反义survivin-脂质体复合物对肝癌细胞生长凋亡和细胞周期的影响

2006年04月28日 中华肿瘤杂志2005 Vol.27 No.10 P.581-585 11 （杭州）为了探讨反义survivin-脂质体复合物(survivin-ASODN)对肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用及其机制，为肝癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据。研究者用脂质体介导survivin-ASODN转染肝癌细胞系HepG2细胞；通过RT-PCR和 Western blot检测survivin表达水平；以MTT法测量细胞生长情况；以流式细胞术测定caspase-3活性及凋亡率，电镜观察细胞形态学变化，并应用流式细胞仪同步分析survivin-ASODN对肝癌细胞系HepG2增殖周期的影响。结果 surviving-ASODN可有效下调survivin表达水平，并呈剂量依赖关系，其IC50值为250 nmol/L，最大效应浓度为600 nmol/L,可抑制细胞生长，激活caspase-3活性，诱导细胞凋亡，使其出现凋亡形态学变化，如胞浆空泡变性、核浓缩和核碎裂。细胞周期的同步分析显示， surviving-ASODN对HepG2细胞增殖周期有明显影响，HepG2先出现细胞周期阻滞，紧接着出现细胞凋亡；低浓度处理后，可将细胞先后阻滞在S期和G2/M期；高浓度时，S期阻滞被加强，可快速诱导细胞凋亡，并且，细胞凋亡率随着药物浓度的增加和作用时间的延长明显上升。可见 surviving-ASODN对肝癌细胞有强的生长抑制效应，其机制是与阻断细胞周期及诱导细胞凋亡有关。