2005年10月31日 中华肾脏病杂志 2005 Vol.21 No.7 P.384-388
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(广州)为了分离纯化表现为肾病综合征(NS)的微小病变型(MCD)及膜性肾病(MN)患者尿IgG,比较它们对人近端小管上皮细胞(HK-2)表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的影响,研究者采用硫酸铵沉淀、蛋白G亲和层析纯化尿中IgG,并经SDS-PAGE、Western印迹分析鉴定。用不同浓度(0、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mg/ml)的上述两种患者的尿IgG分别刺激HK-2细胞6 h,应用RT-PCR检测细胞表达MIF mRNA的变化;应用Western印迹检测细胞中MIF的蛋白水平。结果纯化的尿IgG经SDS-PAGE分析显示其分解为4个片段,以兔抗人IgG抗体进行免疫印迹鉴定,证实这些蛋白条带均为IgG成分。两种不同病理类型NS患者的尿IgG均可上调HK-2细胞MIF的基因及蛋白表达,并呈剂量依赖性。MN患者的尿IgG0。1 mg/ml即可明显上调HK-2细胞MIF mRNA和蛋白表达;而MCD患者的尿IgG需达到2.5 mg/ml才具有显著上调效应。可见呈NS的MCD和MN患者尿IgG可上调HK-2细胞表达MIF。MN患者尿IgG的作用强于MCD患者,提示这两种不同病理类型患者尿IgG可能存在结构或功能上的差异。
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自动采集 2005-11-1