点击显示 收起
［摘要］ 目的 为了解国产纯化狂犬疫苗接种后的免疫效果，探讨其影响免疫效果的有关因数。
方法 以接种5～9针疫苗的受伤者为研究对象，每位对象取静脉血3 ml分离血清按1∶10稀释，应用ELISA法进行抗-RA检测。
结果 国产纯化狂犬疫苗全程免疫后（5针次）抗-RA阳转率为99.20%，其中男性阳转率为99.16%，女性阳转率为99.24%，9针次后，阳转率为100%。
结论 纯化狂犬疫苗全程免疫后（5针次）抗-RA阳转率为99.20%，未注射狂犬疫苗的正常人血清65例抗-RA全部阴性，提示正常人在未注射狂犬疫苗的情况下，无隐性感染存在。
［关键词］ 狂犬病疫苗；免疫；抗体
狂犬病是一种由狂犬病毒（rabies virus）引起的人兽共患传染病，人被疯动物或疑似疯动物致伤后，有发生狂犬病的危险，而狂犬病的病死率几乎为100%。目前预防狂犬病的唯一有效的措施是接种狂犬疫苗［1］，为了解疫苗接种后的免疫效果，探讨其影响免疫效果的有关因素，对防治本病提供实验依据，笔者对2001年9月～2006年6月的2137例来我中心预防接种门诊接种狂犬疫苗的对象，进行了免疫效果观察,现报告如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象 选择2001年9月～2006年6月的2137例被狗、猫、鼠等动物咬（抓）伤,年龄2～75岁,接种狂犬疫苗者为主要对象。
1.2 伤口处理及接种程序
1.2.1 伤口处理 按常规冲洗伤口后并进行消毒处理。重者（含头面部及多处深度致伤），在上述处理的基础上，同时使用人狂犬病免疫球蛋白按总量的1/2做皮下浸润注射，余下1/2进行肌肉注射（剂量按20 IU/kg）或注射抗狂犬病毒血清（剂量按40 IU/kg）。
1.2.2 疫苗接种程序 自2001年国家禁止使用普通狂犬疫苗，改用纯化狂犬疫苗（地鼠肾细胞、人体二倍体细胞疫苗Vero），由长春、武汉生物制品研究所产。冰箱2 ℃～8 ℃保存，有效期内使用。接种程序：致轻伤者，按0、3、7、14、28天各1针次，共5针次，重者按9针7次（0、3天，各1次2针后，按7、14、28天各1针次），7针5次注射完成后第15天、75天加强2针次。
1.2.3 采血对象 第5针或第9针免疫后15天，抽取静脉血3 ml，置于试管内，常规分离血清，并及时检测余下血清置-20 ℃备用，同时取65份未注射狂犬疫苗的正常人血清，置-20 ℃保存，做对照检测备用。
1.3 试剂 狂犬抗体检测试剂盒（武汉生物制品研究所生产，ELISA法）由湖北省疾控中心提供。此试剂均在有效期内。
1.4 方法 （1）每孔加样品稀释液100 ml，颜色为黄绿色，加待检样本10 μl后（1∶10稀释）颜色变为蓝紫色，每次实验需设阳性对照2孔，阴性对照2孔，阳性对照及阴性对照均已稀释，实验时可直接按量加入各孔，空白对照1孔（不加样品稀释液）置37 ℃ 30 min。（2）用蒸馏水将浓缩洗涤液做20倍稀释备用。（3）倾去孔内液体，将稀释好的洗涤液加满每孔倾去、甩干，共洗涤5次、拍干。（4）每孔加酶结合物100 μl，空白对照孔除外，置37 ℃ 30 min。（5）洗涤5次［同上（3）］。（6）每孔加入底物液A、B各1滴，震荡使之充分混匀，置37 ℃ 10 min，15 min内观察结果。
1.5 结果判定标准 肉眼观察是蓝色程度达到或超过阳性参考孔均值者为阳性，说明待检样品的抗体>0.5 IU/ml，达到免疫水平，显色低于阳性参考孔者判为阴性，应考虑加强免疫。
2 结果
2.1 抗-RA阳转率 2137例接种者在全程接种纯化狂犬疫苗后,抗-RA阳性2120例，阳转率99.20%, 65份未注射狂犬疫苗的正常人血清全部为阴性。其中男1092例，阳性1083例，阳转率99.18%。女1045例，阳性1037例，阳转率99.23%。经统计学分析（χ2=0.02,P＞0.05）差异无显著性。
2.2 不同年龄抗-RA阳转率 结果见表1。表1 不同年龄抗-RA阳转情况注：χ2=11.11，P＜0.05
3 讨论
由于人因被病兽咬伤而感染狂犬病毒。一旦发病，病死率100％。因此被犬等动物咬伤者应尽早接种狂犬病疫苗。狂犬疫苗接种后,血清中出现抗-RA，说明免疫成功。本次观察的2137例被犬等动物咬伤者中，只要尽早按照免疫程序及时注射人用国产纯化狂犬疫苗5针，其抗-RA阳转率达99.20%。明显高于有关资料报道的阳转率95.6％［2］、91.67％［3］。
从结果分析中发现，注射狂犬疫苗后，男女间阳转率比较差异无显著性。由此说明男女间机体对狂犬病疫苗敏感性相近，使用剂量可不以性别而异。笔者还对65份未注射狂犬疫苗的正常人血清做了抗－RA检测全部为阴性。说明正常人群在无病毒暴露的情况下，无隐形感染存在［4］。从表1可以看出，各年龄组间的抗-RA阳转率有一定的差异（χ2=11.11,P＜0.05）,这结果与随年龄增大、免疫功能逐渐下降的规律基本符合。
追踪发现，有17例抗-RA阴性的患者均在加强3针后（疫苗注射总量为8支，即5针次后的第15、45、75天），才出现抗-RA阳性。其阳转率达100％，由此说明国产纯化狂犬疫苗对人体有极好的保护作用。以上17例对免疫应答迟缓的原因可能与免疫者的个体差异及免疫功能差异所致（本文中2137例患者均在本门诊注射疫苗）。对于免疫应答迟缓的人群如何使之更快产生抗-RA是值得深入研究的问题。
［参考文献］
1 贾芙蓉，芦天林，杜双兰，等.狂犬病疫苗的血清学效果观察.中国人兽共患病杂志,1989,5（6）：41-42.
2 王兆芳，秦阿敏，叶立新,等.接种狂犬疫苗后抗体阳转情况调查分析.疾病监测杂志,2001，16（8）:305.
3 胡锦流，孙辉，武道珍,等.精制狂犬疫苗与浓缩狂犬疫苗效果与安全性配比分析. 疾病监测杂志,2002，17（11）：434-435.
4 文洁，任雅萍，周学良,等.ELISA用于人血清抗狂犬病毒抗体检测.中国人兽共患杂志,1989,5（6）：7-9
.
作者单位： 437100 湖北咸宁，咸宁市疾病预防控制中心
（编辑：吴 莹）