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1.按下稳压电源工作电源开关键至“ON”状态。依次接通P680型输液泵、ASI-100自动进样器、柱温箱、检测器、电脑。
2.更换蠕动泵清洗瓶中5%的甲醇(如果仪器经常使用则建议每周更换两次，如果仪器很少使用则每次使用前必须更换。)
3.确认洗针瓶中的洗液是否太少，若太少,则需补充或更换。洗液一般为：50%的甲醇。
4.排泵内气泡
4.1拧松泵右侧的快速清洗阀（反时针两圈左右）。按下泵前面板右下方的“Purge”键, 排泵内气泡，仪器将以6.0 ml/min的速度自动快速清洗泵内残留的气泡，5分钟将自动停止。若想手动停止，则再按 “Purge”键，将停止清洗。
4.2 将每个需要使用的通道分别排完气泡后，拧紧快速清洗阀(顺时针拧紧，注意不要拧得过紧。)。
5.系统联机
5.1检查确认密码钥匙已与计算机联结，鼠标左键双击桌面下方工具栏的“Chromeleon”图标，打开 [Chromeleon Server Monitor]，点击，待变色龙图标变成灰色，并显示Chromeleon Server is running idle时，关闭[Server Monitor]。
5.2 鼠标左键双击桌面的“Chromeleon”图标。双击右边方框中的HPLC-Graphics.pan, 点击泵模块下的“Settings”键，将跳出泵的设定窗口,设置完成后，按右下方的“Close”关闭该界面。点击自动进样器模块下的“Settings”键，将跳出进样器的设定窗口,设置完成后，按右下方的“Close”关闭该界面。点击检测器模块下的“Settings”键，将跳出一个泵检测器的设置窗口, 设置完成后，按右下方的“Close”关键该画面。
6序列进样
6.1新建一个程序文件
6.1.1依次点击File/New，选中“Program File”后,进入程序编辑向导界面。
6.1.2确认泵的工作方式（“Isocratic”等度分析、“Ramp”二元梯度分析、“Multi-Step Gradient”多元梯度分析）、合适的流动相通道及高/低压极限和流速。
6.1.3自动进样器的参数设置，每一个参数后面都有一个推荐值，一般不做改动。
6.1.4通道的选择，设定采集一个样时需要采集的时间段（Acquisition Time），也可以不从0分钟开始采集，也就是前面一段时间不采集信号。
6.1.5紫外信号的具体设置，设定检测波长，波长带宽，参比波长，参比波长带宽。一般设定带宽为1 nm，设定参比波长为600 nm，参比波长的带宽为1 nm。
6.1.6设定完成后浏览程序参数，编辑、修改不适合处，最后单击工具栏中的“保存”按钮，给新建的这个程序起一个名字，若要新建一个文件夹，可点右上方的新建文件夹，然后将这个程序文件放入其中。
6.2建立方法文件
6.2.1依次点击File/New，选中“Method File”后,进入方法编辑向导界面。方法文件是在进完样后采集到谱图进行处理数据时需要用到的，所以现在不需要做任何改动。不能够等谱图出来之后再去建方法文件。最好将它和刚才建的程序文件放在同一个文件夹里。
6.3建立新序列文件
6.3.1依次点击File/New，选中建序列文件“Sequence (using Wizard)”，后进入序列编辑向导界面。
.6.3.2设定样品信息
6.3.2.1设定样品名称，如果待测样品溶液名字一样，只是序号是按顺序递加的，可以在方框的空白处输入待测样品溶液名，并通过右边的三角箭头使用“sample Number”,让软件自动加上一个序号。 Number of 为待测样品溶液的个数。Injection per为每个待测样品溶液需要进样的次数。Start为第一个待测样品溶液放在自动进样器上的位置，如果所测的待测样品溶液是按顺序放在自动进样器上的，则输入第一个待测样品溶液的位置，软件会自动输入以下各个待测样品溶液的位置。Injection为进样体积。
6.3.2.2设定好后，按左下方的“Apply”后，可将待测样品溶液的信息在右方以列表的方式显示出来。
6.3.3设定对照品信息
6.3.3.1同设定样品信息。但有时候由于待测样品太多，花的时候较长，为了防止保留时间漂移，峰面积有变化，消除系统的误差等原因，需要采用间隔进样的方式进样。Variatio standards after each unknown意思为每进几个标准溶液后进几个待测溶液，再进个标准溶液后进几个待测样品溶液。
