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【摘要】 目的 观察补肾法对犬心肌缺血模型血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合成酶（NOS）的影响。方法 20只心肌缺血模型犬随机分为对照组、单硝酸异山梨醇组及补肾法组。治疗组用补肾中药，对照组用单硝酸异山梨酯，服药前后观察血一氧化氮、一氧化氮合成酶情况。结果 补肾中药治疗后，犬心肌缺血模型血清NO、NOS明显升高。与单硝酸三梨酯组差异有显著性（P<0.05，P<0.01）。结论 补肾法能够明显提高血清NO、NOS，这可能是其治疗心肌缺血机理之一。
关键词 补肾法 犬心肌缺血模型 一氧化氮 一氧化氮合成酶
The effect of the therapy of tonifying kidney on plasma NO and NOS in the myocardial ischemia dog
Yang Huanbin，Lin Jian，Wang Caixia
Shenzhen Municipal Hospital of Traditronal Chinese Medicine，Guangdong518003.
【Abstract】 Objective To observe the effect of the therapy of tonifying kidney on plasma NO and NOS in the dog of myocarclial ischemia.Methods 20dogs of myocarclial ischemia were divided into the control group，isosorbidi mononitratis group and the therapy of tonifying kidney group by random.The NO and NOS of serum were measured，before and after treatment.Results In the therapy of tonifying kidney group，the levels of NO，NOS weresignificantly higher than the isosorbide mononitrate group.（P<0.05，P<0.01）.Conclusion The therapy of tonifying kidney can increase plasma NO and NOS.That might be one of anti-ischemia mechanism of the therapy of tonifying kidney.
Key words the therapy of tonifying the kidney the myocardial ischemia dog model NO NOS
临床运用补肾法治疗冠心病心绞痛有良好疗效，为探讨其机理，我们在实验观察了补肾法对犬心肌缺血模型血清和心肌组织一氧化氮、一氧化氮合成酶的影响，报告如下。
1 资料与方法
1.1 动物 杂种家犬，20只，普通级，南京中医药大学实验动物中心提供。
1.2 药品和试剂
1.2.1 戊巴比妥钠 上海化学试剂公司进口分装，批号:F20020915。
1.2.2 肝素纳 徐州万邦生化制药有限公司生产，批号:0112101。
1.2.3 一氧化氮/一氧化氮合成酶 南京建成生物工程公司提供，批号:20031204、20031206。
1.2.4 单硝酸异山梨酯 南京白敬宇制药厂生产，批号:20021204。
1.2.5 补肾法组方 深圳市中医院心内科提供。
1.3 仪器
1.3.1 多导生理记录仪 RM-6000型，日本光电公司生产。
1.3.2 数据采集及分析系统 MedLab V6.0，南京美易公司提供。
1.3.3 电磁血流量计 MFV-3200型，日本光电公司生产。
1.3.4 分光光度计 UV-2401PC型，日本岛津公司生产。
1.3.5 酶标仪 Coulter Immage7型，美国Backman公司生产。
