点击显示 收起
黄芪（Radix Astragali）是临床常用的中药之一，具有补气升阳、利水消肿等功效。近年来的研究表明，黄芪具有抗氧化的作用 ［1］ 。近年来，随着老年疾病与动脉粥样硬化（AS）相关研究的深入，抗氧化作用被认为是防治AS ［2］ 与抗衰老的有效途径。本文对黄芪的重要成分黄芪多糖的抗氧化作用进行研究。
1 实验材料
1.1 药品 70%黄芪多糖溶液及冻干粉（70%黄芪多糖溶液购自广东省中医院，自行冻干）;香菇多糖片（江苏省江阴制药厂）;D-半乳糖（上海试剂二厂）;胆固醇粉（化学纯，荷兰进口由上海试剂站分装）;猪油（自制）;油红O染料（sigma公司），血脂检测试剂盒（北京科华公司），高密度脂蛋白检测试剂盒（北京中生生物高技术公司），载脂蛋白检测试剂盒（北京九强生物公司）;MDA及SOD检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）;过氧铬酸钾（自行合成）;可见光分光光度仪（HP公司）。HPIAS—1000彩色病理图像分析系统（日本日立公司）
1.2 实验动物 小鼠，昆明种（广州省医学实验动物中心提供）;雄性健康新西兰大白兔（广州省医学实验动物中心提供）。
2 实验方法与结果
2.1 抗衰老实验 取小鼠50只，体重18～20g，雌雄各半，随机均匀分为5组。其中4组每鼠颈背部皮下注射D-半乳糖（1.25g/kg）造衰老模型，每日注射1次，连续40天;另一组颈背部皮下注射生理盐水作为空白对照组。每3天称重1次，根据体重调整用药量。从第11天开始，造模4组分别灌服大、小剂量的黄芪多糖水溶液、香菇多糖片混悬液和同体积生理盐水，连续灌药30天，于最后1次给D-半乳糖。灌药后lh，小鼠眼眶取血，血液肝素抗凝备用，再取小鼠肝、脑，制各肝匀浆和脑匀浆备用。
2.1.1 对衰老模型小鼠血超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响 取小鼠血50μl，加入盛有5ml生理盐水刻度离心管中离心，弃去上清液。加预冷双蒸馏水0.2m1，溶血后加预冷95%乙醇0.1ml，振摇，再加预冷氯仿0.1ml，混合器上抽提2ml离心得抽提液，按试剂盒说明书测血SOD活力。结果见表l。
2.1.2 对衰老模型小鼠血过氧化氦酶（CAT）活力的影响 取30%过氧化氢0.52ml，加水至50ml，取出4ml，加入pH7.0的0.05mol/L磷酸缓冲液26ml，在230nm处测lcm光路的OD值为0.53。可作为过氧化氢酶的底物溶液，按文献 ［3，4］ 法测定和计算血CAT活力，结果见表l。
2.1.3 对衰老模型小鼠血谷光甘肽（GSH—PX）活力的影响 按文献 ［3，4］ 法测定血中GSH-PX活力，结果见表1。
2.1.4 对衰老模型小鼠血浆过氧化脂质（LPO）含量的影响 按文献 ［3，4］ 法测血浆过氧化脂质水平，结果见表2。
2.1.5 对衰老模型小鼠肝匀浆和脑匀浆中过氧化脂质（LPO）含量的影响 取少许肝脏，清洗后滤纸吸干水分。用匀浆器制5%的肝匀浆。精取肝匀浆1.5m1，按文献 ［3，4］ 方法测肝匀浆LPO水平，脑匀浆中LPO的测定同肝匀浆。结果见表2。
表1 黄芪多糖对衰老模型小鼠血SOD、CAT、GSH—PX活力的影响 （略）
注:与模型组相比， ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
表2 黄芪多糖对衰老模型小鼠血浆、脑匀浆、肝匀浆中LPO的影响 （略）
注:与模型组相比， ˇˇ P<0.01
