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首页合作平台在线期刊中华现代临床医学杂志2005年第3卷第1期

紫外分光光度法测定甲硝唑血药浓度

来源:中华现代临床医学杂志
摘要:【文献标识码】B【文章编号】1726-7587(2005)01-0065-02甲硝唑(灭滴灵),为治疗滴虫病及阿米巴病的特效药,现已广泛应用于治疗厌氧菌感染。对该药血浓度的测定,国外报道多采用高效液相法,国内尚未见报。笔者试用紫外分光光度法测定该药的血浓度,方法简便、准确、实用。其原理是血清中的甲硝唑经氯仿提取,再从......

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    【文献标识码】 B    【文章编号】 1726-7587(2005)01-0065-02

    甲硝唑(灭滴灵),为治疗滴虫病及阿米巴病的特效药,现已广泛应用于治疗厌氧菌感染。对该药血浓度的测定,国外报道多采用高效液相法,国内尚未见报。笔者试用紫外分光光度法测定该药的血浓度,方法简便、准确、实用。其原理是血清中的甲硝唑经氯仿提取,再从氯仿中转溶于0.1mol/L HCl中,在(277±1)nm处测定吸收值,换算成甲硝唑在每ml血清中的含量(μg)。
     1 实验材料

    甲硝唑:天津产品,无水乙醇重结晶2次,温度160℃~162℃,E 1%cm 380。氯仿:分析纯;盐酸:分析纯。仪器:751分光光度计(上海分析仪器厂)。80—1型离心机(我院检验科);具塞试管10ml。

    2 提取溶剂的选择

   吸取甲硝唑标准液1ml(30μg)数份,分别置塞试管中,各加5ml不同溶剂(二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳),振摇1min,3000r/min离心5min,分别吸取有机溶剂层4.5ml于另试管中,分别加0.1mol/L HCl2.5ml,振摇1min,3000r/min离心5min,吸取盐酸层,在277nm处测定吸收值,结果见表1。

    表1 不同溶剂对甲硝唑的提取效果(略)

    3 酸碱对提取效果的影响

     取甲硝唑标淮溶液1ml(20μg)数份,分别加入0.5ml不同浓度的酸和碱,余操作同上,结果见表2。

    表2 甲硝唑在不同浓度酸碱条件下的提取效果(略)
       
    实验表明,甲硝唑在中性和碱性条件下,氯仿提取效果相同,而在酸性条件下,几乎不被氯仿提取。故笔者本法采用中性条件。

     4 人血清中加入甲硝唑的标准曲线测制

     取人混合血清1ml数份,分别加入不同量的甲硝唑,各份加入氯仿5ml,振摇1min,3000r/min离心5min,吸取氯仿4.5ml,加入0.1mol/L HCl2.5ml,振摇1min,3000r/min离心5min,吸取盐酸层,在277nm处测吸收值,0.1mol/L HCl作空白对照,测得甲硝唑的标准曲线回归方程为Y=0.006874X+0.01578,r=0.9999(n=7),标准曲线略,甲硝唑含量在2~80μg范围呈线性关系。

    5 回收率实验

    取血清1ml加入一定量(3μg、8μg、16μg、24μg)甲硝唑。分别同上操作,测得各吸收值(A),代入上述回归方程,计算测得的甲硝唑(μg),与加入量相比,即得回收百分率。结果见表3。

     表3 血清中加入甲硝唑的回收率(表略)
    
     6 患者血清中甲硝唑的测定

     精密吸取服甲硝唑阿米巴肝脓肿患者的血清1ml,操作方法同4,将测得的吸收值代入回归方程,计算得甲硝唑的含量,即得每毫升血清中药物含量,测得结果见表4。

     表4 血清中甲硝唑测定结果(表略)
    
     7 讨论

     本法采用氯仿提取血清中甲硝唑,再转溶于0.1mol/L HCl中,以除去水溶及脂溶性杂质,排除干扰,提高专一性;在2~80μg/L间呈线性。方法简便,试剂易得。凡有751紫外分光光度计者均可测定。

     本法虽然在测定5μg/ml浓度以下时,准确性较差,但口服甲硝唑常在1.2g以上,晨间血清浓度在10μg/ml上下,而峰浓度高达20μg/ml以上。故本法仍不失为一种简便准 确的实用方法。

     实验表明,按0.4gTid口服数天,达稳态浓度后,晨间服药前血浓度可达10μg/ml以上。而峰浓度可达26~27μg/ml以上,实测结果与有关报道较接近。

     作者单位:226200江苏省启东市人民医院药剂科 

作者: 薛建辉 吴玉林 2005-9-22
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