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在长期的病理检验工作中,为了缩短病理组织脱水时间,提高工作效率,要求制片快,质量好,既要保证诊断的要求,又要使制片质量不断提高,笔者通过反复摸索,积累经验,在传统的病理组织脱水基础上进行了改进,现报道如下。
1 方法与步骤
1.1 常规脱水方法 (1)取材的活体组织放入FAA(甲醛10ml,95%酒精85ml,冰乙酸5ml)固定20~30min;(2)直接移入90%酒精15~20min;(3)移入95%酒精Ⅰ15~20min;(4)移入95%酒精Ⅱ15~20min;(5)移入无水酒精Ⅰ15~20min;(6)移入无水酒精Ⅱ15~20min;(7)移入丙酮15~20min;(8)移入二甲苯Ⅰ15~20min进行透明;(9)移入二甲苯Ⅰ15~20min;(10)浸蜡、包埋、切片、染色。
1.2 改进后的方法 (1)组织块经FAA混合液固定20~30min;(2)将组织块移入90%酒精15~20min;(3)移入95%酒精15~20min;(4)移入无水酒精Ⅰ15~20min;(5)移入无水酒精15~20min;(6)正丁醇15~20min;(7)浸蜡包埋、切片、染色。
2 结果
组织切片平整,无纵折现象,组织粘附牢固,不易掉片,染色均匀,结构清晰。
3 注意事项
(1)脱水所用容器需要密封,以防溶液挥发和溢出。
(2)为了确保组织“彻底脱水”,一定要保持液体的浓度和液体与组织的比例。
(3)振荡频率应视组织块的多少选择。
4 讨论
此法较适用于条件简陋或基层单位的病理科,改变过去那种传统的脱水方法。近几年来,我科一直采用上述方法进行病理组织脱水,做了大量的外科、尸检、脱落细胞活检等各类大小不同性质的组织块。通过此方法脱水所制作的蜡块,均能连续切片,并不影响组织结构改变,亦不出现凹陷现象。对组织不引起因收缩或硬化而出现切片困难问题。对浸蜡包埋、HE染色、特染均能获得满意效果。
在制片过程中:利用振荡器的振动,能使溶液分子加速运动。组织和溶液始终保持不断的振动,这时液体和气体内的无规则运动着的分子,不断地冲击着溶液内的溶质悬浮颗粒,使溶剂分子通过半透膜,不断扩散—渗透到组织中去。随着不断的振动,渗透性增加,即迅速进入组织,以加速脱水作用,并达到组织尽快脱水。
为了进一步缩短脱水时间,笔者根据高浓度酒精,较低浓度酒精脱水快的原理,将组织块固定后,直接放入90%酒精内开始脱水,既经济又省时。在随后的透明过程中,改用正丁醇这一中间媒剂取代二甲苯。它均能与水、酒精相混合。而且又能溶解石蜡,便于包埋剂的浸透作用,不仅可以代替酒精使组织脱水,还可以代替二甲苯使组织透明,使组织直接浸蜡而达到包埋的支持作用。在工作中笔者体会到,正丁醇在透明过程中优于二甲苯,不需严加控制时间,避免了二甲苯对组织收缩变脆、硬化等现象。另外,由于去掉了有害溶剂二甲苯,减少了对人体的毒害作用。
传统的脱水方法全过程需要10余小时,改进后的新型脱水方法,脱水时间缩短到仅需2h左右,并且效果显著。
作者单位: 636700 四川通江,通江县人民医院病理科
(编辑:若 木)