性率可达80%以上,发病2~3周为急性期,此时病菌可随脱落的肠壁坏死物及溃疡组织和粪便排出体外,故此时粪便培养亦可呈阳性。细菌可侵入胆囊、胆汁中,类脂及色氨酸又作为伤寒沙门菌及副伤寒沙门菌的营养成分,而刺激细菌的繁殖,并降低抗体的作用,因而有利于细菌在胆囊中繁殖,并随胆汁间歇的进入肠腔中,所以病愈后部分胆囊中仍有细菌存在,并从粪便中排菌。据报道,伤寒病后4周的带菌者约50%,带菌10周约10%,1年以上带菌者约3%。金标免疫技术 [1] 是以胶体金作为标记物的免疫测定方法。目前胶体金标记物常与膜载体相配合,形成特定的测定模式,具有典型代表如斑点免疫金渗滤试验及斑点免疫金层析试验等。本实验我们所采取的是斑点免疫金渗滤试验。这个实验是以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可过滤性使抗原抗体发生反应并洗涤在一特殊的渗滤装置上,以液体渗滤过膜的方式迅速完成。滴金法的质量控制常采用在硝酸纤维素膜上点加质控点的方法,质控小圆点多位于反应斑点的正下方。双抗体夹心法的质控点最好是相应抗原,若该抗原不易制备或价格昂贵时,也可用SPA或针对金标抗体的抗体充当。间接法的质控点采用盐析法粗提的IgG最为经济、方便。多年来,伤寒杆菌感染已基本消灭,但是,近期我院发现有3例阳性的报告。机体患伤寒、副伤寒后,一般在发病1~2周内血液中出现特异性抗体并逐渐至第四周达高峰,以后逐渐下降。应用金标免疫斑点试剂盒和过去肥达氏(凝集法)相比,缩短了时间,减少了繁琐的操作程序,提高了阳性检出率。该方法的敏感性、特异性优于肥达氏反应,有利于伤寒疾病的早期诊断和对治疗中的疗效观察。故我们认为是一种比较理想的检测方法。

参考文献

1 叶应妩,王毓三.中华医学检验全书.第二版.南京:东南大学出版社,1997,379-382.

作者单位:727000陕西省铜川市人民医院检验科

(收稿日期:2004-03-01)

(编辑李 阳)

作者: 张立岗党民芳&n 2005-9-22