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【摘要】 目的 探讨妊娠期糖尿病患者血浆对体外培养的内皮细胞合成血管活性物质影响与妊高征发病的关系。 方法 应用放射免疫法测定12例妊娠期糖尿病、15例正常妊娠妇女及18例正常非妊娠妇女血浆中血浆前列腺素（PGI 2 ）代谢产物6-keto-PGF 1α 、血栓素（TXA 2 ）代谢产物TXB 2 的水平。在体外培养的牛肺动脉内皮细胞中分别加入妊娠期糖尿病、正常妊娠妇女及正常非妊娠妇女的血浆，测定24h后内皮细胞释放的6-keto-PGF 1α 和TXA 2 水平。 结果 妊娠期糖尿病妇女与正常妊娠妇女和正常非妊娠妇女相比血浆6-keto-PGF 1α 水平显著降低（P<0.01），TXB 2 水平显著升高（P<0.01）。加入妊娠期糖尿病妇女血浆的内皮细胞释放的6-keto-PGF 1α 与加入正常晚期妊娠妇女和正常非妊娠妇女血浆的内皮细胞释放的6-keto-PGF 1α 相比，差异有非常显著性（P<0.01）。 结论 妊娠期糖尿病患者的血浆中存在某些能刺激体外培养的内皮细胞合成PGI 2 ，PGI 2 和TXA 2 平衡失调可能是导致妊高征的原因之一。
关键词 妊娠期糖尿病 妊娠高血压综合征 内皮
The effects of plasma from women with gestational diabetes on endothelial cells activators in vitro
Zheng Lei，Li Pu，Wan Weihong
Qiannan Medical College National Minorities，Duyun558003.
【Abstract】 Objective To study the effect of plasma from with gestational diabetes on endothelial cell activa-tors in vitro and to investigate its relationship with pregnancy induced hypertension.Methods Twelve women with gestational diabetes and15normal pregnant and18normal non-pregnant women.Plasma6-keto-PGF 1α ，the end products of prostacyclin（PGI 2 ）and TXB 2 ，the end products of thromboxane A 2 （TXA 2 ），were measured by radioim-munoassy.Plasma from women with gestational diabetes or from normal pregnant and normal nonpregnant was added to the bovin pulmonary microvessel PGF 12 produced by cultured endothelial cell were measured.Results The level of6-keto-PGF 1α in gestational diabetes was significantly decreased than that in the pregnant and non pregnant women but the level of TXB 2 was significantly higer in gestational diabestes.（P<0.01）.The values of6-keto-PGF 1α pro-duced by cultured endothelial cell exposed to plasma in gestation diabetes was significantly higher than pregnant and non-pregnant women.Conclusion PGI 2 and TXA 2 may play an important role in gestational diabetes.Plasma from women with gestational diabetes could stimulate the production of prostacyclin in cultured endothelial cell in vitro.The change of PGI 2 and TXA 2 might be one of the possible factor in pregnancy induced hypertension.
Key words gestational diabetes pregnancy induced hypertension endothelium
妊娠期糖尿病可以增加围产期发病率及围产儿死亡率，其发病占孕产妇的1%～5% ［1］ ，妊娠期糖尿病并发妊高征严重危害母婴健康，其病理学特征是血管反应性增加，这些都与内皮细胞功能有关，本研究是在体外培养的牛肺动脉内皮细胞中加入妊娠期糖尿病患者或正常妊娠妇女、正常非妊娠妇女的血浆，共同孵育24h，测定内皮细胞释放的前列腺素（PGI 2 ）和血栓素（TXA 2 ）的水平，判断妊娠期糖尿病患者血浆中是否存在某些影响内皮细胞合成的血管活性物质。
1 资料与方法
1.1 一般资料 妊娠期糖尿病组:收集2002年6月～2004年8月到我校附院、黔南州妇幼保健院及第二人民医院产前检查的妊娠期糖尿病患者12例，平均年龄（31.0±1.8）岁，妊娠期糖尿病的诊断按文献标准进行 ［2］ ，以上病例均无高血压、心脏疾病，肾、肝、肺疾病史。正常非妊娠组:18例，为黔南民族医学高等专科学校健康女大学生自愿者，平均年龄（20.6±1.8）岁。正常妊娠组:15例，为随机选取我校附院及黔南州第二人民医院产前检查的妊娠妇女，平均年龄（25.9±1.3）岁。
