凝血酶受体活化与血小板膜糖蛋白Ⅰbα的异位分布机制

2005年05月27日 中华血液学杂志2005 Vol.26 No.3 P.152-156 13 （苏州）为了检测凝血酶受体活化过程中血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰ bα的动态分布及其细胞骨架蛋白的改变，揭示GP Ⅰ bα的异位分布机制与凝血酶受体在血小板信号传递中的作用，研究者以凝血酶受体活化肽(TRAP)诱导血小板活化，应用流式细胞术比较刺激前后血小板膜表面GPⅠ bα及P-选择素的表达，并通过转移电泳及免疫沉淀技术，分析细胞骨架中GP Ⅰ bα、肌动蛋白、肌球蛋白的变化。观测细胞松弛素(Cytochalasin)D与腺苷三磷酸双磷酸酶(Apyrase)Ⅶ对血小板活化过程的影响。结果TRAP作用后促使血小板活化，流式细胞术检测结果显示其P-选择素水平显著升高，而GP Ⅰ bα先呈现进行性减少，而后逐渐回升的可逆性变化。抑制剂作用后这一过程受到不同程度影响，其中细胞松弛素D能阻滞GPⅠ bα的内移，ApyraseⅦ对活化过程中GPⅠ bα的逆转没有影响，只对它的恢复起作用，促使GPⅠ bα迅速返回细胞表面。细胞骨架蛋白分析结果也表明肌动蛋白、肌球蛋白与GPⅠ bα受刺激后呈先增加后减少的动态变化趋势。细胞松弛素D能阻滞GPⅠ bα、肌动蛋白与肌球蛋白向骨架中心的转位，ApyraseⅦ则能加快骨架蛋白在骨架中心的消散。免疫印迹证实GPⅠ bα的这种可逆性变化与血小板膜骨架紧密相关。可见凝血酶受体活化在血小板信号传递过程中发挥了重要作用，导致GP Ⅰ bα由血小板膜表面向内转移而后又逐渐返回至胞膜外，这种动态变化与细胞骨架重组及二磷酸腺苷(ADP)有关。