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本室在用Coulter MAXM 血细胞分析仪测定血小板时,临床医生经常反映血小板结果偏低。为此,笔者对仪器测定血小板结果低于70×109/L的120例标本再进行了手工计数,将两法结果比较分析报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 2004年1月~12月我院住院病人。
1.1.2 仪器和试剂 Coulter MAXM五分类,血细胞分析仪和配套试剂。
1.1.3 血小板稀释液 草酸铵稀释液[1]。
1.1.4 EDTA-K2真空血常规试剂管 由瑞奇公司提供。
1.2 方法 用EDTA-K2真空管采抗凝血2ml充分混匀后,1h内在Coulter MAXM 血细胞分析仪测定血小板。选血小板结果低于70×109/L的120份血液标本,用手工法(稀释液0.38ml+20μl血液充分混匀充液于血球计数板的两边计数池,静置15min后计数 5个中方格内的Plt数,取其平均值计算结果)[2]。
2 结果
根据血小板直方图和两法测定血小板的结果分析发现有3种结果。
(1)两法测定血小板结果较一致的73例占68.8%,其血小板直方图呈正态对数分布均在20fl以内,有明显的主峰,且曲线都没有拟合。
(2)两法血小板计数结果相差较大的且仪器计数结果高于显微镜计数结果的17例占14.2%,血小板直方图明显偏离对数正态分布,血小板直方图左移甚至缩窄呈尖峰样。
(3)两法血小板计数结果相差较大的且仪器计数结果低于显微镜计数结果的30例占25.0%,血小板直方图也同样偏离对数正态分布,血小板直方图不规则右移,血小板直方图分布低而宽,并有曲线尾部上翘。将两种方法测得的3种结果作统计学配对t检验(见表1)。
表1 血细胞分析仪与手工计数的Plt结果(略)
3 讨论
根据Coulter MAXM 血细胞分析仪计数血小板的原理,它是直接计数2~20fl范围内的血小板,然后运用专利的拟合技术根据对数正态分布理论,用电子拟合线拟合0~70fl范围内的血小板数量作最终报告结果,具有双曲线的血小板直方图是它的标准结果。只具有单曲线的血小板直方图,只要呈正态对数分布,曲线均在20fl以内有明显的主峰,其仪器计数法和显微镜计数法较一致,与临床基本吻合。对血小板直方图左移甚至缩窄呈尖峰样的血小板直方图产生的原因除血小板确实体积偏小外,主要是乳糜微粒和红细胞碎片,红细胞夹杂物被误认为血小板,造成血小板假性增高[3],这时仪器结果高于显微镜结果。对偏离对数正态分布血小板直方图右移,曲线低而宽并有尾部上翘但程度不等,产生的原因是血小板聚集未充分抗凝或血液高凝状态等原因,这时仪器结果低于显微镜计数结果[3],MPV增高,用瑞氏染色可见血小板三五成群的聚在一起。
血小板为多功能的细胞,在生理止血及某些病理过程中起着重要的作用,由于血小板大小相差悬殊,它的特点是易于粘附、聚集,因此采血是否顺利是造成血小板偏低的又一重要因素,静脉经多次穿刺而引起水肿及皮下出血时,因组织损伤后组织凝血因子易混入血标本造成外源性凝集,产生肉眼看不见的小凝块是造成血细胞分析仪测定血小板结果偏低的常见原因之一[4],某些病理变化也可引起结果偏低,如特发性积压血小板减少性紫癜时,巨大血小板易漏检。用了某些药物后,也可造成结果不准确。标本送检不及时造成血小板破坏是计数结果偏低的又一原因。因此,抽血不顺利的标本必须重新采血后测定,对血细胞分析仪也要定期清洁保养以防止标本污染、红细胞被破坏,采血时应严格按照操作规程,由真空管自己控制血量,严禁针管注入,尽量减少血小板的破坏,防止人为因素的干扰,给临床造成不必要的误诊。
【参考文献】
1 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程,第2版.南京:东南大学出版社,1997,14.
2 李涤生.临床检验基础.北京:人民卫生出版社,1993,68-69.
3 赵江燕,钱厚明,吴亦宏.细胞分析仪测定血小板计数结果的分析.上海检验杂志,1998,13(2):127.
4 李永红,钟步云.血细胞分析仪测血小板结果偏低的原因及纠正方法.上海检验杂志,2001,19(2):112.
(编辑:若 木)
作者单位: 641400 四川简阳,简阳市人民医院检验科