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【摘要】 目的 研究转录因子Sp1在胃癌中的表达特征，并探讨其表达与胃癌临床病理因素的关系。方法 用免疫组织化学染色方法，检测86例胃癌原发灶切除标本中Sp1表达情况，观察其表达特性并研究该因子表达与患者临床病理因素的关系。结果 Sp1在胃癌组织中呈高表达，为57.0%（49/86）。Sp1蛋白表达与肿瘤浸润深度及TNM分期密切相关（P=0.001，P=0.001），而与淋巴结转移数目及Lauren分型无关（P=0.444，P=0.929）。结论 转录因子Sp1可能以通过淋巴结转移以外的其他机制，促进肿瘤浸润发展。Sp1有望成为一个协助判断预后的临床病理因素和潜在治疗靶点。
【关键词】 Sp1； 胃癌； TNM分期
Transcription factor Sp1 expression in gastric cancer and its relationship with clinicopathological parameters
XU Shou,ZHAO Hui.Department of Surgery,Gonghui Hospital,Shanghai 200041,China
【Abstract】 Objective To investigate the expression of transcription factor Sp1 in human gastric cancer tissues. Its relationship with clinicopathological parameters was evaluated simultaneously.Methods Sp1 expression patterns in 86 cases of human gastric cancer, having various clinicopathologic characteristics, was detected by immuno-histochemistry staining. The relationship between Sp1 expression and clinicopathological parameters was analysed. Results The expression rate of Sp1 in gastric cancer lesions was 57.0%（49/86）. Sp1 protein expression was closely related to the depth of tumor infiltration and TNM stage （P=0.001, P=0.001）, but had no relationship with the number of metastatic lymph nodes and Lauren's classification （P=0.444，P=0.929）.Conclusion Sp1 might be served as a potential prognostic factor and therapeutic target, by influencing the tumor infiltration and development except the lymphatic pathway.
【Key words】 Sp1;gastric carcinoma； TNM
胃癌属高发恶性肿瘤之列，全球每年新发病例数达875,000。近年来发病率虽略有下降，但好发部位渐由胃窦部移至胃底贲门部，且生物学行为更具侵袭性，总体疗效并未获明显改善。局部复发和远处转移是影响胃癌整体疗效的关键问题之一［1～3］。迄今，除TNM分期等少数临床病理学指标外，能准确判断胃癌预后的分子指标尚不多见。Sp1是最近被发现的一种转录因子，其过度表达可正向调节肿瘤增殖和转移潜能［4］。本研究用免疫组织化学方法检测胃癌组织中Sp1蛋白表达情况，并观察其表达特征及其与患者临床病理因素的关系。
1 资料与方法
1．1 标本来源 收集我院2002年3月～2006年9月手术切除胃癌患者的原发灶标本86例，其中男52例，女34例；平均年龄63.3岁。入选标准包括：经病理检查均证实为胃腺癌；术前患者均未行化、放疗；有完整的临床、病理及随访资料。临床病理分期采用UICC第5版TNM分期法［5］。
1.2 Sp1免疫组化染色 将存档的石蜡标本重新制备4μm切片行免疫组化EnVision法染色，具体操作按说明书进行。Sp1多克隆抗体购自Santa Cruz公司（Code No:SC-59），一抗工作液浓度1：300；EnVisionTM试剂盒购自Dako公司（Code No：K4003）。用已知Sp1阳性的结肠癌切片染色作为阳性对照［6］，用PBS代替一抗作为阴性对照。
1.3 STSp1染色结果判定标准 以细胞核内有棕黄色颗粒者为染色阳性，按染色强度判为弱（0分）、中等（1分）及强（2分）共3级；按照阳性细胞比例分为＜10%（0分）、10%～30%（1分）、31%～60%（2分）及60%以上（3分）共4级。总体染色强度评分值=阳性细胞比例评分×染色强度评分；≤3分者判为阴性；3～6分者为弱阳性；＞6分者为强阳性［6］。
1.4 统计学处理 Sp1蛋白表达与临床病理因素的关系采用χ2检验。采用SPSS11.0统计软件包进行分析，P＜0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 Sp1在胃癌组织中的表达与定位情况 在86例胃癌组织中，Sp1蛋白阳性表达率为57.0%（49/86）。根据总体染色强度评分值判定为弱表达和强表达者的比例分别占总病例数的11.6%（10/86）和45.3%（39/86）。在10例早期胃癌中，仅2例原发灶有Sp1弱阳性表达，阳性颗粒定位于细胞核；而在癌旁的间质细胞和正常腺细胞中，呈阴性或极微弱表达（见图1）。
2.2 Sp1表达与胃癌患者临床病理因素的关系 按组织分化程度分为高分化组（乳头状腺癌、管状腺癌及中分化腺癌）和低分化组（低分化腺癌、印戒细胞癌及黏液腺癌）。Sp1表达与组织学类型及病理分期等临床病理学参数的关系见表1。经χ2检验，Sp1表达与肿瘤浸润深度和TNM分期有关（P=0.001），而与淋巴结转移数目及Lauren分型无关（P＞0.05）。
3 讨论
Sp1是较早被发现的核转录因子之一，属序列特异性的DNA结合蛋白，可调控某些启动子中富含GC序列的基因转录。对许多具有调控肿瘤细胞生存、生长和血管生成功能的基因而言，Sp1是一个重要和必需的转录因子。各种致癌因素通过信号转导通路调控转录因子的表达，引起信号转导通路的异常活化，继而调控各种下游靶基因表达，造成细胞周期紊乱、细胞异常增殖、促进血管生成等恶性表型，最终导致恶性肿瘤的发生发展。以转录因子为基础的信号转导通路与转录因子之间、不同信号转导通路之间的相关关系研究始终是肿瘤生物学研究的热点领域。许多癌基因通过转录因子介导其转化和致瘤，活化的转录因子还可通过介导下游靶基因表达，参与肿瘤发生、侵袭和转移的各个环节［7，8］。临床上，多数胃癌患者在确诊时就已发生局部浸润和（或）远处转移，影响总体治疗效果。彻底了解转移机制有助于改善目前的治疗手段及开发新的治疗策略。表1 86例胃癌患者临床病理参数与组织中Sp1蛋白表达的关系（略）
Sp1是一种核转录因子，通过与某些基因启动子中富含GC的序列特异性结合，调节这些基因的表达；而后者又以肿瘤相关生长因子及血管生成因子等为多见，故Sp1是一类与肿瘤发生发展密切相关的核转录因子，其过度表达具有正向调节肿瘤增殖和转移潜能的作用［9，10］。影响Sp1蛋白异常表达的调控因素有很多。不同来源肿瘤的Sp1表达也不尽相同。Milanini等［11］发现因肿瘤进展造成的局部乏氧、酸中毒、自由基增多等应激状态，可激活p42/p44有丝分裂原活化蛋白激酶旁路及c-Jun 氮端激酶相关信号传导系统，导致Sp1过度表达。
本研究所测86例胃癌组织中，大多数有Sp1蛋白表达，且阳性颗粒多集中于癌细胞核内。肿瘤浸润较深、TNM分期较晚者，Sp1表达阳性率较高，提示该蛋白表达与胃癌浸润和转移密切相关；但与胃周淋巴结转移数目无明显相关，可能提示Sp1系通过淋巴结转移以外的其他途径，促进肿瘤侵袭及转移；该分子可作为协助判断胃癌患者预后的分子指标及潜在治疗靶点。
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作者单位：200041 上海，上海市公惠医院外科