血清粘附分子在系统性红斑狼疮患者中的临床应用

    【摘要】 目的  了解各指标与系统性红斑狼疮（SLE）疾病的相互关系。 方法  对66例活动期SLE患者血清可溶性粘附分子1（sICAM-1）、sICAM-2、sICAM-3及血清抗核抗体（ANA）、补体C3、C4及红细胞沉降率（ESR）进行调查;对6例SLE患者，分别于临床活动期、恢复期、静止期三个不同阶段采集血标本进行各项指标动态观察，应用ELISA检测技术对各粘附因子、ANA进行调查;全自动双光径免疫浊度分析仪检测补体C3、C4;魏氏沉降法测定ESR。 结果  66例SLE患者各项指标均明显高于正常对照，两者间表现出差异有非常显著性（P均<0.001）;动态观察结果表明，SLE患者随临床病情改善，各粘附因子及ESR、ANA水平，均呈逐渐下降的趋势，补体C3、C4逐渐上升。经相关性统计分析，只有sICAM-1与ANA、C4的水平变化分别表现出正相关与负相关（r=0.997、r=-0.993;P均<0.05）; 结论  粘附分子可能参与SLE疾病过程。
      
　　【关键词】  系统性红斑狼疮;可溶性粘附分子;抗核抗体;红细胞沉降率;补体
      
　　Study on the level of adhesion molecules in serum of systemic lupus erythematosus patients
     
　　LIWei，XIE Wen-yue，HUANG Li-li，et al.

　　Guangzhou Military General Hospital，Department of Laboratory，Guangzhou510010，China
   
　　【Abstract】 Objective To detect the level of soluble intercellular adhesion molecules（sICAM）、ANA、ESR、C3、C4on61systemic lupus erythematosus（SLE）patients.At the same time，dynamic results of these target were moni-tored on6SLE patients during the period of activation、restoration、inactivation.then analyse the relation between the targets and the disease.Methods Use ELISA to examine sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3、ANA（anti nucleus an-tibody），IMMAGE Immunochemistry System to check up C3、C4，Simultaneity measure ESR on61SLE patients and21normal cases.Results All results between SLE and normal cases were showed significant difference（all P<0.001）;The dynamic results showed the level of sICAM and ANA declined gradually with the improvement of clinic symptom.But only sICAM-1level correlated well with ANA and C4after statistical analysis（r=0.997、r=-0.993;P<0.05、P<0.05）.Conclusion sICAM measurement may serve as an additional serologic marker of dis-ease activity in patients with SLE.
   
　　【Key words】 systemic lupus erythematosus;soluble adhesion molecules;antinucleus antibody;ESR;complement body
      
　　血清可溶性粘附分子（sICAM）在系统性红斑狼疮患者（SLE）中作用的研究日益受重视，包括从粘附分子探讨SLE的发病机制，粘附分子与病情活动性的判断，抗粘附分子抗体用于SLE的治疗等 ［1～3］ 。本文就我院2001～2002年收治的SLE患者血清可溶性粘附分子sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3进行调查，与此同时检测抗核抗体（ANA）水平，血清补体C3、C4含量，红细胞沉降率（ESR）从中观察这些指标与疾病的相互关系，现将结果报告如下。

　　1 资料与方法
    
　　1.1 病例选择 本院2001～2002年收治的SLE患者66例，其中男16例，女50例，男女比例1:3.2，年龄13～79岁，平均43.54±17.02岁。所有病例均在入院时，病情处于活动期，治疗前采集血标本，进行各种指标观察。另对6例SLE患者，其中男1例，女5例，年龄7～48岁，分别于临床活动期、恢复期、静止期不同阶段采集血标本做动态观察。所选病例诊断符合1997年美国风湿病学会（ACR）修订的SLE诊断标准。设门诊健康体检者12例为正常对照，其中男4例，女8例，年龄21～53岁，平均40.25±11.44岁。
   
　　1.2 方法 应用ELISA技术对3种sICAM及ANA指标进行调查。sICAM检测严格按试剂盒（DIACLONE.FRANCE）说明书的操作步骤进行，酶标仪（DENLEY DRAGON WELLSCAN MK2）读取数据以试剂盒配给的标准物制定标准曲线求出各项数据，结果以ng/L表示;ANA检测选用美国Trinty Biotech公司试剂，按试剂盒要求进行试验，样本（Sample）所测的OD值以“S”表示，试剂盒配给的临界值（Cut off值）以“Co”表示。检测结果以S>Co判为阳性，并求出S/Co值，以比值表示。应用全自动双光径免疫浊度分析仪（BECKMAN IMMAGE USA）检测血清补体C3、C4，结果以g/L表示。ESR检测采用魏氏自然沉降法结果以mm/h表示。
   
　　1.3 统计学处理 所有数据经SPSS软件统计处理。各数据以ˉx±s表示;SLE组各数据分别与正常对照比较并进行t检验;4例SLE动态观察各组数据，以3种sICAM分别与ANA、C3、C4、ESR进行两两比较相关分析，结果以r表示。

