大剂量乙肝疫苗联合贺普丁治疗慢性乙肝感染的临床研究

　　【摘要】 目的  提高乙肝感染患者的HBsAg、HBeAg、HBV-DNA的转阴率。 方法  针对乙肝感染患者的病理状态-免疫耐受状态，采用先打破免疫耐受状态后，再行抗病毒治疗，从而达到提高治疗效果的目的。治疗组先采用大剂量乙肝疫苗（60μg）每月1次肌肉或皮下注射，连用6个月后再用贺普丁口服，每天1次，每次1片，连用6个月。对照组单纯用贺普丁治疗，每天1片，连用6个月。 结果  治疗组与对照组相比，其DNA、HBeAg转阴率差异有显著性，HBsAg阴转率差异无显著性。 结论  大剂量乙肝疫苗联合贺普丁治疗处于免疫耐受状态的乙肝感染患者，可以提高其DNA、HBeAg的转阴率。对乙肝感染患者有一定的治疗作用，值得进一步推广研究。
      
　　【关键词】  乙肝感染;乙肝疫苗;贺普丁
     
　　近年来，我国绝大多数肝病专家应用过或正在应用拉米呋啶对慢性乙型肝炎（CHB）抗病毒治疗，统一意见认为:对ALT升高的HbsAg、HbeAg、HBV-DNA阳性病例有肯定的作用，但是对ALT正常的慢性乙肝感染（即乙肝病毒携带者）疗效甚微。为了探讨慢性乙肝感染的治疗方法，进一步提高其临床疗效，我院肝病中心采用大剂量的乙肝疫苗联合贺普丁（即拉米呋啶）来治疗慢性乙肝感染患者30例，通过与单纯贺普丁30例的对比观察，疗效较好，现报告如下。
    
　　1 资料与方法
    
　　1.1 病例选择 采用随机单盲平行对照的方法，选择肝病中心2004年1月～2005年5月就诊患者60例。诊断符合2000年西安第十次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案 ［1］ 。共分两组，治疗组30例，其中男20例，女10例，平均年龄34岁（18～52岁）。母婴垂直传播18例，非母婴垂直传播12例;对照组30例，其中男18例，女12例，平均年龄32岁（16～50岁）。母婴垂直传播20例，非母婴垂直传播10例。所有观察对象均ALT正常1年以上，HBsAg（+），HBeAg（+），HBV-DNA（+）。两组病人病情相似，差异无显著性，具可比性。
   
　　1.2 治疗方法 治疗组先用大剂量的重组乙肝疫苗（60μg）皮下或肌内注射，每月1次，连用6个月，过后改用贺普丁（英国葛兰素威康制药集团生产）口服，每天1次，每次1片，连用6个月。对照组单纯用贺普丁（同一产品）口服，每天1次，每次1片，连服6个月。
   
　　1.3 观察指标 用药前及治疗结束后分别查肝功能、血常规、乙肝病毒标志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HB-cAb）、HBV-DNA荧光定量，观察临床症状及副反应。
   
　　1.4 实验室检查及判断 血清ALT按赖氏法。HBsAg及HBeAg定量分析:采用全自动快速微粒子酶免分析系统IMX检测HBsAg、HBeAg滴度。仪器及试验盒均为美国雅培公司产品，实际可检测滴度范围为0.5～800.0S/N，滴度>2.1为阳性。HBV-DNA定量检测:使用安普利9800荧光DNA分析检测仪，采用美国Biotronics公司生产的荧光标记法HBV-DNA定量试剂盒进行定量集合酶链反应（PCR）检测。<1000拷贝/ml为阴性。

　　1.5 统计学方法 采用χ 2 检验。

　　2 结果
    
　　2.1 对ALT影响 治疗组30例，在治疗过程中出现短暂ALT升高8例（26.7%），约持续4～6周后恢复正常，但没有出现向重型肝炎发展的征象。对照组未出现此现象。

