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皮肤癣菌病，简称癣，是一种常见和多发的皮肤科浅部真菌病。皮肤癣菌主要包括表皮癣菌属、毛癣菌属和小孢子菌属，共同特点是亲角蛋白，可侵犯人或动物的皮肤角质层、毛发、甲板。取皮肤鳞屑在显微镜下直接检查有无真菌细胞（菌丝、假菌丝及孢子）存在，可以很简便、快速地作出诊断，为其治疗提供较为可靠的依据。本文就皮肤真菌直接镜检时应注意的问题作简单介绍。
1 标本采集应注意的问题
(1)标本采集可由皮肤科医生或检验人员进行，采集者应做好自我防护，除穿戴好工作衣帽外，还应戴好口罩和手套，防止病原体污染皮肤或吸入体内。 (2)采集鳞屑一般可用手术刀片或特制的不锈钢刀片，应做好消毒措施，使用过后立即于酒精灯下灼烧，后置入2%戊二醛中浸泡，临采集前用乙醚或高浓度乙醇挥发促干，尽量不要用药棉、纸巾等擦拭，以免刀片上沾染纤维物，给镜检造成干扰。
(3)采集时，先用70%～75%乙醇消毒患处，然后可醮取少量乙醚蒸发干燥。手足癣及体癣均应刮取病变边缘，尤其是新近发生的患处与健康皮肤交界处的鳞屑。
2 制片操作时应注意的问题
(1)封固液：常用10%的氢氧化钾溶液，浓度过高时容易干燥，形成结晶；浓度过低，上皮细胞的蛋白质成分不易溶解，均可影响真菌的镜检。因氢氧化钾与玻璃容器会发生化学反应，生成不溶性的硅酸盐沉淀，使氢氧化钾浓度下降，且有较多杂质，故封固液应当用塑料瓶存放，滴管亦须采用塑料制品。
(2)取适量鳞屑置于载玻片中央，滴加1滴封固液，加盖盖玻片时应尽量不要产生气泡，置酒精灯上微微加热，到产生蒸气而不至煮沸，并可轻轻压紧盖片，用纸巾或药棉等吸去周围溢出的封固液。
3 镜检时应注意的问题
(1)刚加热的玻片应稍稍冷却后再放置到显微镜载物台上，防止有少量蒸气遮住物镜镜头，乃致有腐蚀作用损坏镜头（若已沾染应立即用擦镜纸擦拭干净）。
(2)先将光圈缩至最小，调整好光源的强度，用低倍镜将标本全部的观察一遍，发现可疑有菌丝（假菌丝）或孢子的部位，再用高倍镜全面仔细地观察其大小、形态、数量、透明度、有无分支、有无横隔等特征。皮肤鳞屑标本直接镜检一般可见到的是透明、有隔、常为分支的菌丝（假菌丝）及成链状排列的关节孢子。
(3)检验人员应当加强学习，熟练掌握皮肤真菌菌丝（假菌丝）及孢子的形态，可通过专业书籍以及皮肤科、检验学等医学专业网站上相关的知识、技能和图片的研读，努力提高识别能力。
(4)玻片中经常有很多与真菌细胞相似的物质，如血细胞、上皮细胞、油滴、气泡、氢氧化钾结晶、纤维、玻片裂痕及其他杂质，务必严格鉴别和区分。
4 报告时应注意的问题
皮肤鳞屑做直接镜检找到菌丝（假菌丝）和(或)孢子，一般即可以诊断皮肤癣菌病，但不能确定真菌的种类；而镜检结果阴性时应结合临床表现，谨慎综合分析，不可轻易定论，必要时需重复做镜检或采用培养等其他检查方法。
5 讨论
真菌分离培养为诊断真菌感染性疾病的金标准，可鉴别菌种，同时可做药物敏感试验，但需要数周才能得出结果，对大多的皮肤癣菌病来说时效性显得较差。而真菌直接镜检方法简单，结果回报快速准确，试剂容易获得，真菌形态特异，易于基层人员掌握，同其他方法相比较，经济、快捷、污染性小、阳性率高，有利于对门诊病人做出及时、准确的诊断，各级医院均可开展。对镜检阴性的病例，应反复取材，延长溶解时间，细致检查，必要时做真菌培养、进一步的血清学及其他检查。
作者单位： 224002 江苏盐城，盐城市盐都区疾病预防控制中心
(编辑：余 强)