人甲状腺原代细胞的长期培养

2005年07月04日 中华内分泌代谢杂志2005 Vol.21 No.2 P.181-183 11 （重庆）为了探索人甲状腺细胞长期原代培养的方法及细胞在不同时期的功能变化，研究者常规分离甲状腺细胞，并用含有10%胎牛血清(FBS)、谷氨酰胺、牛胰岛素、10 mU/L TSH和氢化可的松的MEM培养，细胞铺成单层后换用4% FBC的培养基培养，分别在不同时间观察甲状腺细胞吸碘率、细胞生长情况，免疫组化观察甲状腺特异抗原甲状腺球蛋白(Tg)表达水平，RT-PCR测定钠碘转运子(NIS)基因表达水平。结果甲状腺细胞在培养40 d左右仍生长良好，培养14 d细胞具有80%的吸碘率，培养7 d Tg表达可达95%，培养14 d Tg表达仍达60%，NIS mRNA表达在培养7 d达98%，而培养14 d表达率只有40%。研究应用该研究所建立的培养条件可以使甲状腺细胞生存40 d以上，该实验条件下培养3，7，14，28 d的原代甲状腺滤泡上皮细胞以培养7 d的细胞NIS mRNA，Tg表达、摄碘功能最接近基线水平。