1.4 模型制备 家犬用3%戊巴比妥钠静脉麻醉，气管插管接人工呼吸机，股动脉插管测定血压。上腹部正中切口分离十二指肠供给药用。左侧第4肋间开胸术，切除第4肋并撑开切口，切开心包做心包摇篮。分离主动脉弓和冠状动脉左旋支，套上合适口径的电磁血流量计探头，测定主动脉血流量（心输出量）和冠状动脉血流量。心尖插管测定左心室内压。血压、血流量和左心室内压由多导生理记录仪检测，同时检测导联心电图 ［1，2］ ，于给药前和给药后1h、2h、3h、4h各检测1次。检测信号输入数据采集及分析系统，用MedLab V6.0版分析软件分析心血管血液动力学各参数。在冠状动脉前降支和左旋支配支左心室前壁供血的分支下穿线备用，实验时空白对照组只穿线不结扎，其余各组结扎，造成左心室前壁缺血模型，连续观察4h。在结扎前，结扎后2h、4h采血分离血清备用，分离血浆备用。
1.5 实验分组和药物剂量
1.5.1 空白对照组 冠状动脉左心室前壁供血分支只穿线不结扎，十二指肠注入温水20ml。
1.5.2 模型组 结扎冠状动脉左心室前壁供血分支，十二指肠注入温水20ml。
1.5.3 阳性对照（单硝酸异山梨酯）组 结扎冠状动脉左心室前壁供血分支，单硝酸异山梨酯0.7mg/kg（按体表面积折算，等效于成人一次口服量的3倍）溶于温水20ml，十二指肠注入给药。
1.5.4 补肾法组 结扎冠状动脉左心室前壁供血分支，补肾中药0.8g/kg（按体表面积折算，等效于成人一次口服量的3倍），溶于温水20ml，十二指肠注入给药。
1.6 观察参数及指标 一氧化氮（NO）、一氧化氮合成酶（NOS）。
1.7 统计学方法 所有数据用均数±标准差（ˉx±s）表示;用组间t检验进行统计学处理，比较差异无显著性。
2 结果
2.1 补肾法对犬心肌缺血模型一氧化氮、一氧化氮合成酶的影响 结果数据参见表1，表2。 血清NO的含量变化，除对照组外，成模后2h各组均明显减少;在4h时，补肾法组NO的含量均有显著上升（与模型组比较（P<0.01）;心肌组织中NO的含量除单硝酸异山梨酯外，均显著高于模型组（P<0.01）。
表中数据显示，随成模时间，模型组血清NOS含量逐渐下降，对照组也有下降的趋势但不明显。给药后2h，对照组、单硝酸异山梨酯组、补肾法组比较差异有显著性（P<0.05，P<0.01）。
表1 补肾法各组方对犬心肌缺血模型一氧化氮的影响 （略）
注:与模型组比较， ˇˇ P<0.01
表2 补肾法各组方对犬心肌缺血模型一氧化氮合成酶的影响 （略）
注:与模型组比较， ˇˇ P<0.01; ˇ P<0.05
3 讨论
一氧化氮是心血管系统的重要调节因子，可扩张血管，抑制血小板的粘附、聚集和白细胞的趋化激活，抑制血管平滑肌细胞的增殖移行，对心血管起重要的保护作用。本实验显示补肾法能显著增加心肌缺血犬血清一氧化氮含量，在给药后4h时，补肾法组一氧化氮含量均有显著上升;补肾法有显著增高心肌组织中一氧化氮的含量的作用，在给药后一氧化氮的含量上升进而扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，改善微循环，增加心肌耐缺氧能力，减少血小板凝聚，保护血管内壁细胞，从而防止心肌细胞缺血 ［3］ 。
一氧化氮合成酶活性降低是冠状动脉平滑肌细胞痉挛，动脉粥样硬化的重要原因，NOS的正常结构和功能是维护冠状动脉正常舒缩状态，防止冠状动脉痉挛的重要条件 ［4］ 。本实验显示补肾中药能显著增加犬心肌缺血模型一氧化氮合成酶的含量，经统计学处理后补肾法组方有显著性意义，提示补肾中药的扩张冠状动脉，增加血流，可能是 通过升高NOS来实现的。
补肾中药扩张冠脉和改善循环，增加冠脉血流的作用，临床可用于冠心病心绞痛。本实验显示用补肾中药治疗后，血中NO和NOS均有显著升高，其提示补肾法可能通过升高NO和NOS来扩张冠状动脉，增加冠脉血流，从而治疗心肌缺血。
参考文献
1 H.G.沃格尔，等著;杜冠华，等译.药理学实验指南-新药发现和药理学评.北京:科学出版社，2001，58.
2 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社，1993，422，522，525.
3 郭志刚.冠心病、高血压病人血浆自由基、一氧化氮及纤溶活性的变化.第一军医大学学报，1999，19（2）:124-126.
4 李中言.一氧化氮与心血管疾病.中华心血管病杂志，1996，24（1）:73-75.
（收稿日期:2004-05-10）
（编辑李 木）
作者单位:518033广东省深圳市中医院