6.3.3.2设定好后，按左下方的“Apply”后，可将所有样品溶液的信息在右方以列表的方式显示出来，且标准溶液在前，待测样品溶液在后。
6.4点击图标进入浏览器“Browse”界面，找到编辑好的序列。在此界面可以对序列进行进一步的调整，增加或减少样品；改变样品名、样品类型、进样位置、进样量、分析程序、积分方法等参数，修改后保存序列。
6.5序列进样
6.5.1如果正在采集基线，则点工具栏中蓝色小圆点，停止采集基线，将跳出如下窗口：提示您是否保存刚才正在采集的基线谱图。如果要保存，则在“Save to sequence”前“√”后选择一个保存路径。通常是不保存的，则按右上方的“YES”键停止基线的采集。
6.5.2加入进样序列：击工具栏上“Start /stop Batch”（开始/停止批进样）键，将跳出一个窗口，如果方框中有不需要做的序列（如果有，一般为上次未做完的序列），则选中后，点右边的“Remove”键，将其移走。点右上方的“Add…”将需要进样的序列加入列表中。点击底下右方的“Ready Check”，检查设置好的程序、方法、序列有没有错误或仪器有没有准备好。如果显示有红色感叹号图标，则说明有错误。下图显示的信息为需要占有多大电脑空间和需要用掉多少流动相，没有其它错误信息。单击“ok”，完成检查。
6.5.3开始进样：单击“Start”，仪器将会自动根据软件中设定的先后顺序开始进样，直至所有的样品全部进样。若软件中相应的位置上并没有放置样品瓶，仪器将会自动识别，并跳过该样品进下一个样品。当第一个样品进完后，将会等待第二个样品进样，这时候保留时间(Retention Time)显示为0.00min。
7处理数据
7.1点击控制面板上的“Browser”进入需要处理数据的序列。
7.2选择定量方法点击方法文件“测试方法.qnt”。
7.2.1基本设置“Genernal”含量的单位后面输入最后的计算出来的量的单位，液相样品一般为浓度单位，固体一般要算百分含量。
7.2.2积分参数设定 “Detection”：Minimum Area：设定最小峰面积，一般设置0.01～10之间。低于设定值的将不会积分；Valley To Valley On：设置从峰谷到峰的积分；Inhibit Integration On：设定不积分段从什么时候开始不积分，Inhibit Integration Off：设定不积分段从什么时候结束不积分（ON和OFF是成对使用的。）；Fronting sensitivity Factory： 前沿峰灵敏度因子，一般设为2～4为宜；Tailing sensitivity Factory：拖尾峰灵敏度因子，一般设为2～4为宜；Rider Threshold：肩峰值。设定为100%，两分不开的峰垂直分开单独积分。
7.2.3峰表（Peak Table）设置：在第一列中输入标样的名字；在第二列在输入相对应的保留时间；在第三列中输入一个正负范围，一般在设置值≤保留时间的5%；第四列为定量标准，一般为外标法（External）；第五列为定量类型，一般以面积来定量（Area）；第六列为校正类型a) 单点校正一般做样都是单点校正，所以选第一项：过原点的直线（Linear），b) 线性校正如果要做线性的话，就要选第二项：带截距的直线（Linear with Offset）。其它设置都不用改动。
7.2.4定量表（Amount Table）
7.2.4.1编辑列Edit Amount Column在表格的下方任何一位置点右键，选中“Edit Amount Column”,在“Assign standards on the”后面的下拉菜单中选择“Name”， 右边框中将会显示有几个标样。点击左边方框下的自动生成列“Auto Generate，a) 做线性的话就选择第一项（..separate..），表明要生成五个不同的列。b) 做单标定量的话选择第二项（..single..），表明生成一个列。在“Amount”列中输入标样的浓度。
7.2.5校正（Calibration）如果有一点误差较大（偏离直线较远），不想让它参与校正。比如说第一个点不想要，则将对应的“√”去掉，按确定即可。
7.2.6 保存刚才方法的更改。
