RNA干扰技术抑制体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的初步研究

2006年05月19日 中华眼科杂志 2005 Vol.41 No.12 P.1076-1081 10 （广州）为了探讨RNA干扰技术对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的抑制作用。研究者采用化学合成的靶向IKK-β的siRNA，转染体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞，同时以对任何基因均无作用的siRNA作为阴性对照。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测IKK-β mRNA表达水平，免疫印迹法检测IKK-β蛋白表达水平。将siRNA的转染浓度分别设为5、10、25、50、100、200 nmol/L，进行转染，于转染后48 h采用四甲基偶氮唑盐法检测其转染后对成纤维细胞的抑制作用。结果经转染了靶向IKK-β的siRNA，其成纤维细胞IKK-β的mRNA和蛋白表达水平均受到抑制。各个转染浓度(5、10、25、50、100、200 nmol/L)均可抑制成纤维细胞的增殖(P<0.05)，抑制率分别为10.72%、23.35%、30.84%、51.25%、50.06%、49.63%，50 nmol/L时已达最大抑制率。可见靶向IKK-β的siRNA转染可以降低IKK-β的表达水平，同时对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增殖具有抑制作用。抗IKK-β的RNA干扰技术可能是抑制抗青光眼术后滤过道瘢痕化的新手段。