肾癌G250抗原基因真核表达载体的构建和序列测定

2006年08月08日 中华泌尿外科杂志2006 Vol.27 No.1 P.5-8 9 （广州）为了构建肾癌G250抗原基因编码区序列的真核表达载体并进行序列测定。研究者从肾癌组织中提取总RNA，采用RT-PCR技术扩增肾癌G250抗原的基因编码区序列，将PCR片段定向克隆至真核表达载体pcDNA3.0，并进行序列测定。结果肾癌组织RT-PCR扩增后，均产生特异性条带，位置在1000 bp和1600 bp之间，与预定相符。pcDNA3.0-G250分别用HindⅢ、Xho I双酶切后产生2条带，均与预定位置相符；抗原基因编码区序列与Genbank登录号BC014950文献报道的序列同源性为100%，目的基因与载体正确连接。可见成功克隆了肾癌G250抗原的基因编码区序列，并构建了其真核表达载体pcDNA3.0-G250，为核素标记的G250单克隆抗体在诊断和治疗的应用及G250基因修饰的树突状细胞疫苗的肾癌生物治疗提供了依据。