竹醋液体外抗致病菌的活性研究*

【摘要】  目的 研究竹醋液体外抗致病菌的作用。方法 采用试管内药基法测定竹醋液对13种临床上常见的致病性菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果 竹醋液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、短小芽孢杆菌、生孢梭菌、藤黄微球菌、白色念珠菌、克雷伯肺炎杆菌、蜡样芽孢杆菌、粪肠球菌、烟曲霉菌的MIC分别为0.2％～3.1％．MBC分别为0.78～50%。结论 竹醋液对13种临床上常见的致病菌有显著的抑菌和杀菌作用。

【关键词】  竹醋液；抗菌作用；体外

    Study on anti-pathogenic-bacteria and fungal activity of bamboo vinegar in vitro

    QIAN Hua, WANG Yan-bin, HE Zhi-hua.Zhejiang Forestry Academy，Hangzhou 310023,China

    【Abstract】  Objective  To observe the anti-pathogenic- bacteria and fungal actions of bamboo vinegar in vitro．Methods  An anti-pathogenic-bacteria and fungal experiment was performed with the medicind-based mathod．Results  Bamboo Vinegar had obvious anti- bacteria and fungal actions for the trichophyton rubrum ．Trichophyton actions，and canida albicans，cryptococcus neoformans，aspergillusfumigatus．Its MIC was 0.2%～3.1%,and MBC was 0.78%～50％.Conclusion  Bamboo vinegar has obvious anti- bacteria and fungal actions.

    【Key words】  bamboo vinegar；anti-bacteria and fungal actions; in vitro

    竹醋液是在竹材热解过程中收集的一种呈青黄色或黄棕色的液体混合物，具独特的烟熏味。主要由水、有机酸、酚类、酮类、醇类等物质组成，成分十分复杂。国内外的研究发现竹醋液具有较强的抗细菌和真菌作用 ［1-5］，在医药、农业、环保等领域有着非常广泛的潜在应用价值。目前国内对竹醋液抗真菌作用的研究相对较多，而对抗细菌的报道较少，主要有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌，对这三种细菌的MIC和MBC的测定结果也不一致［3，5］。由于供试菌种少，抗菌谱窄，缺乏系统性和参考价值。本研究前文报道了竹醋液对10种致病性皮肤癣菌的抑菌和杀菌效果［6］。在此基础上，进一步采用试管内药基法测定竹醋液对13种临床上常见的致病性细菌和霉菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。现报道如下。

    1  材料与方法

    1.1  材料

    1.1.1  供试菌株  金黄色葡萄球菌［CMCC（B）26003］、铜绿假单孢菌［CMCC（B）10104］、枯草芽孢杆菌［CMCC（B）63501］、大肠杆菌［CMCC（B）44102］、沙门氏菌［CMCC（B）50094］、短小芽孢杆菌［CMCC（B）63202］、生孢梭菌［CMCC（B）64941］、藤黄微球菌［CMCC（B）28001］、白色念珠菌［CMCC（F）98001］，以上菌株引自浙江省药品检验所抗生素研究室；克雷伯肺炎杆菌［CMCC（B）46117］、蜡样芽孢杆菌［CMCC（B）63303］、粪肠球菌［CMCC（B）32219］，以上菌株引自广州市药品检验所；烟曲霉菌［CCCCMIDA1］ 菌株购自医学微生物菌种保藏管理中心（CMCC）。

    1.1.2  培养基      营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、液体硫乙醇酸盐培养基、真菌培养基、真菌琼脂培养基（中国药品生物制品检定所）。

    1.1.3  供试药物  竹醋液原液由浙江遂昌文照竹炭有限公司提供。再经实验室按不同方法处理后，分为1～3号样品，其中1号为竹醋液原液，2号为新鲜蒸馏液，3号为竹醋液提取物。

    1.2  方法

    1.2.1  菌液制备  取上述菌种，接种于相应的培养基，于规定温度、时间培养，制成菌液备用。实验时用生理盐水稀释成适宜浓度，使各试验管内的菌浓度为103～105cfu/ml。

    1.2.2  体外抑菌试验  采用肉汤稀释法。待测竹醋液供试样品1～3号用营养肉汤连续倍比稀释为0.024%～50%共12个浓度的稀释液，每管加入上述菌悬液0.1ml。用时设阳性对照管和溶剂对照管，各组试管均于规定温度培养24h，观察结果。

    1.2.3  结果判定  以上试验管外观清晰为无菌生长，无菌生长最低供试品浓度即为MIC；无菌生长各试管内培养物营养琼脂培养和真菌琼脂培养菌落数小于5cfu/皿的最低供试品即为MBC。

    2  结果与讨论

    2.1  不同竹醋液样品的体外抑菌试验      竹醋液1～3号样品体外抗致病性细菌和真菌的试验结果见表1、表2和表3。表1  竹醋液1号体外抑菌试验结果表2  竹醋液2号体外抑菌试验结果表3  竹醋液3号体外抑菌试验结果注：“＋”菌已生长示无抗菌作用；“△”在药基上菌未生长，转种到沙堡液基中菌又生长，示仅有抑菌作用，无杀菌作用；“-”在药基上菌未生长，转种到沙堡液基中菌仍未生长，示既有抑菌作用又有杀菌作用

    2.2  竹醋液对13种常见致病菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）  竹醋液1～3号样品抗细菌和真菌试验的MIC和MBC见表4-1，4-2。表4-1  竹醋液抗致病菌试验的MIC和MBC表4-2  竹醋液抗致病菌试验的MIC和MBC试验结果表明，当浓度在1.6%～3.1%时，竹醋液1号和3号对所试验的13种致病菌均表现有体外抑菌作用；当浓度在3.1%～6.2%时，除芽孢杆菌外，竹醋液1号和3号对所试验的其他致病菌均表现有杀菌作用，竹醋液2号浓度在1.6%时，对白念菌、         粪肠菌和烟曲菌无抗菌作用，浓度在3.1%时抑菌作用。藤黄微球菌和生孢梭菌对竹醋液尤其敏感，藤黄微球菌的最低抑菌浓度可达0.2%,杀菌浓度为0.39%。

    3  结论

    竹醋液对13种临床上常见的致病菌有显著的抑菌和杀菌作用；竹醋液对芽孢杆菌的杀菌作用相对较弱；竹醋液新鲜蒸馏液的抑菌作用不如其原液和提取物。

    竹醋液生产原料丰富，价廉易得，属天然药物，且无毒副作用，对致病菌抑杀活性显著。以竹醋液作为抗致病菌新型天然植物药进行深入研究，具有广阔的发展前景。

【参考文献】
  1 黄健屏,林亲雄．竹醋4种分馏物的抑菌试验．中南林学院学报,1999,19（3）：82-84．

2 陈杰波,李忠琴,曾毅.竹醋液抗真菌的体外敏感性对比试验研究.福州大学学报（自然科学版）, 2005,33（4）: 542-544,552.

3 常雅宁,俞建瑛,倪 炜,等. 竹醋液对食品污染菌的抗菌作用的研究. 林产 化学与工业,2005,25（4）:83-85.

4 李忠琴,郭养浩,陈杰波, 等. 竹醋液抗致病性真菌的活性研究. 海峡药学, 2003，15（6）：49-51.

5 李忠琴,欧敏锐,许小平,等. 竹醋液抑制腐败菌的作用研究.食品科技，2003，7：79-80.

6 钱华，王衍彬，柏明娥.竹醋液体外抗皮肤癣菌活性的研究.中华实用医药杂志，2007，7（7）：584-586.

作者单位：310023 浙江杭州，浙江省林业科学研究院