8报告输出：在“Browse”界面下，打开序列，双击需要处理的标准样品文件，点击菜单“View/Printer-Layout”，进入需要打印的界面：类似于Excel电子表格，分好几页显示，第一页为基本谱图和数据（Integration）；第二页为：单标的校正曲线（Calibration current peak）,显示的有：线性图、相关系数（Corr….）、截距(offset)、斜率(slope)、相对标准偏差(RSD)；第三页为：混标的校正曲线（Calibration Batch）一般用不上；第四页为：峰的分析。包括：基线噪音（Noise）、分离度（Resol.）、对称性（Asym.）、理论塔板数（Plates）等；第五页为：统计表（Summary）.一般都需要打印；第七页为谱图的重叠（Overlay print）。选择合适的报告页面，打印输出。
9关机
9.1数据采集完毕后，在控制面板检测器设定中，关灯，然后断开仪器各部件的控制，关闭检测器。
9.2按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、管路、自动进样器、进样针。确保冲洗干净后，关闭各部分电源。
9.3退出色谱工作站，关闭电脑。
10.注意事项
10.1 泵
10.1.1如果流动相中没有电解质（即缓冲盐或酸等），最好用50%的甲醇冲洗约20～40分钟后就直接用甲醇或乙腈冲洗流路约20～40分钟。
10.1.2如果流动相中有电解质，需要先用5%的甲醇冲洗色谱柱约60分钟后，最好用50%的甲醇冲洗约20～40分钟后，再用纯甲醇或乙腈冲洗流路约20～40分钟。
10.1.3放置了一天或以上的水相或含水相的流动相如需再用，需用微孔滤膜重新过滤。
10.1.4蠕动泵清洗瓶中的5%的甲醇要求每周至少换二次。若液相使用频率不高，建议每天使用前更换，以免水长细菌损坏泵中各组件。
10.1.5为了保证P680的安全运行，必须设定高、低压极限（一般安装时已设置好）；
10.1.6流动相禁止使用氯仿、三氯（代）苯、亚甲基氯、四氢呋喃、甲苯等；慎重使用四氯化碳、乙醚、异丙醚、酮、甲基环己胺等，以免造成对柱塞密封圈的腐蚀。若需要使用正相系统分析样品，需要另行安装耐腐蚀的正相密封圈。
10.1.7拧松快速清洗阀时，不宜拧得过松。一般拧松2圈左右即可。拧得过松流动相容易从清洗阀部位流进泵头中引起报警。
10.1.8使用快速清洗阀时，只能一个一个通道的排气泡，不得将几个通道同时按比例排气泡，比例阀的快速切换易导致损坏。
10.1.9没有配制脱气机的，流动相一定要超声脱气。有脱气机的，泵电源开启后，等脱气机停止工作后再进行泵的其它操作。
10.2自动进样器
10.2.1自动进样器建议用50%的甲醇洗针。
10.2.2每天使用自动进样器进样前都要按一下控制面板上的“wash”键，仪器会自动排除定量环和针中的残留气泡。
10.2.3每天洗针前要检查一下洗针瓶中是否有洗液（50%甲醇）。
10.3 检测器
10.3.1检测器的紫外或可见灯在长期打开的情况下，一定要保证有溶液流经检测池。若不需要做样，可设置一个较低的流速（如0.05ml/min）或关闭灯的电源。
10.3.2检测器的灯一般是在流通池有溶液连续流动几分钟后才开的。如果流动池中有气泡，则会提示漂移过大无法通过自检和校正。
10.3.3检测器的氘灯或钨灯不要经常开关，每开关一次灯的寿命约损失30小时。若仪器经常使用，可几天开关灯一次。
10.4 整个系统
10.4.1缓冲溶液与有机溶剂互相转换前一定要用5%甲醇清洗泵，防止盐在有机相中结晶损坏泵中各组件。
10.4.2缓冲溶液的浓度不能高于0.5 mol/L，pH范围2～12，Cl-的浓度要小于0.1 mol/L（防止腐蚀流路）。
10.4.3仪器长时间不用，每个泵通道和整个流路一定要用甲醇冲洗后保存，以免结晶或造成污染。
10.4.4待测样品或标样在流动相中一定要易溶，否则进样后会结晶造成定量不准确或堵塞色谱柱。
10.5软件
10.5.1不要轻易地在windows窗口下删除软件所在根目录或子目录下的文件，以免造成软件无法正常使用。
10.5.2仪器不使用时，密码钥匙不要经常拆来拆去，容易导致密码钥匙损坏。
10.5.3采集紫外信号时，若分析物质的最大波长已知，则尽量减少采集的通道个数，以免占用电脑的空间。
10.5.4软件系统的配置（Server Configuration）在软件安装完成后，不要改动。