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【摘要】 目的 探讨结节病（sarcoidosis，Sar）和外源性过敏性肺泡炎（extrinsic allergic alveolitis，Eaa）患者白介素-2（IL-2）、白介素-4（IL-4）与支气管肺泡灌洗液（BALF）中T淋巴细胞亚群及各种炎性细胞之间的关系。方法 分别对24例Sar患者和24例Eaa患者的外周血及BALF中的IL-2、IL-4进行了测定，同时测定所有患者BALF中的T淋巴细胞亚群及细胞分类计数。结果 Sar组BALF中巨噬细胞百分比（M%）为56.25±17.59明显高于Eaa组BALF中的M%（40.54±22.66）（P<0.01）；而Eaa组BALF中的中性粒细胞百分比（N%）和嗜酸性粒细胞百分比（E%）（6.42±10.69、1.71±1.85）均明显高于Sar组BALF中的N%和E%（1.33±1.37、0.50±0.78）（P<0.05；P<0.01）。Sar组BALF中T淋巴细胞亚群CD4/CD8值（3.725±3.150）明显高于Eaa组（1.191±0.520）（P<0.01）。Eaa组外周血中IL-4水平（71.3235±15.8548）明显高于Sar组外周血中IL-4水平（59.6692±4.8323）（P<0.01）。结论 对IL-2、IL-4的测定有可能为Sar与Eaa的发病机制提供一定依据。
【关键词】 结节病；外源性过敏性肺泡炎；支气管肺泡灌洗液；淋巴细胞亚群；白介素
结节病（以下简称Sar）和外源性过敏性肺泡炎（以下简称Eaa）是比较常见的两种间质性肺疾病（以下简称ILD）。发病机制目前仍不清楚，近来有研究表明Ｔ细胞亚群及相关的细胞因子网络在其发病机制中可能起到关键作用。但是，不同的细胞因子在这两种疾病的发病机制中所起的作用不尽相同。免疫细胞所分泌的不同细胞因子在ＩＬＤ的发病机制中所起的作用日益受到关注〖1〗。尤其是辅助性Ｔ细胞（Ｔh）中的Th1、Th2细胞因子的失衡更与这两种疾病的形成有一定关系。为探讨Th1、Th2在Sar、Eaa发病机制中的作用，笔者检测了Sar和Eaa的BALF和血清中IL－２、IL－4的水平并探讨两种细胞因子的相互关系。
1 对象与方法
1.1 研究对象 Sar、Eaa 两组病人，各24例，在检查前均未用过皮质类固醇等药物。
1.1.1 结节病组（Sar） 24例，男4例，女20例；年龄36～58岁。除结核菌素试验阴性、血清血管紧张素转换酶（sACE）增高、X线胸片符合诊断外，所有病例均经过纤维支气管镜或皮肤（淋巴结）活检病理学证实。诊断符合1994年中华医学会呼吸病学分会第三次修订的结节病诊断标准。其中Ⅰ期10例，Ⅱ期12例，Ⅲ期2例。
1.1.2 外源性过敏性肺泡炎组（Eaa） 共24例，男9例，女15例；年龄34～71岁。有明确吸入外界有机粉尘病史，临床症状具有发热、干咳或出现渐进性呼吸困难，胸部影像呈弥散性结节状阴影，如果脱离过敏原或用糖皮质激素可吸收。或已形成间质性纤维化，其诊断均符合高等医药院校统编教材Eaa诊断标准。
1.2 方法
1.2.1 BALF及血清标本的采集和处理 具体方法参见文献〖2〗。同步采静脉血，室温放置1～2h， 离心分离血清,置于-70℃保存待测。
1.2.2 BALF中淋巴细胞亚群分类测定 方法参见文献〖2〗。
