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关键词 林蛙卵油 四氯化碳 肝损伤
The experiment about the effect of different doses
of wood frog egg oil on liver injury caused by CCl 4
Du Jingxin，Wang Li，Wu Xingye，et al.
Forest Frog Institute，Tonghua Municipal Central Hospital，Jinlin134001.
【Abstract】 Objective To study the effect of different doses of wood frogegg oil on liver injury caused by CCl 4 .Methods In order to observe the effectof wood frog egg oil on weight，ALT，AST and TG in serum of animal，with wood frog egg oil soft capsule made up of extraction of wood frog egg in China and acute liver injury model caused by CCl 4 .The experiment on animal was done.ResultsWith the group of large dose wood frog egg oil soft capsule，the quantities of ALT，AST and TG are significantly lower than control group（results are P<0.05，P<0.01and P<0.01respectively），and with the group of middle dose wood frog egg oil soft capsule，the quantities of ALT and AST are significantly lower than positive group as control（results are P<0.01and P<0.05respectively）.Lesion degree of liver cells in large and middle dose groups is significantly lower than positive group as control（results are P<0.01and P<0.05respectively）.Conclusion Wood frog egg oil soft capsule has a protective effect on liver injury caused by carbon tetrachloride.
Key words wood frog egg oil CCl 4 liver injury
林蛙卵油软胶囊是以中国林蛙（Rana temporaria chensiˉnensis Davia）卵提取物为原料制得。过去民间常取林蛙输卵管而弃去卵巢即得林蛙卵。近几年有关专家正在研究证实其抑制血小板聚集和降脂作用 ［1］ 及抗脂质过氧化作用 ［2］ ，但其对保护化学性肝损伤的作用未见报道。本文对林蛙卵提取物林蛙卵油保护化学性肝损伤进行探讨。
1 材料与方法
1.1 药品 林蛙卵油软胶囊由通化市林蛙研究所提供，黄棕色;多烯磷脂酰胆碱胶囊（易善复胶囊，批号:27361，228mg/片，由通化市中心医院提供）。
1.2 肝损伤模型建立 健康Wistar大鼠100只（由中国医科大学动物部提供，批准号:辽实动物第010号，体重180.6～212.5g，雄性）。试验大鼠首次以1%四氯化碳（CCl 4 ）皮下注射，剂量5ml/kg，以后用4%CCl 4 油剂3ml/kg，2次/周，连续6周，第7周起改为1次/周，第9周末随机抽12只大鼠心血作相关生化检测，其余全部大鼠肝活体组织行病理学检查，以所取肝组织切片形成纤维化作为转入治疗性实验标志。全部大鼠实验前抽血作血清ALT、AST及TG的检测。
1.3 试剂和仪器 CCl 4 分析纯、4%CCl 4 油剂，谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、甘油三酯（TG），MICRQ生化分析仪。
1.4 分组 随机分实验1、实验2、实验3、溶媒对照、空白对照、阳性对照6个组。实验组:将CCl 4 造成急性化学性肝损伤的受试动物，给予不同剂量的林蛙卵油;溶媒对照组:将造成急性化学性肝损伤的受试动物，给予豆油;空白对照组:将造成急性化学性肝损伤的受试动物，给予蒸馏水;阳性对照组:将造成急性化学性肝损伤的受试动物，给予保肝药易善复胶囊。
1.4.1 实验方法 （1）实验组:根据人体推荐量的30、10、1倍设3个剂量组，不同剂量的林蛙卵油软胶囊分别为3.0g/kg、1.0g/kg、0.1g/kg，用豆油稀释至所需浓度，给予灌胃，每日2次，连续灌胃140d;溶媒对照组:灌胃给予豆油，剂量0.0001mg/kg，每日2次，连续灌胃140d;空白组:灌胃给予蒸馏水，剂量0.0001g/kg，每日3次，连续灌胃140d;阳性对照组:灌胃给予易善复胶囊，剂量0.009g/kg，每日3次，连续灌胃140d。观察各组间体重的变化。（2）第141天（处死动物前12h各组动物禁食）取血分离血清，测定ALT、AST、TG的含量，与实验前检测的量作比较，并取肝脏做病理切片，观察肝脏的病理损伤情况，病理组织学观察以肝细胞“变性、坏死”等作为观察指标，并根据每种病变程度进行量化，按“-（0分）、+（1分）、++（2分）、+++（3分）、++++（4分）”量化。
1.4.2 统计学方法 实验数据采用SPSS软件方差分析法进行统计。
2 结果
2.1 林蛙卵油软胶囊对动物体重的影响 由表1可见，各实验剂量组、空白对照组、溶媒对照组与阳性对照组比较，动物体重、增重差异无显著性（P>0.05）。
2.2 林蛙卵油软胶囊对动物血清ALT、AST、TG的影响 由表2可见，林蛙卵油软胶囊高剂量实验组的ALT、AST、TG均低于阳性对照组，差异有显著性（分别为P<0.05、P< 0.01、P<0.01）;中剂量组的ALT、AST均低于阳性对照组，差异有显著性（分别为P<0.01、P<0.05）。
表1 林蛙卵油软胶囊对动物体重的影响
表2 林蛙卵油软胶囊对动物血清ALT、AST、TG的影响
注: ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
2.3 林蛙卵油软胶囊对肝脏病变的影响 由表3、4可见，林蛙卵油软胶囊各剂量组及阳性对照组与空白、溶媒对照组比较，动物的肝体比值未见明显差异;空白，溶媒对照组（以肝气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、肝细胞坏死四种病变 总积分为标准）肝细胞病变程度较阳性对照组重。林蛙卵油软胶囊高剂量组、中剂量组病变程度较阳性对照组轻，差异有显著性（分别为P<0.01、P<0.05）。
表3 各组大鼠肝脏病变的比较
表4 各组大鼠肝体比值及肝脏病理组织学检查结果
3 讨论
本研究发现林蛙卵油软胶囊对由CCl 4 造成的急性化学性肝损伤模型的各项指标均有显著性改善。林蛙卵油中含有维生素E及多种人体必需不饱和脂肪酸及微量元素等成分，这些成分均具有抑制肝损伤的作用 ［3～6］ ;林蛙卵油中还含有大量的雌二醇。近些年来研究发现雌激素对肝纤维化和活性肝星状细胞的增殖、转化胶原的合成均有抑制作用 ［7］。因此表明，林蛙卵油不仅对中老年心血管疾病具有良好的预防作用，对肝损伤也具有很好的保健价值。
参考文献
1 李成义，曲绍春，陈光荣，等.中国林蛙卵油中的激素成分及卵油对血小板聚集和血脂的影响.中草药，1997，24（11）:584-598.
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7 田耕，于皆平.雌激素的抗纤维化作用.国外医学·内科学分册，2000，27（9）:390-392.
基金项目:吉林省三费资金资助（吉科条字［2002］07号）
作者单位:134001吉林省通化市中心医院林蛙研究所
134001吉林省通化市科学技术协会