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Effects of Jing-points of three ying meridian of hand with acupuncture in acute hypoxia mice
Xu Fangming，Guo Yi，Chen Shuangbai
Biomedical Engineering Department of Chongqing University of Medical Science，Chongqing，400016.
【Abstract】 Objective To observe the effects of jing-points of three ying meridian of hand.Methods 60mice was divided meanly into5groups of shaoshang，zhongcong，shaocong，acute hypoxic control，blanket control.The effects of each group was observed with the index of Na + -K + ATPase and LDH of the brain and the heart.Results The contains of Na + -K + ATPase and LDH of zhongcong enhanced clearously than those of acute hypoxic controle.Conclusion There is relative specity of jing-points of three ying hand meridian in acute hypoxia mice which is something with the enhancement of Na + -K + ATPase and LDH of the brain and the heart.
【Key words】 acupuncture three ying meridian of hand jing-point specificity of acupoint acute hypoxia
井穴多用于急救，一般多个井穴一起使用，常能取得很好的疗效，已为大量的临床和动物实验所验证。但对单个井穴的应用，研究较少。基于此，本实验观察了针刺手三阴井穴对急性缺氧小白鼠的影响，看此三穴是否存在腧穴特异性，以期为临床提供实验借鉴。
1 材料与方法
1.1 动物及分组 ICR小鼠60只（北京维通利华实验动物技术有限公司提供），体重14～16g，雌雄各半，购进后适应性喂养1周，然后称重，将小鼠按体重平均分到各组。分组如下:少商、中冲、少冲、缺氧对照、空白对照，每组各12只。
1.2 实验方法
1.2.1 实验步骤 （1）针刺:一人捉拿小鼠，另一人针刺各组腧穴（腧穴定位参照人体十二井穴;针具为华佗牌针灸针，规格为0.25mm×40mm），每只只针左侧腧穴，每穴出血5滴;缺氧对照和空白对照组只捉拿相同时间而不予针刺;（2）休息:各组小鼠10min;（3）缺氧:将小鼠放入125ml广口瓶中（瓶口抹凡士林，每瓶内放钠石灰3g），每瓶放小鼠一只，从小鼠放入瓶内时开始计时，于第20min末迅速取出小鼠并处死，取出大脑皮层、心脏，放入冻存管，置-15℃冰箱保存待测。实验时每组每次只做一只，第一次按少商、中冲、少冲、缺氧对照、空白对照顺序进行，第二次按中冲、少冲、缺氧对照、空白对照、少商顺序进行，以此类推。实验在19:00～23:00之间进行。
1.2.2 指标
1.2.2.1 组织液的制备 先称取小鼠大脑皮层、心脏的重量，用生理盐水按1（W）:9（V）进行匀浆，用电动匀浆机在冰水中匀浆3～5min，转速为1500r/min;然后高速离心15min（10000g/min），取上清液测定。
1.2.2.2 指标检测 采用南京建成生物工程研究所ATP酶测试盒、蛋白定量（法）测试盒、乳酸脱氢酶测试盒测定大脑皮层、心肌Na + -K + -ATPase、LDH活性。
2 结果
针刺手三阴井穴对急性缺氧20min小白鼠大脑皮层、心肌Na + -K + -ATPase、LDH活性的影响见表1。
从表1可知:（1）小白鼠急性缺氧后，大脑皮层Na + -K + -ATPase活性较空白对照组极显著降低（P<0.01），针刺手三阴井穴后，各组小鼠大脑皮层Na + -K + -ATPase活性均有所提高，其中中冲组较缺氧对照组Na + -K + -AT-Pase活性有显著提高（P<0.05）。（2）小白鼠急性缺氧后，大脑皮层LDH活性较空白对照组显著升高（P<0.05），针刺手三阴井穴后，各组小鼠大脑皮层LDH活性均有所提高，其中中冲组较缺氧对照组LDH活性有极显著提高（P<0.01）。（3）小白鼠急性缺氧后，心肌Na + -K + -ATPase活性较空白对照组极显著降低（P<0.01），针刺手三阴井穴后，各组小鼠心肌Na + -K + -ATPase活性均有所提高，其中中冲组较缺氧对照组Na + -K + -ATPase活性有显著提高（P<0.05）。（4）小白鼠急性缺氧后，心肌LDH活性较空白对照组极显著升高（P<0.001），针刺手三阴井穴后，各组小鼠心肌LDH活性均有所提高，其中中冲组较缺氧对照组心肌LDH活性有显著提高（P<0.05）。
表1 针刺手三阴井穴对急性缺氧20min小白鼠大脑皮层、心肌Na + -K + -ATPase、LDH活性的影响 （略）注:（1）上述指标单位均为U/mgprot。（2） ① 与缺氧对照组比较，P<0.01; ② 与缺氧对照组比较，P<0.05; ③ 与缺氧对照组比较，P<0.001
3 讨论
本实验选用急性缺氧动物模型，在观察指标上，选择了与缺氧关系密切的Na + -K + -ATPase、LDH ［1～5］ 。有研究表明，小鼠在密闭容器中受缺氧因素损害，主要反映在心和脑缺氧 ［6］ 。因此，本实验以心和大脑皮层作为观察对象。从实验结果来看，急性缺氧后，小白鼠大脑皮层Na + -K + -ATPase、LDH活性及心肌Na + -K + -ATPase、LDH活性的均下降，而针刺手三阴井穴后，上述指标均升高，但只有中冲组升高最多，与缺氧对照组比较有显著性差异，表明在对急性缺氧小白鼠的影响方面，此三穴存在特异性。按神经节段理论，腧穴功能特异性是由于腧穴下或邻近神经属于不同的神经节段，从而产生了效应的特异性。从手指的神经分布来看，不同的手指接受相同的神经支配，即手三阴井穴中，有两个或三个腧穴受同一神经支配，但这些井穴的作用不同，因而不能用神经节段理论来解释腧穴功能特异性，虽然此理论能对一些腧穴功能特异性作出较满意的解释。按皮层投射理论，人体各个器官、组织在大脑皮层中都有它的投射区域，投射区域的大小与不同部位的感觉和运动的灵敏程度有关。感觉和运动功能越灵敏，则投射区面积越大。大拇指和食指在大脑皮层的感觉代表区的投射面积要比胸部十二根脊神经传入的代表区总面积大几倍;在运动代表区也是如此，手与五指所占的区域几乎与整个下肢所占的区域大小相等。大拇指在五指中的灵敏度最高而在皮层中的投射面积也最大。感觉、运动灵敏部位由于具有较大量的感受装置，皮层与其相联系的神经元数量也必然较多，因而通过对于这些灵敏部位的感觉运动刺激，可能反射性地提高与其相联系的神经元的活性。按此皮层投射理论，哪个手指在皮层的投射区面积大，刺激哪个手指对皮层的作用就大。因此，刺激大拇指的少商穴对皮层的作用应最大，其提高小鼠耐缺氧能力应最强。但实验结果并不支持这一理论。按经络理论，十二井穴分属于十二经脉，并属于五脏六腑。因此，井穴反映了所属脏腑的功能。在手三阴井穴中，只有中冲效果最好，中冲属于心包经，少冲属心经，按理针刺少冲也应有效，可实验结果并不支持，其中机理值得进一步研究。
参考文献
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基金项目:天津市卫生局中医、中西医结合科研课题（编号:02038）
作者单位:400016重庆医科大学生物医学工程系
300193天津中医学院