前列腺小体有望作为前列腺癌症的血浆生物标志物

2011年5月9日PNAS杂志网站上发布了一篇论文，指出通过多重识别检测技术揭示出前列腺小体有望作为前列腺癌症的血浆生物标志物。





前列腺小体(prostasome)是正常和恶性前列腺腺泡细胞(acinar  cell)产生和分泌的平均直径为150nm的微小囊泡(microvesicle)。正常情况下，这些囊泡会释放到精液中。人们早已猜测恶性前列腺细胞的侵入性生长可能会造成这些囊泡出现在组织间隙空间(interstitial  space)，随后进入外周血液循环系统。前列腺小体适合作为前列腺癌症病人血液中的生物标志物业已通过功能增强型邻位连接技术(proximity  ligation  assay,  PLA)的检验。





研究人员开发了一个异常敏感和高特异性的检测技术(4PLA)来检测复杂的标的物结构，如微小囊泡，在该囊泡中，首先通过固定化的抗体将标的物捕获，随后采用四个附着有DNA链的其他抗体来检测标的物。由于需要5个抗体同时结合而产生放大性的报告信号(reporter)，这就使得特异性和灵敏度得以提高。与正常人和良性前列腺活组织切片检察结果的人相对照，在未采取根治性前列腺切除治疗的前列腺癌症病人血液样品中，利用4PLA能成功地检测到前列腺小体水平显著性的提高。在两项独立研究当中，前列腺癌症病人血浆中前列腺小体水平的中间数值比正常人血液样品的高2.5到7倍。Gleason评分能作为是否需要前列腺切除治疗的依据，而4PLA还能将高、中Gleason评分(相应为8/9和7)的病人与低Gleason评分(不高于6)的病人区分开来，因而能反应疾病的严重性程度。该方法能够检测外周血液中的前列腺小体，可能适合用于在局限性前列腺癌症的早期诊断和评估。





towersimper注：

1.  邻位连接技术(proximity  ligation  assay,PLA)

一种高灵敏度的蛋白质检测技术，该技术采用核酸适体(aptamer)或单/多克隆抗体-核酸复合物作为邻位连接探针(proximity  probes)。当一对邻位探针同时识别同一个目标蛋白分子时，它们将在空间位置上相互临近，通过连接反应形成一段可扩增的DNA标签序列，该标签序列能够反映待测蛋白的种类及浓度。该技术将对蛋白质的检测转变为对DNA核酸序列的检测，实现了特殊蛋白质的检测，定量及定位。





2.  Gleason评分或分级(Gleason  score)

由于Gleason分级与生物学行为和预后关联良好，逐渐得到承认，使用日渐广泛，成为制定前列腺癌治疗方案的重要参考指标。20世纪90年代以来，美国癌症综合网推荐的前列腺癌治疗指南中，Gleason分级、前列腺特异性抗原（PSA）水平和肿瘤分期是决定治疗方案的最重要的指标。2004年版WHO泌尿与男性生殖系统肿瘤分类已将Gleason分级纳入。

A.  分级和积分：

目前多采用与预后密切相关的五级法。

①根据腺体分化程度，按5级评分（第1级1分，分化好；每递升1级增加1分；第5级5分，为未分化）。

②对于同一肿瘤不同区域腺癌结构的变异，按其主要和次要分化程度分别评分，以该两项评分相加的总分作为判断预后的标准（例如腺癌主要结构评为2分，次要结构评为4分，则积分为2+4=6分；只有1个结构类型，评分为3分，则积分为3+3=6分；穿刺活检见3个结构类型以上且最高级别结构数量少时，一般将最高级别作为次要结构类型）。

③积分为2、3、4分者相当于高分化腺癌；5、6、7分者相当于中分化腺癌；8、9、10分者相当于低/未分化癌。

④Gleason分级适用于前列腺腺癌，不适用于腺鳞癌、尿路上皮癌。

B.  主要结构类型：

①Gleason  1级（很少见）：一致性规则的大腺体，背靠背密集，形成小结节。

②Gleason  2级：较不规则的大腺体，背靠背密集，形成小结节，结节内腺体不融合。

③Gleason  3级：浸润性生长的小腺体或腺泡，或小型筛状结构腺体。

④Gleason  4级：融合腺体，大型筛状腺体，或呈肾透明细胞癌样。

⑤Gleason  5级：实性癌巢（无腺样结构），单个癌细胞浸润，或呈粉刺样癌（癌细胞坏死）。