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【摘要】 目的 观察参芍胶囊能否影响高脂血症大鼠心肌组织中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的水平。方法 将50只大鼠随机分成对照组、模型组、治疗组（低、中、高剂量），模型组给予高脂饮食，对照组给予普通饮食，治疗组给予高脂饮食的同时给予参芍胶囊治疗（低、中、高三个治疗剂量）；42天后分别测定各组大鼠心肌组织中NO、 NOS、 SOD、MDA的含量、治疗组与模型组比较，观察各项指标有无统计学意义。结果 （1）与对照组相比：动脉粥样硬化组大鼠心肌组织中NO、 NOS水平降低，同时SOD水平降低，而MDA水平升高，差异有显著性（P<0.05）。（2）治疗组与模型组相比较：给予参芍胶囊治疗后心肌组织中NO、NOS及SOD水平均升高，而MDA水平降低，其中中剂量组与模型组相比差异有显著性（P<0.05），低剂量和高剂量组与模型组相比无统计学意义。结论 参芍胶囊可以通过影响大鼠心肌组织中NO、NOS、SOD及MDA水平，从而改善血管内皮细胞功能，治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病。
【关键词】 参芍胶囊；心肌；一氧化氮（NO）；一氧化氮合酶（NOS）；超氧化物歧化酶（SOD）；丙二醛（MDA）
Effects of shenshao capsules on the function of myocardium in rats with atherosclerosis
LI Ya-qin,LIU Wen-min,HAN Xuan.Health College of Hebei University.Hebei 071000，China
【Abstract】 Objective To investigate the effects of shenshao capsules on the levels of nitric oxide（ NO）, nitric oxide synthase （NOS）, superoxide dismutase （SOD） and malondialdehyde （MDA）in myocardium of rat with atherosclerosis.Methods 50 SD rats were randomly divided into model group,control group ,low dose, middle dose and hige dose treatment groups. Model group rats were given high-fat diet，the control group were given normal diet ,and the treatment groups were given low -, middle- and hige- dose shenshao capsules, respectively. 42 days later , the levels of NO、NOS、SOD and MDA in rats myocardium were detected and analyzed.Results （1） Compared with the control group, the levels of NO,NOS and SOD in myocardium of rats with atherosclerosis decreased clearly （P<0.05）, while the level of MDA increased clearly（P<0.05）.（2） Compared with the model group ,shenshao capsules treatment could improve the levels of NO,NOS and SOD and decrease the MDA level in rats myocardium. There was significant difference between the middle-dose treatment group and model group（P<0.05）.Conclusion Shenshao casulps can decrease the level of MDA and increase the levels of NO,NOS and SOD in rats myocardium, and improve the function of the vascular endothelial cells,which may be a bases of the benificial effect of shenshao capsules in the treatment of atherosclerosis.
