Survivin反义寡核苷酸诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的实验

2005年12月13日 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005 Vol.40 No.8 P.571-574 6 （武汉）为了探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响。研究者将脂质体介导的survivin ASODN转染Hep-2细胞。噻唑蓝[3-(4，5-dimethyldiazol-2-yl)-2，5diphenyl tetrazolium bromid，MTT]法检测细胞生长抑制作用，逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR)和Western blot检测survivin mRNA和蛋白的表达情况，流式细胞仪检测细胞凋亡率，检测半胱氨蛋白水解酶3(caspase-3)活性的变化。结果①survivin ASODN抑制Hep-2细胞的增殖，并呈时间和剂量依赖性；②经ASODN转染的Hep-2细胞survivin mRNA和蛋白的表达明显下降；③经ASODN转染的Hep-2细胞凋亡率增加；④经ASODN转染的Hep-2细胞半胱氨蛋白水解酶3的活性增强，并呈时间依赖性。可见 survivin ASODN可能通过下调survivin mRNA和蛋白的表达而抑制Hep-2细胞增殖，诱导其凋亡。