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1 肌苷和超氧化物歧化酶对体外循环下缺血心肌保护效果的实验研究
肌苷进入心肌细胞后分解为次黄嘌呤的自由基的生成，后者对心肌有一定损害作用。配合氧自由基清除剂超氧化物歧化酶（SOD）有可能消除肌苷对心肌的不利作用，提高肌苷对缺血心肌的保护效果。
1.1 方法 取10～15kg健康犬15条，随机分为3组，即对照组、肌苷组和肌苷加SOD组，每组5条。肌苷组和肌苷加SOD组在阻断升主动脉后，自主动脉根部灌入肌苷50mg/kg的冷生理盐水（4℃）10m1/kg中，对照组仅灌入同容量的单纯冷生理盐水，肌苷加SOD组在开放主动脉前2～3min于主动脉根部再次灌入室温生理盐水20ml，内加SOD600GU/kg（海口康力元产品）。动物处理方法:各组动物分别于阻断主动脉前，阻断主动脉45min，开放15、30min时取心肌备MDA、电镜及含水量测定。心肌指标的测定:（1）心肌MDA测定:研磨标本，配成10%组织匀浆，用硫代巴比妥酸法反应，荧光分光光度计（日本岛津RF—540型）测定过氧化物荧光值（激发波长515mm，发射波长553mm）。
1.2 结果 全身血流降温及主动脉根部灌注含或不含肌苷的生理盐水（4℃）后，3组动物室间隔温度均保持在15～20℃之间。心肌MDA含量:阻断循环前，3组动物的心肌ATP含量之间差异无显著性。对照组在阻断升主动脉20min时，心肌ATP含量已有明显降低，在心脏恢复血流15min时，下降更为明显，两者与阻断前比较均差异有非常显著性P<0.01，提示心肌有重度损害。在恢复血运后30min时，其ATP含量虽然有所增加，但尚远未恢复到阻断前水平P<0.01。单次或多次组的心肌在缺血期间ATP含量与阻断前比较无明显降低，在恢复血运15min单次组心肌ATP含量有所下降，但较对照组轻微（P<0.05），在30min时已恢复到阻断前水平，显示心肌损害较轻;多次组则在恢复血运15min时，就已恢复到阻断前水平。无论单次或多次组，在各时段心肌ATP含量均较对照组明显为高，提示肌苷对缺血心肌ATP水平保持有较为确切的效果，多次给药似较单次用药的效果更为肯定。
1.3 讨论 从结果可看出，对照组无论在缺血和恢复循环后，都表观出心肌有严重损害;而单次组和多次组虽有损害，但较对照组轻，另在恢复循环后30min均已恢复，尤其多次组在再灌注15min已恢复到阻断前水平，与对照组及多次组比较差异有显著性，表明肌苷特别是多次用药时具有较为确切的心肌保护作用。
2 肌苷调节视网膜神经节细胞轴突再生
2.1 材料与方法 视网膜神经节细胞培养:金鱼（Comet Variety，Mt.Pamell fisheries，Mt.Prmell，PA）6～10cm长，避光30min，冰冻麻醉，分离视网膜。视网膜在含木瓜蛋白酶、半胱氨酸的消化液中消化45min，在L-15培养液中研磨3遍，上层2/5悬液为纯化RGC匀浆。用经聚赖氨酸涂层的24孔培养皿，细胞密度为每孔5×1000，培养液含胰岛素、牛血清白蛋白、庆大霉素、过氧化氢酶、转铁蛋白、超氧歧化菌、氢化可的松等，在21℃培养箱中培养5天。CAP-43免疫染色:用新鲜4%福尔马林液固定细胞，100%甲醇去脂，第一抗体系兔IgG结合金鱼GAP-43，第二抗体系选用羊抗兔IgG抗体，在荧光显微镜下计数染色细胞。试剂:A-1由实验室制备，终浓度20%～35%。肌苷、腺苷、次黄嘌呤、5’-一磷酸肌苷）、腺苷脱氨酶、6-巯鸟嘌呤、LY294002。L-15培养液。
2.2 设计与检验 每组试验均以AF-1为阳性对照，以L-15培养液为阴性对照，每个样本均分4份，样本与对照按随机化原则分布在24孔培养皿中，密码封存。5天后在400倍显微镜下，每孔计数不少于150个细胞，计数其中轴突长于5个细胞体直径的RGC数，以此计算平均生长率;计数所用视野数，以此计算平均存活率。
2.3 结果 肌苷调节RGC轴突生长:AF-1是视神经胶质细胞分泌的一种小分子星轴突生长因子，能诱导RGC轴突显著生长，L-15培养液则无此作用。以这两种因素分别作为阳性与阴性对照，我们发现肌苷有刺激RGC轴突生长的作用，经多次试验，发现其有效半量浓度（E-50）是10～15μmol/L，25～50μmol/L达最大活性，相当于AF-1活性60%。肌苷代谢产物Hypoxanthine，5’-IMP，除5’-IMP在100μmol/L有较低活性（较肌苷10μmol/L活性还低）外，其余均无刺激轴突生长的作用。
3 ATP—MgCl 2 和肌苷对缺血性急性肾衰（IARF）初期疗效的实验观察
3.1 材料和方法 成年健康家犬18只，体重10.94±1.95kg，雌雄不拘。强麻醉下行左股动、静脉置管分别用于测平均动脉压（MAP）、取血样和输液、给药。右股静脉点滴1%菊糖。手术切除右肾并暴露左肾动脉总于置电磁探头测肾血流量（RBF），输尿管置输尿管导管收集尿液，动脉夹夹闭肾动脉总于lh造成IARF。
18只动物随机分为3组并给下列3种药物中的1种:0.9%N·S6ml/kg（A，对照组）、A ATP—MgCl2 30μmol/kg（B）、肌苷150mg/kg（C）。3种药物容积均为6ml/kg，在开放动脉夹后半小时内静脉匀速输入。观察IARF前及给药后5h内尿量（UV）、MAP.RBP，测定血、尿钾、钠、肌酐（cr）、菊糖浓度，计算尿血cr比值、利钠分数（FENa + ）、菊糖清除率（C in）。取肾组织皮、髓质交界处作光、电镜检查。所得数据经方差分析和t检验，以P<0.05作为差异有显著性。
3.2 结果 给药后3组动物UV均随时间而增多，两治疗组增加明显（给药后1h、3h，P<0.05;4h、5h，P<0.01）两治疗组C in 在3h和5h均有较大程度恢复，与对照组比较差异有显著性（P<0.01），对照组C in 在观察期间未恢复。松夹后3组动物FENa + 均升高，对照组上升幅度最大，5h后明显高于两治疗组（P<0.01）。与对照组比较，两治疗组在松夹后2h内明显增加RBF，仅ATP—MgCl 2 组给药期间MAP明显下降。
另外，肌苷还能与丹参合用，采用骶管注射，治疗腰间盘突出症等疗效。
参考文献（略）
作者单位:315000宁波医药控股集团药物研究所