【Key words】 Shenshao capsule; myocardium ;NO;NOS; SOD;MDA
现代医学已经证实血管内皮细胞功能障碍是冠状动脉粥样硬化的一个主要原因，而超氧化物歧化酶（SOD）可以通过延缓细胞衰老,清除氧自由基,阻止自由基连锁反应以及抑制炎性反应而维持内皮细胞功能［1］，丙二醛（MDA）是组织细胞损伤的产物，冠状动脉粥样硬化性心脏病由于长时间的血管病变导致心肌缺血，长时间的心肌缺血导致心肌功能障碍，心肌组织产生的一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）减少，进一步加重了心肌损害，促进心肌功能减低。本试验通过给予动脉粥样硬化大鼠参芍胶囊治疗后检测心肌组织中NO、NOS、SOD 及MDA水平的变化，从而验证参芍胶囊是否通过影响心肌组织中NO、NOS、SOD 及MDA而改善血管动脉粥样硬化。
1 材料与方法
1.1 实验动物 Wistar 大鼠50只，雌雄各半，体重（250±10）g，由河北医科大学实验动物中心提供，合格证编号805108。
1.2 实验药品 胆固醇（分析纯）购于上海新兴化学试剂公司，胆酸钠购于德国Serva公司，丙基硫氧嘧啶为上海复兴制药厂有限公司原料药（质量标准符合C.P>2000版药典），维生素D注射液购于上海第九制药厂。参芍胶囊购于河北长天药业有限公司，合格证号：Z10960062。NO、 NOS、SOD 及MDA试剂盒均购自南京建成生物制品有限公司。
1.3 实验仪器 （1）双功能水浴恒温振荡器，型号：SHA-BA，产地：金坛市杰瑞尔电器有限公司。（2）漩涡混匀器，型号：IKA-MSZ，产地： IKA Works Guangzhou。（3）低速台式离心机，型号：TDL-5-A，产地：上海安亭科学仪器厂。（4）501-A型超级恒温器， 产地：上海实验仪器厂有限公司。（5）Stat-Fax-2100酶标仪，产地：Awareness technologying。（6）高速冷冻离心机，型号：GL-16G-Ⅱ型，产地：上海安亭科学仪器厂。
1.4 动物模型的制备 正常饲料喂养1周后，随机分成对照组及模型组和治疗组，对照组给予普通饲料，模型组给予高脂饲料，即3%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖、10%猪油、81.3%基础饲料，同时在喂食开始时一次性腹腔注射维生素D 60万IU/kg；对照组给予同等体积的生理盐水［1］。治疗组在给予高脂饲料的同时给予参芍胶囊灌胃，其中高、中、低剂量组分别按125mg/kg、250m g/kg、500mg/kg的剂量。6周后处死大鼠，分别取其心肌组织，将心肌组织匀浆后进行检测。
1.5 实验方法 将实验动物随机分成5组，对照组、模型组与治疗组（低、中、高三个剂量治疗组），各组动物均为雌雄各半。首先自由饮食1周，然后对照组给予普通饮食，模型组给予高脂饮食，治疗组除给予高脂饮食外，治疗组在给予高脂饲料的同时给予参芍胶囊灌胃，其中高、中、低剂量组分别按125mg/（kg·d）、250mg/（kg·d）、500mg/（kg·d）的剂量。6周后处死大鼠，分别取其心肌组织，将心肌组织匀浆后进行NO、NOS、SOD及MDA水平的检测。
1．6 检测指标及方法 分别检测对照组、模型组与治疗组中心肌组织中NO、NOS、SOD及MDA的水平，试剂盒均购自南京建成生物制品有限公司，具体操作步骤见试剂盒说明书。
1.7 统计学方法 数据以均数±标准差（x±s）表示，采用F检验、q检验、t检验，检验水准α=0.05。
２ 结果
