转染甲氨蝶呤阿糖胞苷双耐药基因的小鼠骨髓细胞对大剂量化学治疗的保护作用

2006年02月09日 中华外科杂志 2005 Vol.43 No.15 P.998-1001 5 （沈阳）为了探讨同时导入人双突变的二氢叶酸还原酶基因(DHFR)和胞苷脱氨基酶基因(CD)小鼠骨髓细胞对大剂量甲氨蝶呤(MTX)和阿糖胞苷(Ara-C)的耐受性及骨髓耐受联合化疗的可行性。研究者以反转录病毒为载体，将人双突变的DHFR和CD通过共培养转染入两只小鼠骨髓干细胞，观察共培养后的骨髓细胞经Ara-C、MTX、Ara-C+MTX处理后，耐MTX及Ara-C粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)生成情况；转基因小鼠骨髓细胞提取的DNA，用聚合酶链反应(PCR)检测转基因小鼠骨髓细胞耐药基因的表达。结果含有耐药基因(SFG-F/S-CD)的骨髓细胞均有耐药克隆的形成，耐Ara-C、MTX、Ara-C + MTX克隆分别为56%、22%和14%，并明显增加了对MTX和Ara-C的耐受；转基因小鼠骨髓细胞经PCR检测，显示有F/S、CD基因表达；耐药基因转染后小鼠骨髓细胞对MTX和Ara-C 的耐受明显增加。可见双耐药基因可以导入小鼠骨髓细胞并且获得表达，提高了造血细胞对MTX和Aar-C的耐药性。