富血小板血浆优化培养间充质干细胞的实验研究

2006年08月08日 中华血液学杂志 2006 Vol.27 No.6 P.403-405 9 （北京）为了探讨以人富血小板血浆(PRP)取代动物血清培养可供临床应用的间充质干细胞(MSC)的新方法。研究者取骨髓标本取自行全髋关节置换术的造血功能正常患者的近端股骨。有核细胞2×105/cm2接种于25 cm2培养瓶中培养MSC，比较含12.5%胎牛血清(FCS)和12.5%马血清的完全Dexter培养液，含10.0%FCS的α-MEM培养液和含5%PRP的α-MEM培养液三种培养体系的扩增效果。有核细胞1×106与采自健康供者髂骨的相同数量的骨髓细胞分别接种于25 cm2培养瓶，14 d后计数成纤维细胞集落(CFU-F)。结果从近端股骨中分离和扩增的细胞呈典型的成纤维样细胞形态，表型鉴定CD34、CD45阴性，SH2(CD105)、SH3(CD73)、Thy-1(CD90)阳性，体外诱导可向成骨细胞分化。其中含5%PRP的培养体系较其他两种传统培养方法具有显著增强的MSC扩增效果且不改变细胞表型及分化功能,来源于近端股骨的骨髓细胞CFU-F较常规髂骨穿刺物显著增高(分别为89±17和16±5，P＜0.01)。可见建立以PRP取代FCS的培养体系，并采用取自外科手术中近端股骨的骨髓标本可在体外高效扩增可备临床细胞治疗应用的MSC。