本报广东讯 广州中医药大学日前完成的一项国家自然科学基金研究项目表
明，龟甲提取物在促进骨髓间充质干细胞（MSC）增殖过程中，可激活视黄酸受体
（RARα）、维生素D受体（VDR）的表达，表明RARα、VDR是龟甲促进MSC增殖的
两个药理靶点，初步验证了龟甲补肾健骨的机理。
以往的研究发现，龟甲（也称龟板）在体内、外可以促进骨髓间充质干细
（MSC）的增殖并诱导MSC分化为神经元样细胞，经过较长时间诱导，MSC还可向
成骨方向分化。
据研究人员介绍，继G蛋白耦联受体和离子通道之后，核受体已成为第三大
类非酶性治疗靶点。RARα及VDR是核受体家族的重要成员，对人体的生长发育起
着重要的作用。龟甲提取物促MSC增殖作用是否可能与核受体有关？研究按采用
免疫组化法和免疫荧光细胞化学法，观察了龟甲提取物对体外培养的MSC增殖过
程中核受体表达的影响，筛选促MSC增殖的药理靶点。
实验结果表明，空白对照组MSC的RARα表达为0，无阳性细胞，胞核呈红色，
无阳性反应（阳性反应为绿色）；龟甲低、中、高剂量组MSC的RARα表达均明显
增高，且呈浓度依赖性，胞核呈红色荧光和RARα阳性反应（绿色），数量呈剂
量依赖性增多，而高剂量组的RARα表达水平与中剂量组表达水平相当，无显著
性差异，提示中剂量组（333.3微克/毫升）可能是激活细胞内信号通路或RARα
受体的适宜浓度。
实验结果还显示，采用333.3微克/毫升龟甲提取物分别作用0、12、24、72、
120小时；作用12小时后，MSC的RARα阳性反应细胞开始增多，随着作用时间增
加，RARα表达增强；作用24小时后，MSC的RARα阳性反应达峰值；空白对照组
MSC仍无阳性细胞。空白对照组MSC的VDR的表达极低，龟甲低、中、高剂量组MSC
的VDR表达均明显增高，且呈浓度依赖性，胞核VDR阳性反应（绿色）明显增多，
且呈剂量依赖性。采用333.3微克/毫升龟甲提取物分别作用0、12、24、72、120
小时；作用24小时后，MSC的VDR阳性反应细胞开始增多，随着作用时间增加，VDR
表达增强，空白对照组有少量VDR阳性反应细胞；作用72小时后，VDR表达的峰值
为14.6，呈时效依赖性。
中医基础理论认为，肾主发育，肾藏“先天之精”，直接关系着机体的强弱
并调控机体的生长、发育和生殖。龟甲性味咸、甘、平，入肾经，能滋阴补肾。
研究人员认为，实验采用的龟甲提取物为脂溶性成分，可直接透过细胞膜，
与MSC核内的受体结合调节基因表达。龟甲对MSC增殖作用是否是通过激活核受体
来实现的，为了证实这一假设，研究人员采用免疫组化和免疫荧光细胞化学方法
对目前已知核受体进行龟甲提取物促MSC增殖作用的药理靶点筛选。免疫组化和
免疫荧光细胞化学方法均检测不到雌激素受体（ER）、糖皮质激素受体（GR）、
过氧化物酶体增殖激活受体（PPARδ）、甲状腺激素受体（TRα）阳性反应细胞。
提示ER、GR、PPARδ、TRα在龟甲促MSC增殖过程中可能无作用。
据研究人员介绍，核受体是一类转录调控因子，它们的主要功能是特异性调
控发育、生殖、代谢相关基因的表达。已知哺乳动物核受体分为3类，一是甾体
激素受体，包括糖皮质激素、雌激素受体；二是非甾体激素受体，包括视黄酸受
体、维生素D受体和甲状腺激素受体；三是具有核受体的基本特征但却未找到它
们的配体，也不知道它们的靶基因和生理功能，因而将它们称为孤儿受体，例如
过氧化物酶体增殖激活受体（PPARδ）。
此项研究也表明，龟甲提取物能时效和量效性促进VDR的表达。维生素D(VitD)
是钙平衡和骨代谢的主要调节因子。新近研究表明VitD不仅影响钙磷代谢，而且
具有广泛的重要的生理功能，有人称之为VitD内分泌系统。VDR是介导1，25二羟
基维生素D3[1，25（OH）2D3]发挥生物效应的核内生物大分子，它在维持机体钙、
磷代谢，调节细胞增殖与分化等方面起重要作用。通过研究敲除小鼠VDR基因后发
现，VitD的大多数生物学作用是通过VDR介导的，VDR缺陷可引起多种疾病的发生。
该项研究观察了龟甲提取物对MSC的VDR表达的影响，结果显示龟甲提取物能
增强MSC的VDR表达，这可能是龟甲补肾健骨的机理之一。该研究对目前已知核受
体(RARα、VDR、ER、GR、PPARδ、TRα)进行龟甲提取物促MSC增殖作用的药理靶点
筛选，结果证实，龟甲提取物促进MSC增殖过程中可激活RARα、VDR的表达，RARα、
VDR可能是龟甲促进MSC增殖的两个药理靶点。
（宋许周）
作者：
2006-9-21