阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导STAT3-shRNA对前列腺癌生长有抑制作用

《中华肿瘤杂志》2007年第29卷第8期 中国研究者探讨了第5代阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物（G5-PAMAM-D）作为小发卡RNA（shRNA）真核表达质粒的载体，进行前列腺癌RNA干扰基因治疗的可行性。研究者根据增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、信号转导子和转录激活子3（STAT3）cDNA序列结构，分别设计构建表达EGFPmRNA、STAT3mRNA的特异shRNA真核表达质粒pSilencing4．1-EGFP-shRNA和pSilencing4．1-STAT3-shRNA。在体外以G5-PAMAM-D为载体，将质粒pEGFP-C1和pSilencing4．1-EGFP-shRNA共转染前列腺癌细胞PC-3、22Rvl，通过观察EGFP表达检测干扰效果以及转染效率；然后，以同样的方式将pSilencing4．1．STAT3-shRNA转入前列腺癌细胞系，四甲基偶氮唑盐（MTr）法检测其对细胞生长的抑制作用，丫啶橙染色观察细胞凋亡。制作前列腺癌小鼠模型，将G5．PAMAM-D与质粒pSilencing4．1-STAT3．shRNA的混合物注射入荷瘤鼠肿瘤内，观察对肿瘤生长的抑制作用。结果发现体外实验表明，G5-PAMAM-D可将pSilencing4．1．EGFP—shRNA转入前列腺癌细胞，明显沉默EGFP的表达，并且G5-PAMAM-D可将pSilencing4．1-STAT3-shRNA有效转入前列腺癌细胞中，明显抑制肿瘤细胞的生长，增加细胞的凋亡。体内实验证明，G5-PAMAM-D／pSilencing4．1-STAT3-shRNA可抑制荷瘤鼠前列腺癌的生长，而各对照组肿瘤生长无明显抑制。由此，研究者得出结论，G5-PAMAM．D作为基因载体，可将shRNA的真核表达质粒在体内外转入前列腺癌组织细胞，并有效表达shRNA；G5-PAMAM-D可能成为应用前景广阔的小干扰RNA（siRNA）的载体。