中药疏肝汤对人体免疫功能的影响

　　【摘要】 目的  通过研究中药疏肝汤（SGT）对人体淋巴细胞转化率（LTR）的影响，准确地评估SGT对人体免疫功能的影响。 方法  应用全血淋巴细胞培养法，在适量血凝素的作用下，检测不同浓度的SGT对LTR的影响。 结果  各种浓度的SGT对LTA都有一定的影响，特别是在0.25～0.06g/ml浓度范围内影响更为明显，P<0.01，差异有显著性。 结论  在试管内SGT可明显提高LTR，在实验设置的浓度范围内，随浓度的降低SGT对LTR的促进作用不断加强。

    Effect of SGT granules on the lymphocytetransformation rate of human in vitro

    Zhang Wei，Wang Chengxin

    Dep of Pathology of Foshan，Nanhaiyanbu Hospital，Guangdong528247.
   
    【Abstract】 Objective To study the effect of SGT on the lymphocyte transformation rate（LTR）of human in vitro.Methods By using micro-blood lymphocyte culture method the effects on the human LTR of different concen-tration of SGT were monitored in proper PHA existence.Results Different concentration of SGT had different effects on LTR in the range of0.25～0.06g/ml concentration.LTR could be greatly raised and there were statistically signif-icant in difference（P<0.01）.Conclusion SGT could obviously promote LTR in vitro in the range of concentration of experiment，the promoting effect of SGT on the LTR had been constantly strengthened with the reducing of concen-tration.

    【Key words】 Shu Gan Tang cell culture lymphocyte transformation rate

    中药疏肝汤是我们用于治疗乳腺增生症的传统中药，具有疏肝理气及破血散结的作用。前期的研究显示其在试管内有杀灭人乳癌细胞的作用。方中的当归、黄芪及其提取物单一使用均有免疫活性 ［1］ ，但作为复方，其免疫作用如何却鲜有报道。为全面认识SGT复方对人体的综合作用，我们应用全血细胞培养法，观察SGT对人LTR的影响，正确评估其对人体免疫功能的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料 SGT由我们自己熬制，浓度为1∶10;内含植物血凝素（PHA）的RPMI1640培养液购自青岛海尔斯生物工程公司（PHA的浓度为0.25mg/ml）;全血采自一位35岁女性自愿者，其在1个月内未服用过任何药物。

    1.2 方法

    1.2.1 培养分离淋巴细胞 SGT对LTR的影响参照文献 ［2］ 所介绍的方法，将全血0.3ml加入含RPMI1640完全培养液2.5ml的试管中，每管加药液0.2ml。共设5个药物浓度组，分别为1、0.5、0.25、0.13、0.06g/ml，不加中药的试管为阴性对照组。每个浓度重复两个相同样本，于37℃、5%CO 2 的恒温培养箱中孵育72h，1500r/min离心10min，除去上清液，加入0.75M浓度的氯化钾溶液8ml及固定剂1ml（甲醇∶冰乙酸=3∶1），重复上一操作，得到较纯的淋巴细胞。我们另外还抽取了50位成年女性的血液，以同样的方法（不加SGT）进行淋巴细胞培养，计算LTR，取均值作为正常对照值进行统计学处理。

    1.2.2 涂片制备及镜检 培养结束，吸取淋巴细胞液涂片，每份样本涂片两张，烘干后用Wright-Giemsa氏方法染色，由不知药物浓度的医师镜检计数淋巴细胞及LTR。LTR的计算方法如下:LTR= 已转化的淋巴细胞已转化的淋巴细胞+未转化的淋巴细胞×100%

    1.2.3 统计学方法 以t检验进行统计学处理。

    2 结果

    淋巴细胞加分裂原培养后，可转化为各种形态的母细胞，有以下几种类型:（1）网状细胞样淋巴细胞:细胞明显增大，为成熟未转化细胞的数倍，大致呈阿米巴样，核仁明显。（2）淋巴母细胞:比成熟淋巴细胞大3～4倍，胞浆有时伸出伪足，核质疏松有核仁。（3）过渡型淋巴细胞:比成熟淋巴细胞稍大，与成熟淋巴细胞的区别是有核仁。（4）成熟淋巴细胞:也即未转化的细胞，大小同末梢血中未培养的淋巴细胞相一致。转化了的淋巴细胞是指淋巴母细胞、网状细胞及过渡型淋巴细胞，具体结果如表1所示。

    从表1中看出SGT在0.5～0.06g/ml浓度范围内，可提高淋巴细胞的转化率，但在0.5g/ml组没有统计学意义（P>0.05），在0.25～0.06g/ml组可明显提高淋巴细胞的转化率，差异有显著性（P值分别<0.05和<0.01），并随浓度的降低其对LTR的影响而不断增强。

    表1 疏肝汤对LTR的影响 （略）
 
     3 讨论

     淋巴细胞在体内分布很广，普遍存在于血液、淋巴组织等处。1960年Nowell氏发现淋巴细胞在植物血凝素的刺激下能转化为淋巴母细胞，并具有很强的分裂能力，不断增生释放出多种可溶性淋巴因子，引起细胞免疫反应，发挥其抗肿瘤、抗病原微生物等防御作用 ［3］ 。本实验应用微量全血淋巴细胞培养方法研究了在适量PHA存在的情况下，SGT对LTR的影响。结果发现SGT在0.5～0.06g/ml浓度范围内，可提高LTR，特别是在0.25～0.06g/ml浓度范围内可明显提高LTR，差异有显著性（P值分别<0.05和<0.01）。SGT促进淋巴细胞转化的机理尚不十分清楚。有文献报道，当归和其单体成分阿魏酸均能明显地促进转化的淋巴细胞DNA及蛋白质的合成 ［4］ ，本实验结果进一步证实了当归无论是单体成分或者是在复方中使用，其药效不变或同 其它药物之间还有协同作用。中药制剂的免疫活性作用常表现出复杂的量效关系，从本实验设置的浓度范围来看，SGT在低浓度时对LTR的促进作用远远大于高浓度组，在实验设置的浓度范围内，随着浓度的降低其对LTR的促进作用而不断加强。因此，本实验的研究结果为SGT因病施治、针对不同的疾病选择不同的剂量，提供了可靠的科学依据。

    参考文献

    1 杨海贤，赵钢.免疫杀伤中LAK细胞的坏死和凋亡及黄芪多糖的影响.中国肿瘤临床，1998，25（3）:669.

    2 杨贵贞.医用免疫学.长春:吉林人民出版社，1980，69.3 林学颜.免疫学基础.福州:福建科技出版社，1980，72.

    4 周全黄.中药免疫药理学.北京:人民军医出版社，1994，101.

    作者单位:528247广东省佛山市南海区盐步医院病理科
    430033湖北武汉江汉大学医学院病理教研室