　　2 结果
    
　　2.1 66SLE患者血清粘附因子及ANA等项目检测结果  见表1。
    
　　表1 血清粘附因子及ANA等项目检测结果 （略）
    
　　注:SLE各数据与对照组比较，P均<0.001
    
　　2.2 6例SLE动态观察sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3水平分别与ANA、ESR、C3、C4水平进行两两相关性分析，结果只有sICAM-1与ANA、C4分别表现出正相关和负相关，其余结果无明显关联（均P>0.05），见表2、图1。

　　表2 6例SLE患者血清各项指标动态观察结果（略）

　　注:与sICAM-1比较r=0.997， * P<0.05;与sICAM-1比较r=-0.993， ** P<0.05
 
　　图1 6例SLE患者血清sICAM-1与ANA、C4水平动态观察结果（略）
   
　　3 讨论
    
　　SLE患者体内存在多种自身抗体，这些自身抗体与抗原结合形成免疫复合物沉积在关节、小血管或肾小球，激活补体引起机体免疫调节紊乱，从而表达出一系列炎症坏死复杂的临床症状。近年的研究认为多种粘附分子（adhesion molecule，AM）参与了T、B细胞间的活化及两者间的相互作用。有文献报道淋巴细胞功能相关抗原-1（lymphocyte function associated antigen-1，LFA-1）的3种可溶性配体sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3与SLE疾病密切相关 ［1～3］ 。本文对66例临床处于活动期SLE患者血清3种sICAM及ESR、补体C3、C4多项指标观察结果表明，SLE患者各项指标与正常对照比较明显升高，统计处理表现出差异有非常显著性，而正常人体内粘附因子含量较少（表1）。6例动态观察结果表明，SLE患者随着临床病情由活动期-恢复期-静止期的改善，sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3及ANA、ESR水平逐渐下降，C3、C4逐渐上升，但经相关性统计分析只有sICAM-1分别与ANA、C4的水平变化表现一定的关联（图1），其他指标无统计学意义（表2）。由于ESR与补体C3、C4仍被认为是判断SLE疾病活动的实验室指标，ANA水平变化在某种程度上反映了临床病情，本文在动态观察中初步得到的结果提示，sICAM-1可能参与了SLE疾病过程。SLE血清sICAM-1的水平报道结果不一 ［4～6］ ，其原因可能与检测所用试剂不同有关，本文调查的正常水平为5.73±3.28ng/L（表1）。Pino Otin等 ［7］ 在研究中发现SLE血清中sICAM-3升高，在活动期患者尤为显著，认为与T细胞活化有关。本文动态观察中发现SLE患者在疾病活动期3种sICAM均异常增高，当病情恢复至静止期仍然显著的高于正常对照并持续于整个疾病（表2），SLE患者这种血清表达多种可溶性粘附分子的异常，可能与其疾病过程中T、B细胞活化、免疫复合物产生、补体活化与消耗以及某些细胞因子的异常有一定的关联 ［8］ ，sICAM-1与细胞膜ICAM-l是同型蛋白分子，以可溶性状态存在于血循环中，其主要生物学作用是与ICAM-1竞争性结合白细胞表面相应配体，在炎症细胞浸润和免疫反应中发挥作用 ［2，3］ ，一些可溶性粘附分子在血清中的浓度可能反映SLE病情的变化。本文调查初步观察到一些现象，而这些现象的发生及粘附分子在SLE疾病中的致病机制还有待更进一步研究。

　　【参考文献】
    
　　1 凌燕，孙凌云.粘附因子在系统性红斑狼疮发病机制中的作用.中华风湿病学杂志，2000，3:186-188.
   
　　2 周同，江永娣，姚建，等.系统性红斑狼疮患者淋巴细胞粘附分子表达的观察.中华内科杂志，1995，34:545-547.
   
　　3 Sari RA，Taysi S，ErdemF，et al.Correlation of serum levels of soluble intercellular adhesion molecule-1with disease activity in systemic lu-pus erythematosus.Rheumatol，2002，4:149-52.
   
　　4 张开明，郭志孝，尹兴平，等.SLE患者血清sICAM-1测定及皮损sICAM-1表达的研究.中华风湿病学杂志，1999，3:47-48.

　　5 Mrowka C，Slieberth HG.Detection of circulating adhesion molecules I-CAM-1，VCAM-1and E-selection in Wegener′s granulomatosis，systemic lupus erythematosus and chronic renal failure.Clin Nephrol，1995，43:288-296.
   
　　6 Spronk PE，Bootsma H，Huitema MG，et al.Levels soluble VCAM-1，soluble ICAM-1，and soluble E-selection during disease exacer-bation in patients with systemic lupus erythematosus（SLE）:a long term prospective study.Clin Exp Immunol，1994，97:439-444.