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【摘要】 目的 将自制的改良凝聚胺试剂与商业凝聚胺试剂比较，评价自制改良凝聚胺试剂的性能。方法 采用自制的凝聚胺试剂与4种商业凝聚胺试剂同时检测标准，比较其检测灵敏度，同时对150例输血前标本进行检测，比较结果。结果 自制凝聚胺试剂比其他4种商业凝聚胺试剂检测灵敏度高出1～2个灵敏度。结论 自制的改良凝聚胺试剂具有良好的性能，是安全可靠的。
【关键词】 自制改良凝聚胺试剂；灵敏度；特异性；输血前检查
【Abstract】 Objective Compared the home-made modified polybrene with commercial polybrene kits,to evaluated the efficiency of home-made modified polybrene.Methods Compared home-made polybrene with other 4 commercial polybrene kits to study the home-made polybrene’s sensitivity and it’s specificity.Results The sensitivity of homemade polybrene was higher than current 4 commercial polybrene kits.Conclusion Home-made polybrene was good.If we spread the method to hospital blood bank,the cost of pre-transfusion test will reduce greatly.
【Key words】 home-made polybrene;sensitivity;specificity;pre-transfusion test
血型抗体检测技术是血型血清学工作研究的主要内容之一，而IgG类血型抗体检测技术又是血型抗体检测技术的重点。从20世纪30～40年代建立IgG类抗体检测技术以来，血型研究工作取得了迅速的发展［1］。目前检测IgG类抗体的技术很多，包括经典的抗人球蛋白法、菠萝酶法等。这些方法都不同程度地存在这样或那样的缺点，如操作过于繁琐、操作时间长、灵敏度不高等，影响了这些方法在常规工作中的应用。
凝聚胺方法自从20世纪60年代首次发明以来，到80年代该方法开始应用于临床［2］，由于凝聚胺方法具有简便、快速等优点，一直受到广大医学工作者的关注。目前该技术在我国广泛应用于临床输血前检查，包括抗体筛选、抗体鉴定、交叉配血等［3，4］。
目前医院血库应用的凝聚胺试剂几乎都来自商业试剂盒，本研究的目的就是对凝聚胺试剂进行改良，自行配置凝聚胺试剂，并与目前市售的4种商业凝聚胺进行比较，对其性能进行评价。
1 材料与方法
改良凝聚胺试剂为笔者根据Lalezari P和Jiang等［5］建立方法的基础上改良配置而成。
抗A、抗B、谱细胞和筛选细胞均为上海血液生物医药有限责任公司购买。抗H、抗AB及稀有血清试剂为苏格兰诊断试剂公司购买的单克隆抗体。ABO标准细胞为本实验室采用5份相应血型健康红细胞混合制备而成。
改良凝聚胺试剂操作步骤：(1)加入待检血清2滴，1滴标准红细胞，或者2滴标准血清，1滴待检红细胞，混匀；(2)各加低离子液(LIM)0.6ml，混匀；(3)再各加促凝剂2滴，混匀，静置1min；(4)3400rpm离心10s，倒掉上清液，管底保留少量的液体；(5)各加重悬液2滴，轻轻混匀，观察结果。
商业凝聚胺试剂按照各自试剂盒说明书操作。
笔者采用自制改良凝聚胺试剂与市售灵敏度最高的商业凝聚胺试剂分别对150例输血前标本进行检测，检测内容包括抗体筛选和交叉配血。
抗体筛选：加入患者血清2滴，再加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选红细胞各1滴。
交叉配血：主侧管加入患者血清2滴，献血者红细胞1滴，次侧管加入献血者血清2滴，患者红细胞2滴。
2 结果
采用自制改良凝聚胺试剂与其他4种商业凝聚胺试剂对IgG型单克隆血清抗体进行滴度测定，检测结果比较见表1。 表1 自制改良凝聚胺法与其他商业凝聚胺试剂检测结果比较抗体筛选：笔者采用自制改良凝聚胺试剂与商业凝聚胺试剂1对送检的150个输血前检查标本进行抗体筛选，共发现3例不规则抗体，分别为抗-C、抗-D、抗-E抗-C联合抗体。两者结果一致。交叉配血试验：笔者对送检的150个交叉配血标本同时采用自制改良凝聚胺试剂与商业凝聚胺试剂1进行交叉配血，两者的结果完全一致。
3 讨论
凝聚胺技术的原理是首先采用带正电荷的物质，中和红细胞表面的负电荷，同时加入大分子物质，增加溶液的电解常数，降低电动势，缩短红细胞间距，使红细胞相互间能被IgG类抗体连接起来，通过显示凝集反应达到检测IgG类抗体的目的。本研究根据凝聚胺技术的原理，对凝聚胺技术进行改良，自行配置凝聚胺试剂。
本研究采用自制的改良凝聚胺试剂与其他4种商业凝聚胺试剂进行比较，从表1中可以看出，自制的改良凝聚胺试剂基本上与目前市售的4种商业试剂无明显区别，对某些抗体的检测灵敏度还高出1～2个滴度。同时从表1中可以看出，目前市售的凝聚胺试剂本身也存在一定的差别［5］。
笔者采用自制改良凝聚胺试剂与市售灵敏度最高的商业凝聚胺试剂1分别对150例输血前标本检测结果来看，说明自制改良的凝聚胺试剂与商业凝聚胺试剂具有同样的性能。
通过与市售的其他4种商业凝聚胺试剂比较，本研究自制的改良凝聚胺试剂与市售的最好的商业凝聚胺试剂具有相同甚至更好的性能，比某些凝聚胺试剂检测灵敏度高1～2个滴度，说明该试剂是一种可靠的试剂。如果推广到输血前临床标本检测，可以大大降低检测成本。
【参考文献】
1 周同彬，谭明乾，栾建凤，等.快速检测IgG类抗体的PMDC法的建立与应用.医学研究生学报，1999，12(4)：222-224.
2 Lalezari P,Jiang AF.The manual polybrene test:a simple and rapid procedure for detection of red cell antibodies.Transfusion,1980,20:206-211.
3 孙琦，陈学军.凝聚胺试验用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的探讨.现代检验医学杂志，2004，19(5)：27-29.
4 马利平，张建国.凝聚胺试验在交叉配血中的应用.济宁医学院学报，2005，28(2)：62.
5 林甲进，庄爱周，朱碎永.不同凝聚胺试剂检测抗体结果比较.江西医学检验，2004，22(1)：31-32.
作者单位： 523930 广东东莞，东莞市中心血站
(编辑：邓 锋)