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给细胞做“CT”

来源:科技日报
摘要:时间:2007年3月26日地点:中科院上海生科院分子生物学国家重点实验室参观实验室是我们每到一个国家重点实验室采访的必修课,中科院上海生科院分子生物学国家重点实验室自然也不例外。走在实验室的楼道里,首先引起我们注意的是一个发出较大声音的长方体的机器。接着我们走进一个实验室,看见两个实验人员很认真地拿着一......

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        时间:2007年3月26日地点:中科院上海生科院分子生物学国家重点实验室  

  参观实验室是我们每到一个国家重点实验室采访的必修课,中科院上海生科院分子生物学国家重点实验室自然也不例外。  



  走在实验室的楼道里,首先引起我们注意的是一个发出较大声音的长方体的机器。透过机器上方透明的盖子,我们看到里面装了一些看起来有些浑浊的液体的试管,被插在一个有很多孔的装置上,这个装置有规律地进行摇晃。据介绍,这个机器叫做摇床,是用来培养细菌的,里面保持37℃的恒温。研究人员把含有细菌的菌液放在里面,里面的温度和不断地摇晃,使得细菌开始一分二、二分四的繁殖,试管里的液体开始是澄清的,渐渐地会变得浑浊。到一定程度,研究人员就可以从里面提取一些需要的菌液用来做实验。简单说,它相当于一个细菌工厂一样,培养合成一些做实验需要的细菌。  



  接着我们走进一个实验室,看见两个实验人员很认真地拿着一个看起来像稍大些的注射器的工具,往一个个长约半分米的小试管里注入一些液体。他们边做边介绍说,手中的工具叫做移液器,但都习惯叫它“枪”。有些买来做实验用的试剂的量比较大,但每次做实验需要的量又比较小,这些试剂是需要冷冻保存的,反复冻融不太好,所以他们就会事先把试剂预分好。  



  继续前行,我们看到了一个四方体的仪器,仪器的旁边是一台电脑显示器。据介绍,这个就是流式细胞仪,它是用来进行流式细胞分析的仪器,集电子、计算机、激光、流体理论于一体,被誉为试验室的“CT”。流式细胞仪可以在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选,它可高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数。  



  研究人员将需要检测的细胞用荧光染料染色后制成待测样品,流式细胞仪用一定压力将待测样品压入流动室,不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包围下单行排列,依次通过检测区域。流式细胞仪通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。  



  光散射信号基本上反映了细胞体积的大小,不同波长的荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度。这些信号经光电倍增管接收后可转换为电信号,然后电信号被转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理,将分析结果显示在计算机屏幕上。  



  流式细胞仪还可以对细胞进行分选,它对细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。仪器首先将样品断裂为均匀的液滴,待测定细胞就分散在这些液滴之中,然后将这些液滴充以正负不同的电荷,接着这些液滴在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,不予充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。  



        ■链接  



  实验室备忘录  



  分子生物学国家重点实验室1984年建立,1986年通过验收,1987年对外开放,依托中科院上海生科院生化与细胞所,是我国生物口第一个国家重点实验室。实验室主要研究方向为生物大分子的结构与功能、分子遗传学和生物膜的结构与功能。
作者: 2007-4-19
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