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1 材料与方法
1.1 实验试剂 生大黄粗粉、大黄标准品、1，8-二羟基蒽醌、乙醚、石油醚、正己烷、乙酸乙酯、甲酸、甲醇，5%NaOH-2%NH 4 OH混合液、苯。
1.2 实验仪器 滤纸，硅胶G-CMC板，扭力天平，分析天平，分液漏斗721分光光度计，层析纸50ml量杯，50ml，100ml的容量瓶，漏斗，分液漏斗，10ml具塞的刻度试管，1ml，5ml，10ml刻度吸管，25μl微量进样器，50ml烧杯、保温杯。
1.3 实验方法 （1）取生大黄粗粉10g，用沸水搅拌后浸泡30min，将液体滤至50ml容量瓶中，加水至50ml即得。（2）取生大黄粗粉10g，放置保温杯中加沸水搅拌，浸泡30min后滤至50ml容量瓶中，加水至50ml即得。（3）取生大黄粗粉10g，用沸水搅拌，浸泡15min后滤至50ml容量瓶中，加水至50ml即得。（4）取生大黄粗粉10g，加水煎煮15min后，将液体滤至50ml容量瓶中，放置至室温加水至50ml即得。（5）取生大黄粗粉10g，加水煎煮30min后将液体滤至50ml容量瓶中，放置至室温加水至50ml即得。
1.4 薄层层析法
1.4.1 标准品溶液制备 取0.1g大黄标准品，加70%乙醇2ml浸渍1h，并不时振摇，取上清液即为标准品溶液。
1.4.2 展开剂 石油醚—正己烷—乙酸乙酯—甲酸（1∶3∶1.5∶0.1）;（2）苯—乙酸乙酯—甲酸—甲醇（3∶1∶0.5∶0.2）。1.4.3 取2块已活化的硅胶C-CMC板，并分别点上标准溶液及上述5种供试液。一板用（1）展开剂，另一板用（2）展开剂，置层析缸中展开，取出，晾干。
1.4.4 显色 将晾干的薄层板置365nm紫外灯下观察斑点，结果供试液所显示斑点均与标准品溶液所显示的斑点一致，即在相同位置有4个斑点。
2 含量测定
2.1 标准曲线的制备 ［2］ 精密称取105℃干燥至恒重1，8-二羟基蒽酯标准品100mg，置50ml容量瓶中，用乙醚溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取10ml置100ml容量瓶中，加乙醚至刻度（20μg/ml），精密吸取上述标准液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml分别置于干燥带塞刻度试管中，水浴蒸干乙醚，各加5%NaOH—2%NH 4 OH混合液8ml，摇匀，放置30min，用721型分光光度计于490nm处测得吸收度，并以5%NaOH—2%NH 4 OH混合液空白对照。
上述数据经线性回归其回归方程
A=0.005793+0.005773X r=0.9999（P<0.01）
2.2 样品液的含量测定
2.2.1 游离蒽醌的含量测定 精密吸取上述各样品液1 ml、分别置分液漏斗中各加水5ml，用经水饱和的乙醚10ml一次性萃取，取乙醚液用5%NaOH—2%NH 4 OH混合液（经乙醚饱和）萃取2次（为5ml，3ml），将萃取液分别置10ml刻度试管中，于沸水浴中加热4min，用流水冷却至室温，补加2%NH 4 OH至10ml，摇匀，放置30min，以5%NaOH—2%NH 4 OH为空白对照于490nm处测定吸收度，将测定结果代入回归方程，计算含量，见表1～5。
2.2.2 总蒽醌的含量测定 精密吸取上述各样品液1ml置10ml具塞刻度试管中，加40%FeCl 3 ·6H 2 O溶液1ml及水2ml，于沸水浴中加热20min，再加入盐酸0.4ml，再于沸水浴加热30min并不断振摇，用流水冷却后，倾入分液漏斗中，后用5ml水分次洗涤试管，合并置分液漏斗中后用经水饱和的乙醚10ml一次性萃取，取乙醚液用5%NaOH～2%NH 4 OH混合液萃取2次（为5ml，3ml）。同上游离蒽醌含量测定操作，并计算含量，见表1～5。
表1 沸水浸泡30min的含量 （略）
表2 沸水浸泡15min的含量 （略）
表3 保温杯浸泡30min的含量 （略）
表4 水煎煮15min的含量 （略）
表5 水煎煮30min的含量 （略）
2.2.3 结合蒽醌的含量 将测得总蒽醌的含量减去游离蒽醌的含量即为结合蒽醌的含量。
3 讨论
从薄层层析比较显示，5种不同方法提取液的成分与大黄标准品供试液成分相似，故提示本次实验用的大黄粗粉为正品。以结合蒽醌的含量比较以保温杯浸泡30min为最高，后顺序为沸水浸泡30min，水煎煮15min，沸水浸泡15min，水煎煮30min，说明传统轻泻采用沸水浸泡口服是合理的。大黄蒽醌类化合物易受热破坏，大黄入汤剂煎煮时间越长其成分含量越低，特别是结合蒽醌更为明显，所以大黄不宜久煎，与中药理论认为大黄不宜久煎且应后下是相吻合的。
参考文献
1 中国药典编辑委员会·中国药典，北京:化学工业出版社，2000，19.
2 罗顺德.中药通报，1987，（5）:30.
作者单位:350003福建省级机关医院