　　2.2 对HBeAg影响 见表1。
    
　　表1 两组治疗对HBeAg影响（略）

　　注:两组相比，HBeAg的转阴率差异有显著性（P<0.05）

　　2.3 对HBV-DNA影响 见表2。
    
　　表2 两组治疗对HBV-DNA影响（略）

　　注:两组相比，HBV-DNA转阴率差异有显著性（P<0.05）
    
　　2.4 对HBsAg影响 治疗组与对照组于治疗前后均未发现HBsAg阴转病例。
    
　　3 讨论
    
　　慢性乙肝病毒感染患者（即携带者）最主要是免疫反应混乱，即对乙肝病毒及其抗原不产生免疫反应-免疫耐受状态，所以打破免疫耐受状态是治疗乙肝携带者的关键，也是目前众多临床肝病专家讨论的问题，有不少方法在应用和探索中，本法就是其中的一种。本文通过应用大剂量的乙肝疫苗来打破病人的免疫耐受状态，然后用贺普丁来抗病毒治疗。经过一个疗程后观察:治疗组在HBeAg转阴率，HBeAg/抗HBe血清转换率和HBV-DNA转阴率的方面与对照组有明显提高，差异有显著性（P<0.05），提示大剂量的乙肝疫苗有提高慢性乙肝感染患者的免疫应答率的作用。
   
　　随着近年来基础免疫学的进展，认为免疫耐受机制可能与树突状细胞和T细胞功能缺陷有关，若从增强和促进DC和T细胞功能入手，有可能打破免疫耐受状态，恢复细胞免疫应答功能，从而为配合抗病毒药物清除HBV感染创造必要的条件。实验证明小剂量HBsAg疫苗（5～10μg）可诱导体液免疫应答，产生保护性表面抗体，可用于预防乙型肝炎，而较大剂量HBsAg疫苗（40～60μg）可诱导细胞免疫应答而有利机体清除HBV ［2］ 。日本的Akbar和法国的Pol实验室对乙型肝炎疫苗进行大量实验和临床研究 ［3～6］ ，这些作者均肯定乙型肝炎疫苗对CHB的治疗作用，最近美国和澳大利亚分别批准以MF59为佐剂的乙肝疫苗（前S2基因）与拉米呋啶联合治疗CHB（Ⅱ期临床试验）。土耳其的Hakan等也报道乙肝疫苗联合IFN-ɑ治疗CHB提高了临床疗效 ［7］ 。本文的研究结果更进一步证实了大剂量的乙肝疫苗联合贺普丁（拉米呋啶）提高了慢性乙肝感染的临床疗效，值得进一步推广应用。

　　【参考文献】
    
　　1 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订.病毒性肝炎防治方案.中华传染病杂志，2001，19（1）:56.
   
　　2 张宜俊.慢性乙型肝炎在抗病毒治疗的浅见.传染病信息，2002.

　　3 Akbar SMF，Horiik N，Onji M.Prongnostic importance of antigen pre-renting dentritic cells during Vaccine therapy in murine hepatitis B virus carrier.Immunology，1999，96:98-108.
   
　　4 Abbar SMF，kajino K，Tanimoto K，et al.Placebo-controlled trials of vaccination with hepatitis B virus Surface antigen in hepatitis B virue transgenic mice.J Hepatol，1997，26:131-137.
   
　　5 Pol S，Drirs F，Michel ML，et al.Specific vaccine therapy in chronic hepatitis infection（letter）.Lancet，1994，344:342-352.
   
　　6 Pol S，Couillin I，Michel ML，et al.Immunotherapy of chronic hepatitis B by anti HBV vaccine.Acta Gastroenterol Belg，1998，61（2）:228-233.
   
　　7 Haken Rentruk.Therapeutic Vaccination in chronic hepatitis B.J of Gastroenterology and Hepatology，2002，17:72-76.
    
　　作者单位:518008广东深圳，深圳阳光医院肝病中心