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首页资料库在线期刊中华现代内科学杂志2005年第2卷第5期

超薄切片“舟”上染色法探讨

来源:中华现代内科学杂志
摘要:当前超薄切片染色普遍采用的方法是蜡盘滴染法,即将染液滴在蜡染色盘上,载有切片的铜(镍)网面朝染液覆盖在染滴上。在实际工作中,笔者试用封口膜制成一次性染色“舟”,染色在“舟”上进行。揭掉蜡纸,一个承载染液用的染色“舟”便做好。取A、B铀染色蜡盘2个,A、B铅染色蜡盘2个,A蜡盘内分别平置1号、3号两个染色“......

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  当前超薄切片染色普遍采用的方法是蜡盘滴染法,即将染液滴在蜡染色盘上,载有切片的铜(镍)网面朝染液覆盖在染滴上。这种方法因蜡盘要反复使用,所以每染1次就要进行彻底清洗,且载网密切接触空气,操作费时窝工、污染概率高、工作效率低。在实际工作中,笔者试用封口膜制成一次性染色“舟”,染色在“舟”上进行。通过多年上千例电镜样品观察,其结果表明,此法简单易行、省时节水、污染概率低、工作效率高,现总结报告如下。

  1 材料与方法
    
  裁长5.5cm,宽5.0cm的封口膜8张。取其中之一沿四边叠一下,向上折起,形成一个带小窄边的长方盒。用吸管粗头那一端在覆盖着蜡纸的封口膜上移动着压几下,使膜上留下6个圆的印痕。揭掉蜡纸,一个承载染液用的染色“舟”便做好。以此类推,做好余下若干张。
   
  取A、B铀染色蜡盘2个,A、B铅染色蜡盘2个,A蜡盘内分别平置1号、3号两个染色“舟”。B蜡盘内同样分别平置2号、4号两个染色“舟”。做好其他准备工作后,染色开始,先做铀染色。吸醋酸铀染液适量,滴在A铀盘1号染色“舟”圆痕内,形成一个个染滴,数量≤6个。镊子持载有切片的铜(镍)网分别送入各染滴内,沉底。1个染滴染2张网,一批最多不>12张。染色时间一般25min。在1号染色“舟”染色结束前3min,B铀盘2号染色“舟”内备好染滴,同样依次投入第2批载网于染滴内沉底并计时。2号“舟”染色时,用新鲜双蒸水清洗1号染色“舟”内第1批网。在2号“舟”染色结束前3min,A铀盘3号染色“舟”内备好染滴,依次投入第3批载网并计时。3号“舟”染色时,用双蒸水清洗2号染色“舟”内第2批载网。在3号“舟”染色结束前3min,B铀盘4号染色“舟”内备好染滴,依次投入第4批载网并计时。4号“舟”染色时,用双蒸水清洗3号染色“舟”内第3批载网。最后双蒸水清洗4号染色“舟”第4批载网结束铀染实验。铅染色方法亦同,可将操作集中,上午做4批铀染,下午做4批铅染。全天能完成48张载网铀铅染色。操作程序(见图1)。
 
  图1  超薄切片“舟”上染色操作程序示意图(略)
    
  2 结果与讨论
    
  (1)本方法染色从始至终都在染色“舟”上进行,免去了反复清洁蜡盘的工序,节约了用水;(2)整个过程载网始终包封在染滴内,隔绝了空气,缩短了外界暴露时间;这尤其对铅染色至关重要,减少了铅离子与空气中二氧化碳的结合机会,从而在这一环节上减少了污染的发生;(3)染片、洗片穿插进行,工作衔接紧、效率高,节省了时间,是可推广应用的一种便捷方法。
    
  (编辑若 月)

  作者单位:100029北京中医药大学电镜室

作者: 葛桂玲 2005-10-6
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