1.2 实验方法
1.2.1 标本采集 受试者均于入院后抽取静脉血5ml放于硅化抗凝管中，于4℃下3500r/min离心15min。分离血浆，置-20℃冻存。
1.2.2 内皮细胞培养 原代牛肺动脉内皮细胞由遵义医学院细胞工程实验室提供，按照Davidge ［3］ 方法进行传代培养，传代6代后用于实验研究。在加入血浆前使细胞在无血清培养液中培养24h，将细胞用0.05%及0.5mmol/L依地酸钠消化分散后，置24孔板（每孔含细胞数约为1×10 5 个）生长为单层后，随机分组，分别加入妊娠期糖尿病组，正常晚期妊娠组，正常非妊娠组患者肝素化血浆共同孵育24h，收集培养液待测。
1.2.3 试剂 TXB 2 和6-keto-PGF 1α 试剂由中国原子能研究所提供，采用放射免疫法测定。
1.2.4 统计学方法 数据以ˉx±s表示，采用t检验进行分析。
2 结果
2.1 三组TXB 2 、6-keto-PGF 1α 水平比较 妊娠期糖尿病组血浆TXB 2 水平显著高于正常妊娠组和正常非妊娠组（P<0.01），6-keto-PGF 1α 水平显著低于正常妊娠组和正常非妊娠组（P<0.01），TXB 2 /6-keto-PGF 1α 比值差异也存在非常显著性（P<0.01）;正常妊娠组和正常非妊娠组之间差异无显著性（P>0.05），见表1。
表1 三组TXB 2 、6-keto-PGF1 α 的检测结果比较 （略）
注:妊娠期糖尿病组与正常妊娠组、正常非妊娠组相比， * P<0.01
2.2 加入三组血浆的内皮细胞培养液中6-keto-PGF 1α 水平比较 在体外培养的内皮细胞中分别加入三组血浆后培养24h，测定内皮细胞释放的6-keto-PGF 1α 水平，妊娠期糖尿病组为（1632.1±136.21）ng/L正常妊娠组为（913.27±121.4）ng/L，正常非妊娠组（893.16±198.4）ng/L，妊娠期糖尿病组与正常妊娠组和正常非妊娠组相比差异有非常显著性（P<0.01），而正常妊娠组和正常非妊娠组相比差异无显著性（P>0.05）。
3 讨论
PGI 2 是由血管内皮细胞合成的，TXA 2 主要是由血小板微粒合成，两者的合成底物为花生四烯酸，花生四烯酸在环加氧酶的催化作用下生成前列腺素过氧化物，前列腺素过氧化物在前列腺素合成酶（在动脉壁内层）和血栓素合成酶（在血小板中）的催化作用下生成PGI 2 和TXA 2 ，PGI 2 的降解产物为6-keto-PGF 1α ，TXA 2 的降解产物为TXB 2 ，在正常生理状态下血浆组织中TXA 2 和PGI 2 处于相对平衡状态。本研究表明，妊娠期糖尿病患者血浆中PGI 2 水平明显低于正常妊娠组和正常非妊娠组，而TXA 2 水平明显高于正常妊娠组和正常非妊娠组，两者的比值差异也存在显著性，提示妊娠期糖尿病患者存在TXA 2 和PGI 2 平衡失调。PGI 2 与TXA 2 平衡失调导致患者发生广泛的血管痉挛及血小板聚集倾向，妊娠期糖尿病患者PGI 2 合成减少的原因可能与前列腺素合成酶的缺乏或合成前体缺乏有关，也可能与血液中抑制前列腺素合成物质的活性增加有关，其PGI 2 与TXA 2 的含量与妊娠期糖尿病患者并发妊高征可能有一定的关系。本研究发现妊娠期糖尿病患者PGI 2 的水平低于正常妊娠妇女和正常非妊娠妇女，原因可能为妊娠期糖尿病患者的血浆中PGI 2 减少，通过正反馈机制，促进内皮细胞合成PGI 2 减少产生应答，这些因子可能是在局部或远处产生反馈调节因子。研究还发现，妊娠期糖尿病的血浆在24h内能引起体外培养的牛肺动脉内皮细胞合成PGI 2 增加，可能与反馈调节有关，妊娠期糖尿病患者血浆脂蛋白、糖化、脂质过氧化物能激活环氧化酶，使PGI 2 合成增多。Wang等［4］ 研究妊娠期糖尿病患者前列腺素PGI 2 、TXA 2 以及抗氧化剂VitE与脂质过氧化物的比值变化。发现PGI 2 与TXA 2 及VitE与脂质过氧化物的平衡破坏在妊高征发病中有一定作用。本文研究表明妊娠期糖尿病患者血浆PGI 2 和TXA 2 的平衡失调可能与并发妊高征有一定的关系，其机制还需进一步研究。
参考文献
1 Mulford MI，Jovanovic-peterson L，Peterson CM.Alternative therapies for the management of gestational diabetes.Clin Perinatol，1993，20:619-634.
2 郑怀美，苏应宽.妇产科学，第3版，北京:人民卫生出版社，171-175.
3 Davidge ST，Signorella AP，Hubel CA，et al.Distinct factors in plasma of preeclamptic women increase endothelial nitric oxide or prostacyclin.Hypertension，1996，28:758-764.
4 Wang YP，Walsh SW，Guo JD，et al.The imbalance between thrombox-ane and prostacyclin in preeclampsia is associated with an imbalance be-tween lipid peroxides and vitamine E in maternal blood.Am J Obstet Gy-necol，1991，165:1695-1700.
（编辑晓 青）
作者单位:558003贵州都匀贵州省黔南民族医学高等专科学校
563000贵州遵义医学院细胞工程室