1.2.3 BALF和血清中IL-2、IL-4的测定 双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞因子,IL-4、IL-2检测试剂盒均购自上海吉泰公司，所有操作均按试剂盒内所附说明书进行。
1.2.4 统计学处理 各组数据均以〖x〗±s表示，应用SPSS软件进行统计学分析。各组之间比较采用t检验和直线相关分析。P<0.05为差异有非常显著性，P<0.01差异有显著性。
2 结果
2.1 Sar组及Eaa组BALF中细胞总数和分类 见表1。
2.2 Sar组及Eaa组BALF中T淋巴细胞亚群分类 见表2。
2.3 Sar组及Eaa组外周血和BALF中IL-2、IL-4水平 见表3。
2.4 IL-2、IL-4水平与BALF中细胞计数和淋巴细胞亚群之间的相关分析 Sar组外周血IL-2水平与BALF中的N%呈正相关（r=0.560，P<0.01）。Eaa组BALF中IL-4与M%呈正相关（r=0.480，P<0.05）。表1 SAR组及EAA组BALF中细胞总数和分类 注：M：巨噬细胞；N：中性粒细胞；L：淋巴细胞；E：嗜酸细胞。*P<0.05;**P<0.01表2 SAR组及EAA组BALF中T淋巴细胞亚群分类表3 SAR组及EAA组外周血及BALF中IL-2、IL-4水平注：*P<0.05;**P<0.01
3 讨论
Sar是以巨噬细胞和淋巴细胞（主要是T淋巴细胞）为特征的肉芽肿性疾病〖3〗。本实验结果显示Sar组BALF中的M%明显高于Eaa组，这说明结节病的发病机制可能是首先激活肺泡内巨噬细胞（AM），被激活的AM释放白介素等细胞因子，趋化和激活淋巴细胞，启动一系列的细胞和体液免疫异常〖4〗。本实验显示Eaa组BALF中的N%及E%均明显高于Sar组。说明在Eaa组，中性粒细胞与嗜酸性粒细胞均参与了肺损伤和纤维化过程，N%与E%的明显增高也许与抗原暴露强度及支气管肺泡灌洗检查（BAL）的时间不同有关〖5〗。本例研究显示Sar组BALF中CD4+明显增加，CD8+明显减少，而Eaa组CD8+较Sar组明显增高。其变化与Sar表现决然不同。Eaa患者CD4/CD8比值下降说明局部肺组织自身免疫功能较Sar组减弱〖6〗。Eaa患者炎症基因表达增加〖7〗，而Sar患者成纤维细胞功能相关基因表达增加，故二者致肺纤维化机制不同〖8〗。目前认为Eaa最初由Ⅲ型变态反应介导，而后转向Ⅳ型超敏反应为主〖9〗。免疫复合物介导的炎症反应产生急性肺损伤，故BALF中淋巴细胞明显增多〖10〗。T淋巴细胞中的辅助性T细胞（Th）又分为1型和2型（Th1、Th2）。Th1与Th2以相互拮抗和促进的方式调节机体正常的免疫应答。Th1分泌IL-2等细胞因子，Th2分泌IL-4等细胞因子。本实验显示Eaa组外周血中IL-4浓度明显高于Sar组，说明Eaa患者较Sar患者能表现出较强的Th2型免疫。Sar组外周血IL-2水平与BALF中的N%呈正相关，提示IL-2可能通过刺激中性粒细胞参与Sar的发病过程。 Eaa组BALF中IL-4与M%呈正相关，提示IL-4可能通过促进单核细胞分化为（AM），并以自分泌的形式作用于AM，活化AM并促其增殖和分泌更多的细胞因子，造成Eaa的肺泡炎改变。Sar组与Eaa组BALF中IL-2、IL-4无明显差异性，可能是因为两组患者在行支气管肺泡灌洗时,均处于明显的急性肺泡炎阶段，至于具体原因，还有待于进一步研究。
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（编辑：齐 永）
作者单位：110001 辽宁沈阳，中国医科大学第一临床学院呼吸疾病研究所