咔唑生物碱HY-1诱导K562细胞凋亡作用的研究

2006年02月13日 中华肿瘤杂志 2005 Vol.27 No.8 P.457-460 11 （天津）为了研究咔唑生物碱HY-1对人慢性骨髓性红白血病K562细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，并探讨其作用机制。研究者通过SRB法检测HY-1对K562细胞体外增殖的影响；通过PI荧光染色法、罗丹明123染色法、AnnexinⅤ-PI染色法等流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳法，观察HY-1处理K562细胞后凋亡相关指标的变化, 通过Western blot检测凋亡相关蛋白的变化。结果 HY-1对K562细胞体外增殖的半数抑制浓度(IC50)为 (29.05±0.90) μmol/L.随着HY-1药物浓度的增加和作用时间的延长，SubG1期细胞明显增加，线粒体膜电位迅速下降，发生凋亡的细胞比例也显著增加，而且经琼脂糖凝胶电泳检测到了典型的DNA Ladder。Western blot结果显示，细胞色素c (Cyt c)表达明显增加；caspase-9酶原被剪切，且活化程度呈时间依赖性,caspase-3酶原及其作用底物PARP也发生了剪切, caspase-8表达无明显变化。可见 HY-1能够以剂量-时间依赖方式，通过线粒体激活途径，诱导K562细胞发生凋亡，并由此发挥其抗肿瘤活性。