风湿病患者α-胞衬蛋白抗体检测意义（附256例分析）

　　［摘要］  目的  研究两种α-胞衬蛋白（αfodrin）抗体在原发性干燥综合征（pSS）等风湿病中的意义。方法  选择2004年2月～2005年5月苏州大学附属第一医院风湿免疫科门诊和住院患者256例，其中包括pSS 30例、类风湿关节炎（RA）53例、系统性红斑狼疮（SLE）36例，其他风湿病137例。以酶联免疫吸附法（ELISA）测定其血清αfodrin抗体IgG、IgA型，以免疫印迹法测定其抗SSA、SSB抗体。结果  pSS组、RA组、SLE组IgG型αfodrin抗体测定值分别为（10.87±7.44）u/ml、（8.21±4.02）u/ml、（6.70±1.50）u/ml；IgA型αfodrin抗体测定值分别为（12.72±15.52）u/ml、（6.60±2.36）u/ml、（6.55±1.73）u/ml；αfodrin抗体IgG、IgA型诊断pSS的敏感性分别为36.7%、33.3%；特异性分别为87.6%、92.1%。结论  本研究检测的αfodrin抗体IgA型诊断pSS的特异性较高，与抗SSA、SSB联合检测，可以提高pSS的诊断水平，但其敏感性较低，可能与检测方法和试剂有关。
   
　　［关键词］  α-胞衬蛋白抗体；干燥综合征；风湿病
   
　　近年来，α-胞衬蛋白（αfodrin）抗体与原发性干燥综合征（pSS）的关系备受瞩目，但是其在pSS中的诊断价值以及在各种风湿病尤其是弥漫性结缔组织病中的意义国内外评价尚不一致。为此我们对2004年2月～2005年5月在苏州大学附属第一医院风湿免疫科门诊和住院的风湿病患者256例进行了αfodrin抗体的检测，并与抗SSA、SSB抗体对照分析，现报告如下。

　　1  资料与方法

　　1.1  一般资料  本组256例患者，男66例，女190例；年龄最小9岁，最大85岁，平均（44±15）岁。其中pSS 30例，类风湿关节炎（RA）53例，系统性红斑狼疮（SLE）36例，其他风湿病137例。

　　1.2  研究方法  试剂来源于德国BL公司，应用人类αfodrin抗原，采用ELISA法分别测定患者血清中IgG型和IgA型抗αfodrin抗体。患者血清标本用样本稀释液1∶100（10μl∶1000μl）稀释，取100μl加样于包被αfodrin抗原的96孔板上，每板同时设空白对照、阳性对照（IgG型或IgA型抗αfodrin抗体）、阴性对照、标准品（0u/ml、6.3u/ml、12.5u/ml、25u/ml、50u/ml、100u/ml），在室温（18℃～28℃）孵育30min，洗板3次后每孔加入100μl辣根过氧化物标记的二抗（antihIgGIgG或antihIgAIgG），室温下孵育15min，洗板3次后每孔加入100μl四甲联苯胺（TMB）底物，室温下孵育15min，每孔加入100μl终止液，5min后在Wellscan MK3酶标仪直接测定标本在450nm处IgG型或IgA型抗αfodrin抗体的数值。若IgG型或IgA型抗αfodrin抗体的测定值＞10u/ml时定为阳性。

　　1.3  统计学方法  计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，两样本均数之间的比较采用t检验。两样本率的比较采用χ2检验。

　　2  结果

　　不同组别的αfodrin测定值见表1，不同组别的αfodrin阳性率见表2，30例pSS患者的αfodrin、SSA、SSB抗体敏感性和特异性见表3。

　　表1  不同组别的αfodrin测定值比较  （略）

　　注：与pSS组相比，*P=0.0016，△P=0.0209，★P=0.0363，▲P=0.0060

　　表2  不同组别的αfodrin阳性率比较（略）

　　注：与pSS相比，*P＜0.005，△P＞0.05

　　表3  30例pSS患者的αfodrin、SSA、SSB抗体敏感性和特异性（略）

　　3  讨论

　　αfodrin是120kD与细胞骨架相关的细胞内蛋白，为fodrin的裂解产物，是一种器官特异性抗原，与细胞凋亡过程及形成包膜的凋亡小体有关。pSS患者血清可与纯化的αfodrin抗原起反应，故被认为是pSS患者涎腺组织中的特异性组织抗原。抗αfodrin抗体也被认为与pSS的发病密切相关。在少数SLE、RA患者也会出现αfodrin抗体滴度增高，但本研究结果显示，各组间以pSS组αfodrin抗体滴度最高。

　　本研究分别检测了IgG、IgA型抗αfodrin抗体，发现IgA型αfodrin抗体对于pSS有更高的特异性。由于IgA抗体是黏膜中主要的抗体，干燥综合征是外分泌腺慢性炎性细胞浸润性疾病，常出现口、眼、鼻症状，因为这些器官的黏膜较丰富。因此笔者认为检测IgA型αfodrin抗体比检测IgG型αfodrin抗体对pSS更有意义。

　　国内外对抗αfodrin抗体在pSS患者的敏感性和特异性报道相差很大［1，2］。从特异性98%、敏感性73%，到特异性79.4%、敏感性51.5%，αfodrin抗体在pSS检出的阳性率从100%到29%。αfodrin抗原来源最初从pSS模型-NFS/sld小鼠唇腺获得，继而固相法人工合成、重组人类抗原等，检测方法有酶联免疫吸附、免疫印迹法等。笔者认为不同的抗原来源和检测方法是检出率以及特异性敏感性相差较大的主要原因。今后应着眼于比较并筛选高纯度抗原以及寻找合适的检测方法。

　　［参考文献］

　　1  Maeno N, Takei S, Imanaka H, et al. Antiαfodrin antibodies in Sjogrens syndrome in children. J Rheumatol,2001,28:363-365.

　　2  何菁，李晶，栗占国，等.抗α-胞衬蛋白多肽抗体在干燥综合征诊断中的意义.中华风湿病学杂志，2003，7（10）：600-602.

　　（编辑：萧  凝）

　　作者单位： 215006 江苏苏州，苏州大学附属第一医院风湿科