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2 抗凝剂的选择
抗凝剂的种类很多,使用具有缓冲作用的抗凝剂,如羟乙基嗪乙烷磺酸(HEPES),可以防止一些凝血因子的破坏,但会使PT测定结果延长,接受肝素治疗病人的APTT结果缩短。所以ICSH和ICTH推荐使用109mmol/L的枸椽酸钠为抗凝剂。我们经过多次试验,认为109mmol/L的枸椽酸钠确定是凝血测定最好的抗凝剂。
3 仪器的校准
新的仪器在使用前必须进行校准,并建立标准曲线,在更换试剂批号、仪器进行维修后等情况下应重新建立标准曲线。仪器与配套的试剂、配套的校准物、质控物和一定的操作方法组成了一个测定系统,校准物和质控物的定值以及仪器的各种性能指标的制定都是在这个系统下完成的,如使用非配套试剂,即使用校准物校准仪器后也可能出现临床无法解释的测定结果。
4 仪器的性能评价
使用新的仪器前必须对仪器的主要性能参数进行评价。内容包括精密度、线性范围、可比性、抗干扰试验等内容,在仪器的评价过程中既能使操作人员熟悉操作方法,同时又能验证测定方法的正确性,是一举两得的事情。
5 保存检测成分稳定性应注意的问题
标本采取后,应尽快送至实验室,在60min内分离血浆,在4h内测定。若无法在4h内测定时,建议将血浆置于-20℃以下的温度保存,可维持较长时间的稳定性,但也必须在10天内进行测定。对于PT、APTT、TT、Fib测定项目可按上述方法进行标本的保存,对于血小板聚集则不能用上述方法进行保存。
6 室内质控的开展
日常工作中须开展室内质控,有条件的应每天随标本进行质控,无条件的也须每周对仪器进行校准,并随机做1~2次质控,以保证测定结果的精确度。
7 室间质评的作用和目前开展的情况
开展室间质评可以改善、提高各实验室测定结果的可比性。目前国内开展的凝血室间质评项目包括PT、APTT和Fbg,每年发放标本2次,每次发放3个批号的质评物(正常和异常水平)。用偏差为指标对结果进行评价,目前使用的评价标准为:PT:±15%,APTT:±15%,Fbg:±20%。
8 正常值范围的确定
正常值不是操作规程或教科书上定出的简单的固定范围,而是随着仪器、试剂、年龄、性别以及环境等因素而变化的,因此,仪器的操作者应学会确定正常参考值的程序,以根据实际情况确定不同的正常参考值。我们对100人做健康体检时作出自己的正常值:PT:(11.0~16.5)±3s,APTT:(20.0~37.5)±3s,Fib:2.0~5.0g/L,TT:(9.5~16.0)±3s血小板聚集:20%~50%。
作者单位:550002贵州贵阳,贵州省骨科医院检验科