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p53转录因子全基因组作用图

来源:生物通
摘要:1月13日新出版的Cell杂志上刊登了一篇来自新加坡国立基因组研究所(GenomeInstituteofSingapore)的研究文章,公布了他们所获得的p53转录因子人类基因组结合位点(p53Transcription-FactorBindingSites)全作用图,为p53与肿瘤学进一步研究提供了重要信息。转录因子的结合位点(transcription-factorbindingsite,TFBS)......

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        p53基因是一种肿瘤抑制基因,定位于人类17号染色体短臂,编码p53磷蛋白,通过科学研究发现,p53蛋白是人体内最有效的对抗肿瘤的自然防御物,因此p53多年以来一直是肿瘤学(近年来发展到了毒理学、治疗学等方面)的热点领域,

        但是p53的研究仍然有许多的盲点。1月13日新出版的Cell杂志上刊登了一篇来自新加坡国立基因组研究所(Genome  Institute  of  Singapore)的研究文章,公布了他们所获得的p53转录因子人类基因组结合位点(p53  Transcription-Factor  Binding  Sites)全作用图,为p53与肿瘤学进一步研究提供了重要信息。

        转录因子的结合位点(transcription-factor  binding  site,TFBS),即转录因子调节基因表达时与mRNA结合的区域(比如TATA  box),是重要的转录调控元件。在研究过程中TFBS十分重要,比如说如果研究人员想要查清楚一种特异转录因子是如何导致一种疾病的,就需要定位出基因组上每一个转录因子结合位点,识别出其控制的基因。

          通过将染色质免疫沉淀技术(chromatin  immunoprecipitation,ChIP)和配对端点双标记测序技术(paired-end  ditag  (PET)  sequencing)这两种方法结合,新加坡基因组研究所的研究人员在Yijun  Ruan教授的领导下对包含大约50万个PET序列的饱和样品(saturated  sampling)进行了分析,获得了65,572个单独的ChIP  DNA片段,建立了用特殊标记标定p53结合位点的重叠PET簇(PET  clusters)。在这一基础上,研究人员最终确定了最少542个p53精确结合位点,包括98个之前未发现的p53目标基因——说明p53可能包含有不同于以前认知的新功能。(生物通记者:张迪)



                        主要手段介绍:

                        1.  染色质免疫沉淀技术(chromatin  immunoprecipitation,ChIP)  染色质免疫沉淀分析(ChIP)是一种在体内研究DNA-蛋白质相互作用的理想方法,相对于传统的其它研究蛋白与DNA相互作用的方法(比如EMSA,  electrophoretic  mobility  shift  assay),ChIP技术能更加真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的最好方法。

                        2.  配对端点双标记测序技术(paired-end  ditag  (PET)  sequencing)

                        This  track  shows  the  starts  and  ends  of  mRNA  transcripts  determined  by  paired-end  ditag  (PET)  sequencing.  PETs  are  composed  of  18  bases  from  either  end  of  a  cDNA;  36  bp  PETs  from  many  clones  were  concatenated  together  and  cloned  into  pZero-1  for  efficient  sequencing.  See  the  Methods  and  References  sections  below  for  more  details  on  PET  sequencing.  

                        The  PET  sequences  in  this  track  are  full-length  transcripts  derived  from  two  cell  lines  and  mapped  on  whole  genome:  the  log  phase  of  MCF7  cells  ;HCT116  cells  treated  with  5FU  (5-fluorouracil)  for  6  hours  

                        来自http://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgTrackUi?hgsid=65468132&c=chr7&g=encodeGisRnaPet



    原文:

    Volume  124,  Issue  1  ,  13  January  2006,  Pages  207-219    

    A  Global  Map  of  p53  Transcription-Factor  Binding  Sites  in  the  Human  Genome        Chia-Lin  Wei1,  Qiang  Wu1,  Vinsensius  B.  Vega1,  Kuo  Ping  Chiu1,  Patrick  Ng1,  Tao  Zhang1,  Atif  Shahab2,  How  Choong  Yong2,  YuTao  Fu3,  Zhiping  Weng3,  4,  JianJun  Liu1,  Xiao  Dong  Zhao1,  Joon-Lin  Chew1,  6,  Yen  Ling  Lee1,  Vladimir  A.  Kuznetsov1,  Wing-Kin  Sung1,  Lance  D.  Miller1,  Bing  Lim1,  5,  Edison  T.  Liu1,  Qiang  Yu1,  Huck-Hui  Ng1,  6,  ,  and  Yijun  Ruan

  1.Genome  Institute  of  Singapore,  Singapore  138672

  2.Bioinformatics  Institute,  Singapore  138671

  3.Bioinformatics  Program,  Boston  University,  Boston,  MA  02215,  USA

  4.Biomedical  Engineering  Department,  Boston  University,  Boston,  MA  02215,  USA

  5.Harvard  Institutes  of  Medicine,  Harvard  Medical  School,  Boston,  MA  02115,  USA

  6.Department  of  Biological  Sciences,  National  University  of  Singapore,  Singapore  117543
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