脂质体介导的DCC基因对卵巢上皮性癌细胞生长的抑制作用

2006年09月08日 中华妇产科杂志 2006 Vol.41 No.3 P.186-189 10 （哈尔滨）为了探讨脂质体介导的DCC基因对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系SKOV3细胞生长的抑制作用。研究者通过目的基因克隆、载体构建技术，将DCC基因重组于pcDNA3.1(+)质粒中，构建pcDNA3.1(+)-DCC质粒，并通过脂质体介导，将此质粒转染入SKOV3细胞中(即SKOV3/DCC细胞)。实验分为3组，DCC基因转染组(SKOV3/DCC组)、空载体转染组(SKOV3/Neo组)和空白对照组(SKOV3组)。RT-PCR技术和免疫组化染色方法检测3组细胞中DCC mRNA和蛋白的表达，并观察细胞集落形成率、生长速度、细胞周期等生物学行为变化。结果 RT-PCR技术和免疫组化染色方法检测显示，外源性DCC基因通过基因重组及脂质体介导，已整合于SKOV3细胞并获稳定表达。SKOV3/DCC组细胞的生长速度较SKOV3和SKOV3/Neo组减慢，分别比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。SKOV3/DCC组细胞克隆数为(38±8)个，分别与SKOV3和SKOV3/Neo组[分别为(192±8)、(186±10)个]比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。细胞周期分析显示，SKOV3/DCC组，G1期细胞占78.0%，S期细胞占5.3%，与SKOV3/Neo组(分别为20.0%、3.2%)比较，差异有统计学意义(P<0.01)。电镜观察显示，SKOV3/DCC组细胞超微结构出现生长受到抑制的特征。可见 DCC基因可明显抑制卵巢癌细胞生长，可能在卵巢癌发生、发展的过程中起重要作用。