点击显示 收起
麻疹是儿童期常见的一种急性呼吸道传染病，目前全球每年约发现4500万麻疹发病病例。从全球来看，麻疹是引起儿童死亡的第一位原因［1］。1996年7月世界卫生组织、泛美卫生组织和美国CDC联合召开会议，研讨消除麻疹的问题，可望在2005～2010年全球消灭麻疹。因此，在控制和消灭麻疹的过程中，对麻疹病例开展准确、及时的疾病检测是必要的。酶联免疫吸附实验（ELISA）一步法检测麻疹IgM具有灵敏度高、特异性强等优点而被广泛应用。本文就我们实际操作中的影响因素加以分析。
1 试剂盒的选择
随着科技在各个领域的飞速发展，麻疹病毒的检测方法也在不断地更新，酶联免疫吸附法作为检验麻疹的重要诊断方法，目前已被广泛应用。近年来，各生产厂商纷纷将步骤繁琐、延时长的分步法简化为一步法，并生产出相应的试剂盒。但在实际操作中会出现一些问题：(1)假阳性的出现；(2)复检与初检结果不一致；(3)假阴性的产生导致的漏检。这些问题的出现会导致严重后果。这些情况是如何出现的呢?笔者认为除了要提高操作技术水平外，有必要对常用试剂的性能进行比较考察，从而选择灵敏度和特异性相对较高的试剂盒。
2 样品的处理
(1)样品应尽量低温保存，防止污染。(2)应避免样本溶血。溶血标本易使麻疹IgM抗体产生假阳性结果，可能是因为溶血标本有过氧化物酶活性，与辣根过氧化物酶作用相似，能与聚乙烯孔内预包被的抗体结合，由于难于完全洗脱，残留过氧化物催化底物显色，产生假阳性。(3)ELISA法虽有灵敏度高的优点，但是对有些滴度较高的带病毒的血清，由于后带现象而呈阴性，应在检验中加以稀释［2］。
3 加样
应将液体及标本加在孔底，不外溅，避免加在孔壁上部，以免影响结果的准确性。加样头要一次性使用，禁止在未充分洗净或消毒不完全时使用，以免交叉感染而使结果不准确。
4 温育
酶联免疫法加入酶标物37℃温育30min对测定结果有影响，呈花板想象，易产生弱阳性造成误检。加入酶标物37℃温育60min，温育时间长，残留的过氧化物酶含量极微，再经洗涤降低了残留的可能性，能保证结果的准确性。加入酶标物37℃温育60min虽然费时，但与37℃温育30min相比，灵敏度更高，特异性更强，能保证结果的准确性［3］。因此，在实际操作中采用37℃温育60min。
5 显色
按顺序加入“A”液和“B”液后，放入37℃水浴，加盖避光反应30min，加终止液观察结果。
6 结果的观察
肉眼观察阳性结果呈蓝色，但弱阳性结果不易观察。应使用多功能酶标仪检测，以保证结果判断的正确性。
ELISA方法虽然简单易行，但易受以上诸多因素影响，因此我们应结合病毒分离培养、PCR检测等多种方法结合判断，以使结果有更高的可信性。
【参考文献】
1 David Featherstone.麻疹：全球概述.中国计划免疫，2002，8(2)：107-110.
2 李梅，刘玲，戴风焱，等.ELISA法检测HBsAg后带现象探讨.中 国卫生检验杂志，2000，10(5)：605.
3 高菊华，高海英.不同温育时间的酶联免疫对HBsAg结果的影响.中国卫生检验杂志，2000，10(5)：606.
作者单位： 518020 广东深圳，深圳市罗湖区疾病预防控制中心
(编辑：含 秋 )