见表1、表2。表1 各组心肌组织中NO、TNOS水平的比较 注：（1）NO水平的统计学分析表明：模型组 vs对照组，★P＜0.05，模型组vs低剂量组，P>0.05, 模型组vs中剂量，★P＜0.05，模型组vs高剂量，P>0.05。（2）TNOS水平的统计学分析表明：模型组 vs对照组，★P＜0.05，模型组vs低剂量组，P>0.05, 模型组vs中剂量，★P＜0.05，模型组vs高剂量，P>0.05 表2 实验组与对照组中大鼠心肌组织中SOD 、 MDA水平的比较
3 讨论
本试验结果表明，对冠状动脉粥样硬化造成的心肌功能的影响，本实验体现为心肌组织产生的NO水平及NOS活性的降低，同时有SOD水平的降低和MDA水平的升高，治疗组分别给予参芍胶囊低、中、高剂量治疗，6周后分别观察心肌组织中各指标变化情况。通过统计学分析得出如下结论：与模型组相比：三种剂量组对心肌功能均有改善作用，但低剂量组和高剂量组对于心肌功能的影响差异无显著性（P>0.05），只有中剂量组有明显的改善心肌功能的作用，差异有显著性（P<0.05）。
通过上述试验结果可以看出，参芍胶囊可以通过影响NO、NOS、SOD及MDA的水平而改善冠状动脉粥样硬化性心脏病大鼠心肌功能的作用，验证了参芍胶囊治疗冠心病心肌缺血的机制。
目前,大量的流行病学、基础及临床研究已经公认,高脂血症及其随后形成的动脉粥样硬化是导致缺血性心脏疾病最重要的危险因素［2］。长时间的心肌缺血会导致心肌细胞功能障碍，进一步影响心脏舒张及收缩功能，导致冠状血管损伤，血管内皮功能细胞障碍（endothelialdysfunction,ED）,最后导致缺血性心肌病 ，而内皮功能障碍又与动脉粥样硬化的形成、发展密切相关，是一个恶性循环过程。参芍胶囊是根据中医气血相关理论组方制成治疗冠心病心绞痛的高效新型中成药,主要由其有效成分主要是人参茎叶皂苷及有活血化瘀滋阴止痛、降血脂的白芍。参芍胶囊以人参为君药,用于补气,以白芍为臣药,行瘀止痛,养血和阴,两药合用,共奏活血化瘀,益气止痛之功效。
内皮功能障碍是指血管内皮细胞对非适应性功能状态所作的有限调整,通常是内皮细胞功能特性改变或功能的部分缺失。内皮细胞具有多方面的生理功能,主要为调节血管张力，维持凝血和纤溶系统之间的平衡，抑制血小板的聚集和活性等。它通过分泌具有扩血管作用的内皮源性舒张因子（EDRF,即NO）来调节血管张力,因此通常使用内皮依赖性的血管舒张功能来反映内皮功能［3］。内皮细胞功能障碍时其释放到心肌组织中的NO、NOS均减少。本实验以NO及一氧化氮合酶（NOS）作为监测指标，可以较好地反映内皮细胞功能，NOS是NO合成过程中的关键酶，故可以从机制上探讨心肌功能受损及改善的原因。
MDA为脂质过氧化代谢产物，含量增高时，说明有明显的组织或细胞损伤；SOD是组织自身产生的抗氧化酶，对组织或细胞具有保护作用，含量增高时说明组织或细胞抗氧化损伤的能力增强［4］，本实验中，冠状动脉粥样硬化大鼠心肌组织中SOD水平降低，而MDA水平升高；给予参芍胶囊治疗后，可见有明显的MDA降低及SOD的升高，说明参芍胶囊有增强心肌抗氧化及抗损伤的功能。
本实验研究表明了参芍胶囊可以改善心肌细胞功能。其机制可能与下列方面有关：参芍胶囊是由人参茎叶皂苷、白芍组成中药制剂,具有活血化瘀、益气止痛的功效。现代药理研究证实,参芍胶囊中所含的人参皂苷能增加红细胞内的2,3-二磷酸甘油酸,可以降低血红蛋白对氧的亲和力,增加组织对氧的摄取;能激活乳酸脱氧酶、琥珀酸脱氢酶,加强心肌细胞的能量代谢（三羧酸循环、氧化磷酸化）产生心脏活动的能量;能使前列环素I2/血栓素A2比值升高,扩张血管,抑制血小板聚集;能消除自由基,有抗氧化,稳定溶酶体,保护心肌的作用［5］。白芍有镇静、降温作用,能降低心肌耗氧量［5］。参芍胶囊通过降低血脂从而改善血管内皮细胞功能的作用疗效肯定，其机理复杂，有待进一步探讨。
【参考文献】
1 沈庆法.实用中医大全.上海:上海古籍出版社,1992,1161.
2 叶任高,陆再英.内科学,第5版.北京:人民卫生出版社, 2000,149-280.
3 LandmesserU, Hornig B, DrexlerH. Endothelial function: a critical determinant in atherosclerosis. Circulation, 2004, 109（21 Suppl1）:1127- 1133.
4 孙平龙，尚云，卫新国. 黄芪保心汤对实验性心肌缺血大鼠心肌组织SOD、MDA 水平及心肌组织形态学的影响.上海中医药大学学报，2000,142:38-40.
5 阴健, 郭力弓. 中药现代药理研究与临床应用. 北京:学苑出版社，1993.
作者单位：河北保定，河北大学卫生职业技术学院