2.2 抗AS作用 雄性健康新西兰大白兔18只，5～6月龄、体重2.0～3.1kg。随机分为三组，单笼喂养，自由饮水。其分组如下:（1）正常对照组6只（A组），喂养基础颗粒饲料100～120g/d。分别于喂饲12周时测体重并处死。（2）模型组6只（B组），喂养造模饲料（基础颗粒饲料+3%猪油+1%胆固醇）120～150g/d。分别于喂饲12周时测体重并处死。（3）黄芪多糖预防组6只（C组），造模饲料+黄芪多糖5ml·kg -1 ·d -1 ，每日待兔饮完黄芪多糖后再自由饮水，分别于喂饲12周时测体重并处死。
2.2.1 血脂、脂蛋白及载脂蛋白含量测定 血清总胆固醇（TC）与甘油三酯（TG）测定采用酶动力学法;高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）测定采用免疫比浊法;低密度脂蛋白胆固 醇（LDL-C）测定按Fried wald公式计算:LDL-C=（TC—HDL-C—TG/2.2）;载脂蛋白A（ApoA）与血清ApoB测定采用免疫比浊法。结果见表3。
2.2.2 血浆MDA活性测定 采用微量快速测定法，按MDA检测试剂盒说明书的操作步骤进行。结果见表4。
2.2.3 血浆SOD活性测定 按SOD检测试剂盒说明书的操作步骤进行，结果见表4。
2.2.4 血浆TRAC检测 采用化学发光法测定 ［5］ :用SHG—1生物化学发光测量仪（中山医科大学）测定光子发射的活力。结果见表4。
2.3 统计学方法 应用SPSS医用统计软件包进行数据统计学处理。
表3 黄芪多糖对食饵性AS兔血脂代谢指标的影响 （略）
注:与模型组相比， ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
表4 黄芪多糖对食饵性AS兔血浆指标的影响（略）
注:与模型组相比， ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
3 讨论
3.1 抗衰老 实验结果提示，黄芪多糖可显著提高D-半 乳糖致衰老模型小鼠血SOD、CAT、GSH—PX活力，降低血浆及肝匀浆、脑匀浆LPO水平。已有研究表明其多糖成分有较好的免疫兴奋及滋阴作用。黄芪是中医常用补益抗衰老之品，其多糖类成分含量较高，又有较好的抗氧化作用，提示其多糖类成分可能是黄芪补益抗衰的主要活性成分之一。其机理是提高血中抗氧化相关酶的活性，降低相关组织的过氧化脂质水平。
3.2 抗AS 实验结果提示，黄芪多糖可显著降低TG、TC、LDL-C、ApoA、ApoB、MDA和TRAC水平，升高HDL-C和SOD水平。研究表明，黄芪多糖对于抗AS具有显著作用。其机理可能是黄芪多糖能够抗血中的LDL氧化，升高HDL从而导致CD形成的潜伏时间延长及硫代巴比妥酸反应物（TBARS）的形成减少。
3.3 黄芪多糖具有显著的抗氧化作用，从而起到抗衰老及抗AS作用。黄芪多糖对于老年性疾病及心血管疾病的治疗具有广阔的前景。
参考文献
1 徐旭.黄芪的心血管药理作用研究进展.中国新药杂志，2003，12 （11）:899-901.
2 Ross R.Atherosclerosis-an inflammatory disease.N Eng J Med1999，340:115-126.
3 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社，1994，9372.
4 陈勤.抗衰老实验方法学.北京:中国医药科技出版社，1997，38.
5 Riesel R，Weser U.Reactivity of active centre analogues of Cu2Zn2Suˉperoxide dismutase during the agueous decay of K2CrO8.Inorg Chim Acta，1988，160:119-121.
作者单位:510060广州中山大学中山眼科中心
510405广州中医药大学