DNA载体介导RNA干扰抑制LMP-1基因对鼻咽癌细胞转移能力的影响

2007年05月14日 中华肿瘤杂志 2006 Vol.28 No.10 P.724-727 （广州）为了探讨应用DNA载体介导RNA干扰技术，抑制鼻咽癌细胞中EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)表达的可能性，观察LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞转移能力的影响。研究者 将能转录出干扰RNA的DNA模板插入pAVU6+27质粒，构建能够介导RNA干扰的发夹状干扰RNA(shRNA)表达载体。采用磷酸钙共沉淀法，将质粒导入EB病毒(+)的鼻咽癌细胞C611，筛选LMP-1基因沉默的克隆，通过观察其贴壁生长能力、基底膜穿透能力和移动能力的变化，分析LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞转移能力的影响。结果 在shRNA表达载体有效转染的C611细胞中，LMP-1基因的表达受到稳定抑制。肿瘤细胞转移实验表明，LMP-1基因沉默的C611细胞，贴壁生长能力提高，基底膜穿透能力和细胞移动能力均明显下降。可见 shRNA表达载体能够在鼻咽癌细胞内介导RNA干扰，并获得对LMP-1基因稳定的抑制。LMP-1基因可能通过贴壁生长能力、基底膜穿透能力和细胞移动能力等，影响鼻咽癌细胞的转移。