四医大西京医院发现FAS启动子具有肿瘤靶向性

        在国家自然科学基金项目资助下，日前第四军医大学西京医院肿瘤科和陕西省肿瘤医院等单位共同完成的一项研究证明，FAS启动子在肿瘤细胞中具有强转录活性，具有良好的肿瘤靶向性，为肿瘤靶向基因治疗提供理论依据。  

　　基因治疗是目前恶性肿瘤最有前景的一种治疗手段，但是肿瘤的基因治疗需要解决两个问题，一是靶向性，即选择性杀伤肿瘤细胞，而对正常细胞和组织没有影响；其二是转导效率问题。利用肿瘤特异性启动子调控治疗基因在肿瘤细胞中表达是实现肿瘤靶向性基因治疗的重要手段。  

　　研究人员以人基因组DNA为模板，PCR扩增FAS启动子区680bp活性序列，经测序鉴定正确后，克隆至荧光素酶表达载体pGL3-enhancer中，构建成重组荧光素酶表达载体pCL3-FAS。将pCL3-FAS通过脂质体转染胃癌细胞系SGC-7901、人宫颈癌细胞系Hela、人乳腺癌细胞系SKBR3、人肝癌细胞系HepG2以及NIH3T3成纤维细胞系中，应用荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性，通过内参校正得到相对转录活性。  

　　结果显示，成果扩增出大小约为680bp的FAS启动子序列。经酶切鉴定，成功构建重组荧光素酶表达载体pGL3-FAS。瞬间转染pGL3-FAS，发现其在SGC-7901、Hela、SKBR3、HepG2细胞中均具有较强的荧光素酶活性，且荧光素酶活性高于强启动子SV40驱动的pGL3-control载体；而在正常成纤维细胞中，转录活性较低。  

　　研究表明：人FAS基因启动子具有高效特异性靶向多种肿瘤细胞的特点，可以作为肿瘤靶向的调控元素用于恶性肿瘤的靶向基因治疗。